导读:本文包含了重组体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:噬菌体,蛋白,肿瘤,基因,干扰,质粒,细胞。
重组体论文文献综述
李华,王战会[1]（2018）在《HBV C/D重组体的临床意义和C基因启动子/前C区病毒变异》一文中研究指出【据《Hepatol Int》2018年9月报道】题:HBV C/D重组体的临床意义和C基因启动子/前C区病毒变异(作者Li H等)HBV C/D重组体主要流行于中国西部的藏族地区,虽然有关C/D重组体的地域和民族分布已比较明确,但其临床意义和病毒在C基因启动子/前C区(BCP/PC)的变异特点仍不清楚。青海省传染病专科医院Li等进行了一项研究,共纳入174例藏族和汉族慢性HBV感染者,包括慢性乙型肝炎患者115例,肝硬化患者45例,肝癌患者14例,通过高通量测序对HBV的S和BCP/PC区准种组成和位点(本文来源于《临床肝胆病杂志》期刊2018年12期）
陈治中,胡丽华,卿吉琳[2]（2018）在《人类TIM-4-EGFP融合蛋白重组体的构建、表达和特性分析》一文中研究指出目的构建TIM-4-EGFP融合蛋白的原核表达载体,并评价表达的TIM-4-EGFP蛋白生物学活性。方法采用RT-PCR方法分别扩增TIM-4和EGFP的cDNA片段,将其克隆至pET28a重组质粒中。重组载体转化大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白表达,经镍金属螯合层析柱纯化。通过SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot鉴定重组蛋白。并通过荧光显微镜观察评价其生物活性。结果成功构建TIM-4-EGFP的原核表达载体并在大肠埃希菌中表达,TIM-4-EGFP融合蛋白经SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot鉴定证实。TIM-4-EGFP融合蛋白可以直接识别和结合凋亡细胞,而与活细胞不能结合。同时证实TIM-4-EGFP融合蛋白与凋亡细胞的相互作用可以被TIM-4-Ig融合蛋白阻断。结论成功构建TIM-4-EGFP表达载体并在大肠埃希菌中表达融合蛋白,表达的融合蛋白具有生物活性,可为将来TIM-4及其受体的研究提供可靠生物来源。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2018年03期）
傅敏,徐晓容[3]（2018）在《重组体pshRNA-dnmt1对肝癌细胞dnmt1基因表达的抑制作用》一文中研究指出目的以DNA甲基转移酶1(dnmt1)为靶基因构建重组体psh RNA-dnmt1,研究其对肝癌SMMC-7721细胞株内dnmt1基因表达的抑制作用。方法利用RNA干扰技术,构建靶向dnmt1的sh RNA干扰重组体psh RNA-dnmt1,经测序鉴定后转染到肝癌SMMC-7721细胞株,用RT-PCR法检测dnmt1 m RNA水平,用Western-blot法检测dnmt1蛋白的表达。结果转染后SMMC-7721细胞中dnmt1 PCR扩增带亮度及dnmt1蛋白杂交带亮度明显减弱,重组体psh RNA-dnmt1对肝癌细胞dnmt1基因的抑制率在转染后24 h、48 h、72 h分别为41.6%、63.0%、84.1%,对dnmt1蛋白的抑制率分别为48.2%、68.5%、81.5%。结论重组体psh RNA-dnmt1能明显抑制肝癌SMMC-7721细胞株内dnmt1基因表达。(本文来源于《中国医药指南》期刊2018年11期）
