噬菌体多肽库论文-吴凡,庄乃保,梁延连,苏宇清,梁爽

噬菌体多肽库论文-吴凡,庄乃保,梁延连,苏宇清,梁爽

导读:本文包含了噬菌体多肽库论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:RhD,噬菌体,效果研究

噬菌体多肽库论文文献综述

吴凡,庄乃保,梁延连,苏宇清,梁爽[1](2018)在《RhD噬菌体多肽的免疫遮蔽效果研究》一文中研究指出目的探讨RhD噬菌体多肽遮蔽抗-D与RhD抗原的结合位点的有效性。方法根据随机噬菌体展示文库筛选得到RhD抗原模拟多肽的氨基酸序列,合成RhD噬菌体多肽。利用生物信息学技术分析多肽理化性质及二级结构,微柱凝胶低离子抗人球蛋白卡凝集抑制实验验证有效多肽,显微镜观察多肽有效遮蔽浓度,流式细胞仪法检测多肽遮蔽效果。结果 Peptide 4噬菌体多肽最为稳定,未形成无规则卷(本文来源于《中国输血协会第九届输血大会论文专辑》期刊2018-11-01)

孟慧[2](2017)在《基于赭曲霉毒素A噬菌体多肽模拟表位的免疫传感器的研究》一文中研究指出赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)主要是由青霉属和曲霉属代谢的次级产物,对人畜有强致癌性。因此,各国普遍加强了对OTA的监管。免疫传感器作为一种重要的分析手段,在OTA检测中具有举足轻重的地位。本研究采用金纳米粒子(Gold nanoparticles,GNPs)和PEG聚合物(Mal-PEG-NH2)于金电极(Gold electrode,GE)表面合成功能化PEG聚合物刷,使anti-OTA-McAb与聚合物刷共价偶联,并通过特异性结合OTA噬菌体多肽模拟表位,建立了基于免疫学竞争原理的OTA传感器。主要研究内容如下:1基于OTA噬菌体多肽模拟表位建立ELISA分别以OTA噬菌体多肽模拟表位与人工抗原为免疫元件建立了ELISA。测得以人工抗原/anti-OTA-McAb建立的ELISA标准曲线的线性范围为0.20~13.52ng/mL,半抑制浓度(Half inhibition concentration,IC50)为1.66 ng/mL;以OTA噬菌体模拟表位/anti-OTA-McAb建立的Phage-ELISA标准曲线,其线性范围为0.01~0.57 ng/mL,IC50为0.09 ng/mL。2基于OTA噬菌体多肽模拟表位建立传感器2.1 GNPs-传感器采用循环伏安(cyclic voltammetry,CV)一步沉积法在金电极表面修饰GNPs,将3-巯基丙酸(3-mercaptopropionic acid,MPA)共价键与GNPs偶联,接着固定anti-OTA-McAb于电极表面。从而制备了GNPs-免疫传感器,其线性范围0.15~1.84 pg/mL,IC50值为0.53 pg/mL,最低检测限(Limit of detection,LOD)为20.48 fg/mL。2.2 GNPs-Mal-PEG-NH2-免疫传感器以电沉积的方式将GNPs沉积在金电极表面,再通过层层自组装依次将MPA、半胱氨酸(Cysteine,Cys)和Mal-PEG-NH2修饰在电极上作为固定抗体的电极基质,制备了GNPs-Mal-PEG-NH2免疫传感器。该传感器的IC50为81.85 fg/mL,线性范围9.51~703.84 fg/m L,LOD为2.05 fg/mL,与GNPs-免疫传感器相比,灵敏度提高了近10倍。该传感器与AFB1、DON、ZEN和FB1无明显交叉反应。在啤酒和玉米样品中的加标回收率分别为99.33%~107.30%和89.61%~107.40%。3啤酒样品的检测分别采用制备的GNPs-Mal-PEG-NH2-免疫传感器、市售ELISA试剂盒及高效液相色谱对25个啤酒样品中的OTA含量进行检测,未发现有OTA超标的样品,叁者检测结果基本一致。(本文来源于《南昌大学》期刊2017-05-01)

卫倩,于丽凤,赵琳,魏敏杰[3](2016)在《利用噬菌体多肽库筛选卵巢癌细胞OVCAR3特异性靶向多肽的研究》一文中研究指出目的应用噬菌体展示技术,筛选出能够与人源性卵巢癌细胞OVCAR3特异性结合的阳性噬菌体,进而为大肠癌的靶向治疗提供新的方向。方法以人源性卵巢癌细胞株OVCAR3为靶细胞,人正常卵巢上皮细胞HOSEPIC为对照组,从噬菌体12肽库(PH.D.12)中进行3轮减数筛选,挑选出能够与人源性卵巢癌细胞株OVCAR3特异性结合的阳性噬菌体克隆;然后以大肠杆菌为载体,扩增并纯化阳性噬菌体克隆;采用酶联免疫吸附实验和免疫荧光实验,进一步验证阳性噬菌体与OVCAR3细胞结合的特异性。结果经过3轮减数筛选后得到的噬菌体洗脱液的滴度为1.0×10~7pfu/ml;经大肠杆菌扩增后,纯化的阳性噬菌体克隆的滴度在2.0×10~(12)pfu/ml左右。酶联免疫吸附实验发现,1、2、5、6、9、33和34号噬菌体克隆与卵巢癌细胞OVCAR3的特异性结合的能力较强,明显高于该噬菌体与正常卵巢上皮细胞HOSEPIC的结合能力。并且免疫荧光实验进一步验证了上述阳性噬菌体与OVCAR3细胞的特异性结合能力。结论我们通过利用噬菌体展示技术,从噬菌体12肽库中筛选得到能与人源性卵巢癌细胞OVCAR3特异性结合的阳性噬菌体,为卵巢癌的靶向治疗提供了新的方向。(本文来源于《中国药理学会第十叁届全国化疗药理学术研讨会会议论文集》期刊2016-07-15)

