可能突变体论文_孙辉,周鹏,汤斌,黎冰梅,廖卫平

导读:本文包含了可能突变体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,突变体,蛋白,胰腺癌,凋亡,论文,YFP。

可能突变体论文文献综述

孙辉,周鹏,汤斌,黎冰梅,廖卫平^[1]（2017）在《PRRT2突变体蛋白表达分析及其可能的致病机制》一文中研究指出目的发作性运动障碍(paroxysmal dyskinesia,PD)是具有高度临床异质性的常染色体遗传性疾病,分为发作性运动源性运动障碍(paroxysmal kinesigenic dyskinesia,PKD)、发作性非运动源性运动障碍(paroxysmal nonkinesigenic dyskinesia,PNKD)、发作性过度运动性运动障碍(paroxysmal exercised-induceddyskinesia,PED)和发作性夜发性运动障碍(Paroxysmal hypnogenic dyskinesia,PHD)四种亚型。目前已知PD与(本文来源于《第七届CAAE国际癫痫论坛论文汇编》期刊2017-10-27）

谢坤领^[2]（2014）在《剪接突变体MUC4/Y在胰腺癌细胞株MIApaca-2中的抗凋亡作用及可能机制》一文中研究指出背景胰腺癌起病隐匿,被称为“沉默杀手”,难以早期确诊,手术切除率低。多数病理类型恶性度高,对放化疗的敏感性也很差,胰腺癌根治性切除术后复发率也高达百分之九十以上,其五年生存率很低,中位生存时间仅在4到5个月。目前临床上仍缺乏有效的干预治疗措施,胰腺癌的一线化疗药物吉西他滨,也只能延长患者中位生存期数月。因此,进一步明确胰腺癌发病发展的细胞分子生物学机制,并且从细胞分子水平寻找胰腺癌的早期诊断和靶向治疗措施是目前的研究热点。研究发现胰腺癌相关分子人黏蛋白4(MUC4)参与了肿瘤的发生和演进,其在正常胰腺组织中不表达,在胰腺癌中呈现异常表达。然而人黏蛋白4的研究瓶颈是其分子量超大(基因片段>30KB),难以克隆及在真核细胞株中过表达,在一定程度上限制了其在生物学行为中基因功能和分子机制的深入研究,然而MUC4分子有着自身的特点,第一,MUC4有多达24个转录本,且只存在于胰腺癌而非正常胰腺和胰腺炎组织中,第二,从进化的角度来看,其独有的结构域(AMOP, NIDO, vWD, EGF-like和TR结构域)来自于不同的祖先蛋白,这些结构域在进化过程中各自保守,尤其串联重复序列区(也即TR结构域)与其他结构域在蛋白结构上有着明显的独立性。MUC4/Y是MUC4众多天然转录本中的一个,与MUC4全长转录本(sv0-MUC4)相比,其缺少了外显子2编码区,也即是缺少了串联重复序列TR区,但同时保留了其他结构功能区,分子量明显减重,利用慢病毒载体系统可以直接在细胞株中过表达,本研究拟从转录本MUC4/Y入手,研究其在胰腺癌细胞株MIApaca-2中的抗凋亡作用及可能机制。在此基础上以MUC4/Y为对照分子,利用结构域基因缺失突变技术可以进一步深入研究MUC4分子,希望本研究可以为更深入的理解MUC4以及其特征性结构域参与胰腺癌发生发展的分子机制提供一定基础。目的明确MUC4/Y在胰腺癌细胞中的表达及定位,重点探讨其对胰腺癌细胞株增殖、凋亡的影响及相关分子机制,为转录本MUC4/Y的存在意义提供证据,也为更加深入的研究MUC4独有结构域提供参照基础。方法1、荧光定量PCR检测8种胰腺癌细胞株中MUC4/Y的表达水平,构建MUC4/Y过表达慢病毒表达系统,收获重组慢病毒。感染胰腺癌细胞株以构建MUC4/Y上调细胞株模型。2、荧光定量PCR、western blot、细胞免疫荧光、免疫组织化学明确MUC4/Y在胰腺癌细胞株MIApaca-2中的过表达和定位,利用CCK-8和流式细胞仪检测MUC4/Y对胰腺癌细胞增殖和凋亡能力的影响。3、通过裸鼠皮下成瘤实验在体内进一步验证MUC4/Y对胰腺癌细胞株MIApaca-2增殖和凋亡的影响。4、western blot检测凋亡相关信号通路蛋白,探讨MUC4/Y参与胰腺癌恶性生物学行为的分子机制。结果1、在8种胰腺癌细胞株株中,MIApaca-2和Panc-1细胞株中MUC4/Y呈现低表达,成功构建了过表达MUC4/Y的重组慢病毒载体,并建立了稳定过表达MUC4/Y的细胞株模型。2、在MIApaca-2中过表达MUC4/Y后,MUC4/Y可以定位于细胞质和细胞细胞膜,细胞形态发生改变,线粒体明显增多,细胞周期发生改变,细胞的增殖能力增强,凋亡能力减弱。3、动物体内实验进一步验证了MUC4/Y的促增殖和抗凋亡能力。4、MUC4/Y上调后,HER2的表达和磷酸化水平上升不明显,AKT和JNK相关信号通路被激活。结论1、MUC4/Y定位于细胞质和细胞膜,并能对细胞的宏观形态和亚细胞结构产生影响。2、MUC4/Y能够促进胰腺癌细胞株MIApaca-2的增殖和抗凋亡能力,并影响其细胞周期。其作用机制可能是通过激活AKT和JNK相关信号通路。3、MUC4/Y的研究提示：MUC4转录本的存在有着重要意义,另外在MUC4/Y分子的基础上通过缺失突变可以进一步研究MUC4分子特有结构域的功能。(本文来源于《南京医科大学》期刊2014-05-01）