李积杰,保成兰,尕玛才培,王赟,李微[4]（2017）在《乙型肝炎病毒C/D重组体毒株的叁种鉴定方法》一文中研究指出目的针对HBV C/D重组体在我国西部地区尤其是藏族人群中广泛流行,基因分型时易被错分为D基因型等问题,建立相对准确的鉴定C/D重组体的方法。方法以来自西部地区的25例HBV感染者为例,分别通过PCR片段长度法、S和前C/C基因序列进化树分析法、全基因序列精细分析法对C/D重组体进行鉴定比较。结果 D基因型存在33 bp缺失,在S基因区酶切或测序的基础上,通过跨缺失区段的PCR产物长度可区分D与C/D重组体,该法简单易操作,适于大样本初筛;S和前C/C基因序列进化树分析法可明确鉴定C/D重组体,准确度高;全基因序列精细分析法可对重组类型和重组位点进行精确分析,结果最为可靠。结论根据研究目的不同,应综合考虑运用几种C/D重组体鉴定方法,提高研究的效率和结果的可靠性。(本文来源于《肝脏》期刊2017年08期）
杜丽娟,杨婷,徐莉,邢爱英,刘忠泉[5]（2017）在《分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE的构建》一文中研究指出目的·构建分枝杆菌噬菌体(TM4)与复苏促进因子(Rpf)的重组体(TM4-RpfE),为联合抗结核药物实现杀灭结核休眠菌、缩短结核化疗疗程奠定实验基础。方法·电转化法将pJV53质粒转入耻垢分枝杆菌,制备重组工程菌;提取TM4基因组DNA;重迭PCR扩增目的融合基因hsp60-RpfE,多步重迭PCR扩增插入长片段HHRH(homologous+hsp60-RpfE+homologous);电转化法将噬菌体DNA与插入长片段HHRH共同转入重组工程菌,挑取单噬菌斑进行PCR和测序验证;SDS-PAGE分析重组噬菌体的蛋白表达。结果·重迭PCR扩增出全长901 bp大小的目的融合基因hsp60-RpfE和1 873 bp大小的插入长片段HHRH;PCR验证重组后的噬菌斑,分别在955 bp和301 bp处出现特异性条带;SDS-PAGE分析显示重组型噬菌体在21 000处出现特异性蛋白条带。结论·分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE构建成功,初步验证目的基因RpfE得到表达。(本文来源于《上海交通大学学报(医学版)》期刊2017年07期）
邓燕,方慧祺,伍红英[6]（2016）在《靶向结肠癌SW620细胞ZEB2-shRNA重组体构建及功能研究》一文中研究指出目的:利用RNA干扰技术,降低结肠癌SW620细胞中E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)基因的表达,观察ZEB2低表达对SW620细胞的生长影响。方法:用pLVX-shRNA2载体构建针对人ZEB2基因的干扰质粒shZEB2慢病毒感染细胞,G418筛选稳定转染细胞株,通过RT-PCR和Western blot检测ZEB2在SW620细胞中表达。采用克隆形成检测转染细胞克隆能力,划痕试验检测转染细胞的迁移力,RT-PCR检测转染细胞ZEB2基因表达水平,致瘤试验检测转染细胞在裸鼠的致瘤性。结果:成功构建shZEB2稳定转染的细胞株,shZEB2-SW620内ZEB2表达下降,导致shZEB2-SW620在细胞克隆能力、迁移力及致瘤性方面均下降(P<0.05)。结论:用RNA干扰技术可以靶向降低结肠癌细胞株SW620内ZEB2的表达,使其致瘤性降低,提示ZEB2可作为分子靶点用于结肠癌靶向治疗。(本文来源于《医学理论与实践》期刊2016年23期）
张雨薇,申屠伟慧,蒲朝霞,周丽明,黄朝旭[7]（2016）在《平板流动腔评价携重组体GPIba靶向脂质微泡与被激活的假性血友病因子(VWF)之间的粘附效能》一文中研究指出目的检测不同剂量的生物素标记GpIbα抗体与脂质微泡的结合效率,模拟生理血流条件,评价携重组体GPIba靶向脂质微泡与被激活的假性血友病因子(VWF)之间的粘附效能。