王晓虹[4](2016)在《肿瘤干细胞体外诱导培养及特异性噬菌体多肽筛选》一文中研究指出尽管癌症治疗技术取得很大的进展,癌症病人的生存率依然很低。研究表明,肿瘤干细胞(Cancer Stem Cells,CSCs)的存在是造成癌症治疗无效、癌症复发和转移的主要原因,只有杀灭肿瘤干细胞才能真正治疗癌症。因此,建立有效的肿瘤干细胞体外诱导方法、研究肿瘤干细胞的耐药机制、寻找靶向肿瘤干细胞的特异性标志物对癌症治疗具有重要意义。乳腺癌和肺癌分别是女性和男性中发病率最高的癌症,本文以其作为研究对象,建立肿瘤干细胞体外诱导方法。低密度的肿瘤细胞在添加了成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、胰岛素和B27的无血清培养基中,能形成悬浮的细胞球。采用碱性磷酸酶染色、免疫荧光检测、流式细胞分析、实时荧光定量PCR和蛋白印迹等方法从表型、转录和翻译叁个层次对细胞球的干细胞特性进行验证,结果显示,无血清悬浮诱导的细胞球具有未分化的特性,高表达CD133、CD44、Sox2、Oct4和Nanog等干细胞标志基因,说明通过悬浮培养法诱导得到了肿瘤干细胞。通过药物内吞实验、毒性实验和ABCG2蛋白表达检测对悬浮培养的乳腺癌干细胞的耐药性进行研究。结果显示,MCF-7肿瘤干细胞中药物浓度远远低于MCF-7细胞,并且经不同浓度的阿霉素处理后,MCF-7肿瘤干细胞的相对存活率均高于MCF-7细胞,由此推测肿瘤干细胞存在降低毒性药物有效浓度的机制。同时通过蛋白印迹实验发现肿瘤干细胞高表达ABCG2药物转运蛋白,再一次验证悬浮培养的肿瘤干细胞具有耐药性。利用噬菌体展示技术筛选出肺癌干细胞表面特异性结合多肽。通过流式分选从无血清悬浮诱导的细胞球中分选出侧群细胞,即肿瘤干细胞。采用两轮“负筛-正筛”以及第叁轮的侧群细胞亲和筛选的方法进行噬菌体肽库筛选。每一轮筛选都使与A549肿瘤干细胞结合的噬菌体得到进一步富集。从第叁轮的滴定板上随机挑选40个克隆,测序、合并具有相同核酸序列的噬菌体多肽,并通过翻译,得到9个不同氨基酸序列的多肽。合成带FAM荧光标记的多肽对A549肿瘤干细胞进行免疫荧光检测,结果表明,其中两个多肽SP28和SPM具有专一针对A549肿瘤干细胞的特异性亲和能力。(本文来源于《清华大学》期刊2016-06-01)

王乐丹,李文桔,胡越[5](2016)在《利用噬菌体多肽库筛选卵巢癌细胞特异性结合肽》一文中研究指出目的:利用噬菌体7肽库进行体外快速差减筛选(biopanning and rapid analysis of selective interactive ligands,BRASIL),从而获得卵巢癌细胞株HO-8910细胞表面特异性结合肽。方法:以中国仓鼠卵巢细胞株CHO为吸附细胞,卵巢癌细胞株HO-8910为靶细胞,利用噬菌体展示技术联合差减筛选策略,经过连续5轮生物淘洗,随机挑选13个噬菌体单克隆进行DNA测序,利用噬菌体竞争结合实验、ELISA实验、细胞免疫染色、细胞免疫荧光、合成多肽的竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体的亲和性及特异性。结果:筛选出的噬菌体NPMIRRQ与卵巢癌细胞株HO-8910有较高的亲和性及特异性。结论:阳性噬菌体表面展示的多肽NPMIRRQ可能为卵巢癌的早期诊断和转移复发监测提供新思路。(本文来源于《中国性科学》期刊2016年01期)