可能突变体论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

背景胰腺癌起病隐匿,被称为“沉默杀手”,难以早期确诊,手术切除率低。多数病理类型恶性度高,对放化疗的敏感性也很差,胰腺癌根治性切除术后复发率也高达百分之九十以上,其五年生存率很低,中位生存时间仅在4到5个月。目前临床上仍缺乏有效的干预治疗措施,胰腺癌的一线化疗药物吉西他滨,也只能延长患者中位生存期数月。因此,进一步明确胰腺癌发病发展的细胞分子生物学机制,并且从细胞分子水平寻找胰腺癌的早期诊断和靶向治疗措施是目前的研究热点。研究发现胰腺癌相关分子人黏蛋白4(MUC4)参与了肿瘤的发生和演进,其在正常胰腺组织中不表达,在胰腺癌中呈现异常表达。然而人黏蛋白4的研究瓶颈是其分子量超大(基因片段>30KB),难以克隆及在真核细胞株中过表达,在一定程度上限制了其在生物学行为中基因功能和分子机制的深入研究,然而MUC4分子有着自身的特点,第一,MUC4有多达24个转录本,且只存在于胰腺癌而非正常胰腺和胰腺炎组织中,第二,从进化的角度来看,其独有的结构域(AMOP, NIDO, vWD, EGF-like和TR结构域)来自于不同的祖先蛋白,这些结构域在进化过程中各自保守,尤其串联重复序列区(也即TR结构域)与其他结构域在蛋白结构上有着明显的独立性。MUC4/Y是MUC4众多天然转录本中的一个,与MUC4全长转录本(sv0-MUC4)相比,其缺少了外显子2编码区,也即是缺少了串联重复序列TR区,但同时保留了其他结构功能区,分子量明显减重,利用慢病毒载体系统可以直接在细胞株中过表达,本研究拟从转录本MUC4/Y入手,研究其在胰腺癌细胞株MIApaca-2中的抗凋亡作用及可能机制。在此基础上以MUC4/Y为对照分子,利用结构域基因缺失突变技术可以进一步深入研究MUC4分子,希望本研究可以为更深入的理解MUC4以及其特征性结构域参与胰腺癌发生发展的分子机制提供一定基础。目的明确MUC4/Y在胰腺癌细胞中的表达及定位,重点探讨其对胰腺癌细胞株增殖、凋亡的影响及相关分子机制,为转录本MUC4/Y的存在意义提供证据,也为更加深入的研究MUC4独有结构域提供参照基础。方法1、荧光定量PCR检测8种胰腺癌细胞株中MUC4/Y的表达水平,构建MUC4/Y过表达慢病毒表达系统,收获重组慢病毒。感染胰腺癌细胞株以构建MUC4/Y上调细胞株模型。2、荧光定量PCR、western blot、细胞免疫荧光、免疫组织化学明确MUC4/Y在胰腺癌细胞株MIApaca-2中的过表达和定位,利用CCK-8和流式细胞仪检测MUC4/Y对胰腺癌细胞增殖和凋亡能力的影响。3、通过裸鼠皮下成瘤实验在体内进一步验证MUC4/Y对胰腺癌细胞株MIApaca-2增殖和凋亡的影响。4、western blot检测凋亡相关信号通路蛋白,探讨MUC4/Y参与胰腺癌恶性生物学行为的分子机制。结果1、在8种胰腺癌细胞株株中,MIApaca-2和Panc-1细胞株中MUC4/Y呈现低表达,成功构建了过表达MUC4/Y的重组慢病毒载体,并建立了稳定过表达MUC4/Y的细胞株模型。2、在MIApaca-2中过表达MUC4/Y后,MUC4/Y可以定位于细胞质和细胞细胞膜,细胞形态发生改变,线粒体明显增多,细胞周期发生改变,细胞的增殖能力增强,凋亡能力减弱。3、动物体内实验进一步验证了MUC4/Y的促增殖和抗凋亡能力。4、MUC4/Y上调后,HER2的表达和磷酸化水平上升不明显,AKT和JNK相关信号通路被激活。结论1、MUC4/Y定位于细胞质和细胞膜,并能对细胞的宏观形态和亚细胞结构产生影响。2、MUC4/Y能够促进胰腺癌细胞株MIApaca-2的增殖和抗凋亡能力,并影响其细胞周期。其作用机制可能是通过激活AKT和JNK相关信号通路。3、MUC4/Y的研究提示：MUC4转录本的存在有着重要意义,另外在MUC4/Y分子的基础上通过缺失突变可以进一步研究MUC4分子特有结构域的功能。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。