亚洲型寨卡病毒实时荧光定量PCR检测方法建立

亚洲型寨卡病毒实时荧光定量PCR检测方法建立

论文摘要

目的分析亚洲型寨卡病毒基因组序列特征,建立亚洲型寨卡病毒的荧光定量PCR检测技术。方法通过分析亚洲型寨卡病毒全基因组核酸序列,选取亚洲型寨卡病毒的保守区设计引物和TaqMan探针,建立标准曲线并检测其特异性与敏感性。结果荧光定量PCR测试结果表明所设计的引物和探针特异性良好,对非洲型寨卡病毒、Ⅰ~Ⅳ型登革病毒和丙型肝炎病毒核酸检测无交叉反应;同时灵敏度较高,可达3.415×100 copies/μL;构建了标准曲线,回归方程为Y=–3.227 3logX+38.79,相关系数R2=1,扩增效率E=102%。结论建立了一种检测亚洲型寨卡病毒的荧光定量PCR技术,可用于临床亚洲型寨卡病毒感染患者的病原分型、早期诊断及预防。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 病毒株与质粒
  •     1.1.2 主要试剂与仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 引物探针设计
  •     1.2.2亚洲型寨卡病毒阳性标准品制备
  •     1.2.3 特异性试验
  •     1.2.4 敏感试验
  •     1.2.5 荧光定量PCR反应
  • 2 结果
  •   2.1 标准曲线的建立 (图1、2)
  •   2.2 特异性 (图3)
  •   2.3敏感性 (图4、表1)
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 彭淑莹,覃直然,陈嘉雯,余健海,陆维智,何晓恩,朱利,肖维威,赵卫

    关键词: 实时荧光定量,亚洲型寨卡病毒,探针

    来源: 中国公共卫生 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 南方医科大学公共卫生学院三级生物安全实验室

    基金: 国家自然科学基金(31470271,81730110)

    分类号: R373

    页码: 114-117

    总页数: 4

    文件大小: 1088K

    下载量: 175

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