方法应用声振法制备脂质微泡(裸微泡组),生物素-亲和素桥接法制备生物素化携重组体GPIba靶向脂质微泡(靶向组)和携非特异性IgG的脂质微泡(对照组),库尔特计数仪检测微泡的粒径分布;分别将30μl、60μl、120μ1GpIbα及IgG与微泡200μl混合,应用流式细胞仪检测不同剂量的生物素标记的GpIbα、IgG与脂质微泡的特异性结合率;以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为细胞模型,研究10ml 1μg/ml细菌脂多糖(LPS)刺激内皮细胞5h后VWF的表达情况;在平行板血流灌注腔模拟的不同流场环境下(应切速率为300 S-和500 S-),观察叁种不同微泡对炎性HUVEC内皮细胞的黏附作用,应用免疫组织化学分析以确定vWF的表达量差异。结果 30μlGpIbα与200μl微泡混合组,抗体微泡结合率为7.2%,60μ1GpIbα与200μl微泡混合组,抗体微泡结合率为30.7%,120μlGpIbα与200μl微泡混合组,抗体微泡结合率为37.9%;在LPS刺激下,内皮细胞vWF表达显着上调;平行板流动腔实验中靶向组炎性内皮细胞平均结合微泡数最多,剪切应力300S-为17个,剪切应力500 S-为4个,免疫组织化学分析显示LPS刺激HUVEC后vWF表达量在叁组不同微泡中无明显差异。结论不同浓度生物素标记的GpIbα均能与脂质微泡特异性结合,结合率呈剂量依赖性;在LPS刺激下,内皮细胞vWF表达显着上调;在平板流动腔中,携重组体GPIba靶向微泡可特异性地与被激活的vWF结合,有助于判定下一步动物实验中超声分子成像的效果和靶向微泡的在体应用环境。(本文来源于《2016年浙江省超声医学学术年会论文汇编》期刊2016-09-23）
罗夙医,黄薇,王晶,王玺赟,李劲涛[8]（2016）在《原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究:随机对照实验方案》一文中研究指出背景:前期研究采用2-DE/MALDI-TOF/MS方法,发现原肌球蛋白4在脊髓表达增加,但迄今为止,有关原肌球蛋白4与脊髓损伤的发病机制和进展的关系仍知之甚少。方法/设计:(1)随机对照动物实验:建立脊髓全横断损伤大鼠模型,通过2-DE双向电泳、氨基酸系列分析、q-PCR和Western-Blot方法明确脊髓横断损伤3-28 d在损伤脊髓头侧原肌球蛋白4的表达变化。(2)基因水平的机制探索实验:用基于体外慢病毒重组体技术敲除原肌球蛋白4,研究其对体外培养的脊髓神经元树突生长长度的作用;并通过BBB评分法评估原肌球蛋白4敲除对脊髓横断损伤大鼠运动功能恢复的作用。讨论:实验结果拟为脊髓横断损伤后促进运动功能恢复的治疗提供一种基于慢病毒重组体为载体携带原肌球蛋白4干扰RNA的、新的、有效的分子治疗策略,并阐明其治疗作用机制,为临床脊髓全横断损伤的基因治疗开辟乐观的应用前景。伦理批准:研究经昆明医科大学医学伦理委员会批准,大鼠的外科操作和术后护理遵循中国实验动物保护和伦理委员会的规定,并与美国国立卫生与健康研究院的指南一致。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2016年37期）
倪隽[9]（2016）在《CIA2A缺失重组体的构建及其在Hela细胞中对Apoptin诱导细胞凋亡作用的影响研究》一文中研究指出CIA2A(cytosolic Fe/S protein assembly machinery member 2A)亦称Fam96A,该蛋白包含160个氨基酸,大小为18.4kDa,编码该蛋白的基因位于15号染色体上。目前对CIA2A的研究较少,其可能具有的生物学功能为:CIA2A与CIAO1等蛋白结合形成Fe-S蛋白簇;通过调节WT1(Wilms tumor suppressor protein 1)的生物学功能,参与调节细胞的生长和分化等。Apoptin是鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)编码产生的一种含有121个氨基酸的小分子蛋白,分子量为13.6kDa。文献指出Apoptin仅在肿瘤细胞或转化细胞中具有促凋亡作用,而对人正常细胞不能产生凋亡效应,其亚细胞定位是决定特异性诱导细胞凋亡的关键因素之一,在肿瘤细胞和转化细胞内Apoptin是定位于细胞核的。