耿坤静杜博勋耿慧娟(保定市传染病医院071000)
【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）25-0172-01
【关键词】乙型肝炎病毒大蛋白生物学功能
乙型肝炎病毒大蛋白（hepatitisBvinislargesurfaceprolieinHBV-LP）存在于感染性颗粒（Dane感染）和亚病毒管状颗粒上，是病毒形成完整外膜的重要标志。近年来随着HBV-LP中前S区抗原在乙肝发病机制、感染与复制等方面研究的深入，研究者们逐渐认识到乙肝表面抗原前S区具有越来越重要的临床意义[1]。现将HBV-LP的结构特点、生物学功能、临床检测与应用简述如下：
1HBV-LP的结构特点
HBV-LP具有双重跨膜拓扑结构，由PreS1、PreS2和S构成。在病毒粒子成熟与分泌过程中，大蛋白PreS结构域开始时均位于胞质内（i-preS）、通过蛋白S的跨膜折叠区在N端的I型及内部Ⅱ型号和疏水C端内质网膜、大约一半大蛋白的拓扑结构在翻译后发生了重折叠，使得preS区域转移进内质网膜的腔内一侧（e-preS），从而产生大蛋白的独特双重跨膜拓扑结构。
2HBV-LP的生物学功能
HBV-LP在病毒复制过程中起关键性作用，主要依赖于其特殊拓扑结构，通过双重跨膜拓扑结构，HBV-LPpre-S结构域定位于病毒包膜的两侧，在病毒生活周期中执行两个重要功能：在外侧，e-preS结构域暴露在病毒粒子的表面，通过preS1的N末端区域作为配体与病毒受体结合；在内侧，i-preS结构域作为基质蛋白在病毒粒子形成的出牙过程中，通过其中103位精氨酸和124位丝氨酸之间或92-113位氨基酸之间（与病毒基因性有关）的Pre-S区域直接与核壳相互作用，同时介导HBsAg亚病毒颗粒的细胞质滞留，这是病毒粒子形成所必须的，该区域的小氨基酸的替换会阻断病毒粒子的形成[2]。因此将前S区作为一个整体来进行功能研究会更为有意义。
3HBV-LP临床检测与应用
HBV-LP检测采用酶联免疫吸附(ELISA)法：HBV-LP具有反式激活病毒复制功能，研究结果表明具有复杂拓扑结构的前S区抗原是HBV-LP的特有特征，应用结构生物学和免疫学技术，筛选出针对HBV-LP构象型前S抗原的单克隆抗体，在微孔条上预包被此抗体，配以酶标记抗体（HBsAb-HRP）及TMB显色剂等其他试剂，采用双抗体夹心法原理定性检测人血清或血浆中的HBV-LP。比单独检测HBVPreS1Ag更能准确反映出患者体内病毒复制情况。PreS1Ag作为大蛋白的一部分，无法模拟其复杂的拓扑结构。在制作单克隆抗体时其序列会被折叠、卷曲而失去暴露表位的机会，这样的低级结构抗原制作出的单克隆抗体在实际应用中便可以导致漏检[3]。
目前，临床上用于评估乙肝患者病毒复制与抗病毒疗法的监测指标主要是HBVDNA载量和HBeAg的血清转换。虽然定量PCR方法监测HBVDNA已成为目前判定HBV复制最直接和可靠的指标，但对于抗病毒治疗患者来讲，HBVDNA阴性并不意味着已经清除了病毒。因为肝内cccDNA的降低远远低于血清HBVDNA水平，血清HBVDNA不能真实反映肝组织内HBV复制的情况。但在HBeAg阴性的慢性乙肝患者中，由于HBV基因前C区或者CP区的变异，导致HBeAg合成障碍，容易造成漏检，HBeAg呈阴性而病毒仍在复制现象。
被损伤肝细胞释放的大蛋白和病毒颗粒上所包含的大蛋白在血流中可以被特异的抗体所捕捉，使得血清HBV-LP检测成为可能。血清HBV-LP检测时对HBV完整外膜的存在判断，代表着病毒基因或亚病毒颗粒的存在。国内毛远丽等[4]报道血清HBV-LP是新的反映HBV感染者体内病毒复制的血清学检测指标，且较HBV-DNA、HBeAg、HBVpreS2、HBVpreS1、均敏感，诊断性具有较高的敏感度、特异度与准确度,是HBVm有益的补充。魏红山、乐爱平等[5.6]报道血清HBV-LP检测是监测HBeAg阴性和低水平DNA的HBV感染者体内病毒复制程度、疾病进程、疗效与预后判断的血清学敏感指标。有助于鉴别HBeAg阴性活动期肝炎，监测低水平HBV-DNA患者的疾病进展与抗病毒疗效。指导临床及时、合理治疗，弥补HBV-DNA监测的不足，提高临床HBV感染者的实验诊断与治疗水平。
参考文献
[1]BrussV,VielufK.FunctionsoftheintemalPreSdomainofthelargesurfaceProteininHepatitisBVirnusParticlemorphogenesis.Jviorl,1995,69(2):6652-6657.
[2]LanbertC,MannS,PrangeR.Assesamentofdeterminanlsaffeetingthedualtopolopyofhepadnavirallargeenvelopeproteins[J].JGenVirol,2004,85(22).1221-1225.
[3]彭建明，李金明.病毒样颗粒在免疫测定中的应用研究进展[J].中华检验医学杂志，2005,28（2）:214-216.
[4]毛远丽，李伯安，马洪滨，等.乙肝患者外膜蛋白血清学检测及对于判定HBV-DNA复制的意义[J].中华实验和临床病毒学杂志，2006,20（3）：276-278.
[5]魏红山，黄玉波，宋淑静，等.e抗原阴性慢性乙型肝炎患者血清表面抗原大蛋白水平与乙型肝炎病毒DNA之间的关系[J].中华肝脏病杂志，2006,14（7）：543-546.
[6]乐爱平，胡国信.乙肝病毒大蛋白在血清HBeAg阴性与低水平HBV-DNA乙肝患者中的检测意义[J].现代免疫学杂志，2008,28（3）:244-247.