本课题组前期研究成果发现:通过酵母双杂交实验筛选出CIA2A该蛋白质能够与Apoptin相互作用,并在正常细胞和肿瘤细胞中均证实了这一相互作用。临床组织标本的检测结果显示:肿瘤组织中,CIA2A低表达;正常组织中,CIA2A高表达。如前所述,Apoptin特异性诱导肿瘤细胞凋亡,而在正常细胞中Apoptin促凋亡活性被抑制。由此我们推测CIA2A与肿瘤细胞生长及Apoptin的肿瘤特异性诱导凋亡活性具有相关性。对此我们拟通过构建CIA2A不同肽段缺失的重组体,研究CIA2A在肿瘤细胞中对Apoptin诱导凋亡功能的影响及其与结构的关系。目的:研究CIA2A对子宫颈癌Hela细胞凋亡率的影响及其初步分子机制;研究CIA2A对Apoptin促Hela细胞凋亡活性的影响及其初步分子机制;研究CIA2A对Apoptin在Hela细胞中亚细胞定位的影响及其初步分子机制。方法:采用分子克隆技术,构建仅带myc标签的CIA2A不同肽段缺失的重组真核表达载体。依据CIA2A一级序列中的DUF59结构域构建3个重组体,分别为:CIA2A△1(缺失N端1-38氨基酸)、CIA2A△2(缺失DUF59结构域)和CIA2A△3(缺失C端119-160氨基酸)。将上述重组体分别单独转染至子宫颈癌Hela细胞中,利用流式细胞术检测CIA2A及其各缺失重组体对Hela细胞凋亡率的影响;将上述重组体和pcDNA3.1-flag-Apoptin质粒共同转染至Hela细胞中,利用流式细胞术检测CIA2A及其各缺失重组体在Hela细胞中对Apoptin诱导细胞凋亡作用的影响;免疫荧光技术检测CIA2A及其各缺失重组体对Apoptin在Hela细胞的亚细胞定位影响。结果:本实验成功构建了CIA2A不同肽段缺失的重组体。将CIA2A及其各缺失重组体单独转染、CIA2A及其各缺失重组体分别与Apoptin共同转染至Hela细胞中后,均能成功表达相应蛋白。CIA2A及其各缺失重组体分别单转至Hela细胞后,流式细胞术结果显示:CIA2A、CIA2A△1对Hela细胞具有促凋亡效应(凋亡率分别为46.5%、40.1%,P<0.01),而CIA2A△2和CIA2A△3没有该促凋亡作用(凋亡率分别为15.5%、13.8%,ns)。CIA2A及其各缺失重组体分别与Apoptin共转至Hela细胞中后,流式细胞术结果显示:CIA2A、CIA2A△2和CIA2A△3对Apoptin本身促Hela细胞凋亡活性均有抑制效果(凋亡率分别为38.4%、36.8%、32.5%,P<0.01),而CIA2A△1对Apoptin该活性没有明显影响(凋亡率为42.6%,ns);免疫荧光实验结果显示:全长的CIA2A、CIA2A△2,CIA2A△3能使原本应该定位于Hela细胞核的Apoptin转而定位于细胞质,CIA2A△1而不存在上述作用,Apoptin仍然位于细胞核中。结论:1.CIA2A对Hela细胞具有促凋亡效应,该功能对应肽段位于CIA2A△2和CIA2A△3所缺失的区域,即DUF59结构域和C端119-160氨基酸之间。2.CIA2A对Apoptin促Hela细胞凋亡活性有抑制作用,该功能对应肽段位于CIA2A△1所缺失区域,即N端1-38氨基酸之间。3.CIA2A可使原本应定位于Hela细胞核的Apoptin转而定位于细胞质,该功能对应肽段位于CIA2A△1所缺失区域,即N端1-38氨基酸之间。以上数据可为CIA2A的生物学功能研究充实新的资料,为将来Apoptin可能作为抗肿瘤药物的临床应用提供前期研究基础。(本文来源于《华中科技大学》期刊2016-05-01）
王福青,周伟,赫欣[10]（2015）在《脂联素重组体对结肠癌细胞体外侵袭转移的影响》一文中研究指出目的探讨结肠癌细胞株SW-480中脂联素受体的表达情况以及人脂联素重组体对结肠癌体外增殖侵袭能力的影响。方法通过RTPCR试验检测脂联素受体1和受体2在结肠癌细胞株中的表达,然后将SW-480细胞分设对照组和脂联素重组体作用(1、10、30、45、60μg/m L)组,作用后,分别以MTT法、划线迁移实验检测脂联素重组体对结肠癌细胞增殖、迁移能力的影响。结果脂联素受体1、2在该细胞株中均有表达,脂联素重组体质量浓度高于10μg/m L时,对SW-480细胞生长具有明显的抑制作用(P<0.01),抑制作用随着浓度增高而增强;当脂联素重组体浓度大于30μg/m L时,能明显地降低肿瘤细胞体外侵袭迁移能力(P<0.01),抑制率随脂联素重组体浓度的升高而增加,介于1.8%~42.0%之间。结论脂联素重组体在大于10 g/m L时,可能对结肠癌细胞的增殖迁移产生较为明显的影响。(本文来源于《当代医学》期刊2015年24期）
重组体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建TIM-4-EGFP融合蛋白的原核表达载体,并评价表达的TIM-4-EGFP蛋白生物学活性。方法采用RT-PCR方法分别扩增TIM-4和EGFP的cDNA片段,将其克隆至pET28a重组质粒中。重组载体转化大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白表达,经镍金属螯合层析柱纯化。通过SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot鉴定重组蛋白。并通过荧光显微镜观察评价其生物活性。结果成功构建TIM-4-EGFP的原核表达载体并在大肠埃希菌中表达,TIM-4-EGFP融合蛋白经SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot鉴定证实。TIM-4-EGFP融合蛋白可以直接识别和结合凋亡细胞,而与活细胞不能结合。同时证实TIM-4-EGFP融合蛋白与凋亡细胞的相互作用可以被TIM-4-Ig融合蛋白阻断。结论成功构建TIM-4-EGFP表达载体并在大肠埃希菌中表达融合蛋白,表达的融合蛋白具有生物活性,可为将来TIM-4及其受体的研究提供可靠生物来源。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组体论文参考文献
[1].李华,王战会.HBVC/D重组体的临床意义和C基因启动子/前C区病毒变异[J].临床肝胆病杂志.2018
[2].陈治中,胡丽华,卿吉琳.人类TIM-4-EGFP融合蛋白重组体的构建、表达和特性分析[J].华中科技大学学报(医学版).2018
[3].傅敏,徐晓容.重组体pshRNA-dnmt1对肝癌细胞dnmt1基因表达的抑制作用[J].中国医药指南.2018
[4].李积杰,保成兰,尕玛才培,王赟,李微.乙型肝炎病毒C/D重组体毒株的叁种鉴定方法[J].肝脏.2017
[5].杜丽娟,杨婷,徐莉,邢爱英,刘忠泉.分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE的构建[J].上海交通大学学报(医学版).2017
[6].邓燕,方慧祺,伍红英.靶向结肠癌SW620细胞ZEB2-shRNA重组体构建及功能研究[J].医学理论与实践.2016
[7].张雨薇,申屠伟慧,蒲朝霞,周丽明,黄朝旭.平板流动腔评价携重组体GPIba靶向脂质微泡与被激活的假性血友病因子(VWF)之间的粘附效能[C].2016年浙江省超声医学学术年会论文汇编.2016
[8].罗夙医,黄薇,王晶,王玺赟,李劲涛.原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究:随机对照实验方案[J].中国组织工程研究.2016
[9].倪隽.CIA2A缺失重组体的构建及其在Hela细胞中对Apoptin诱导细胞凋亡作用的影响研究[D].华中科技大学.2016
[10].王福青,周伟,赫欣.脂联素重组体对结肠癌细胞体外侵袭转移的影响[J].当代医学.2015
论文知识图