马世良[6](2015)在《一种叁阴性乳腺癌细胞特异性结合多肽的噬菌体多肽库筛选》一文中研究指出叁阴性乳腺癌(TNBC)为雌激素(ER)、孕激素(PR)和人表皮生长因子2受体(HER2)阴性乳腺癌,占全部乳腺癌患者的10%-15%,由于该类型的乳腺癌缺乏有效的内分泌与抗HER2靶向治疗,临床上表现为预后差、治疗效果不佳。目前主要采用手术、化疗、新辅助化疗及靶向治疗等方法。靶向治疗的限制之一是如何将靶向药物输送到特异的靶向细胞。目前广受关注的RGD叁肽由于其与整合素rvβ3家族特异性的结合特性而成为目前最有希望的靶向药物携带分子之一。然而由于整合素不仅在癌细胞表面表达,正常细胞也表达丰富的整合素分子,这就限制了RGD在靶向治疗中的特异性应用。本项研究采用噬菌体展示技术,以人乳腺癌MCF-7为阴性吸附细胞,以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为阳性靶细胞,从随机噬菌体12肽库中筛选得到了一种与MDAMB-231细胞特异性结合的多肽P1.以荧光素标记的多肽进行的体外特异性结合试验表明该多肽具有与MDA-MB-231细胞特异性结合,而与MCF-7细胞不结合的特点。(本文来源于《2015第八届世界癌症大会会刊》期刊2015-05-15)

徐和敏,王琴,徐璐,范学政[7](2010)在《猪瘟病毒E2基因噬菌体展示多肽库的构建及表位鉴定》一文中研究指出本研究通过建立CSFV噬菌体展示多肽库,并对其进行生物淘选,以期获得E2蛋白上新的抗原表位。选择CSFV石门株(SM)和疫苗株(HCLV)为代表株,采用噬菌体展示技术,以T7select415-1b为载体,分别构建了CSFV SM株和HCLV株E2基因噬菌体展示多肽库(SM-E2库和HCLV-E2库)。通过生物淘选和噬菌体原位杂交技术,采用7株猪瘟单克隆抗体和1株猪瘟高免血清分别对构建的SM-E2库和HCLV-E2库进行抗原表位筛选。结果共筛选到了5条与E2蛋白高度同源的序列,在E2蛋白上的同源区域分别为TAVSPTTLR、YYEP、TTWKEYSH、GGQ(V)VK和PDGLPHY。结果表明,TAVSPTTLR、YYEP和TTWKEYSH序列与目前已知E2蛋白表位一致,说明它们是E2蛋白上的优势表位;GGQ(V)VK和PDGLPHY序列与预测表位一致,推测是E2蛋白上潜在的抗原表位。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2010年01期)

刘庆鑫,崔英春,远航,顾华,苗里宁[8](2009)在《噬菌体多肽对IgG抗体吸附的研究》一文中研究指出目的本研究应用噬菌体多肽展示技术,采用人血清IgG抗体作为目标受体,通过筛选获得IgG抗体高度亲和的重组噬菌体,并将这些重组噬菌体与固相支持物偶联,制备免疫吸附材料,检测其吸附IgG抗体的能力。方法筛选噬菌体多肽库,获得与IgG抗体Fc段高度亲和的重组噬菌体并扩增。与活化的琼脂糖颗粒结合,制成能特异结合人血清IgG的免疫吸附材料。采用体外静态吸附法测定吸附血清中IgG能力。结果当反应在30℃下进行2h左右时载体活化率最高。吸附剂对血清中IgG抗体的吸附量随血清比例的增加而增大。当二者混合比达1∶4时,吸附基本饱和,。吸附剂对IgG的清除率随吸附时间的延长而逐渐增加,2h后基本达吸附平衡,在37℃吸附温度,2h吸附时间下,吸附剂对IgG血清中IgG的吸附效率可达49%。IgA、IgM吸附效率分别为34%、49%。结论所制备的噬菌体免疫吸附材料对血清中IgG的具有很强的吸附能力。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2009年08期)

俞杨[9](2009)在《小鼠胸腺靶向性噬菌体多肽的筛选、鉴定和功能分析》一文中研究指出胸腺是输出成熟T细胞的中枢淋巴器官。尽管人类成年后胸腺功能趋于退化,但是胸腺依然是异常自激活的T细胞的重要来源器官,这导致了胸腺组织异常增殖或显示出恶性化的倾向。尤其重要的是,人类的胸腺瘤可以触发自身抗原特异性的异常自激活的T细胞,从而进一步导致自身免疫性疾病。研究显示小鼠和人的胸腺微环境中的分子表达具有高度的保守性,并且小鼠的胸腺终生保持免疫学功能。所以本研究选择小鼠为研究对象,进行胸腺的相关研究。通过噬菌体展示随机多肽文库的体内筛选,研究人员已经阐述了不同组织器官中血管表面分子表达的异质性,而且还得到了某些组织特异性血管的靶向性多肽配体。研究表明,筛选得到的多肽配体不仅具有器官血管靶向性的作用,还可能触发相应器官生物学功能的变化。研究显示利用噬菌体展示随机多肽文库对免疫器官进行体内筛选,得到的免疫器官血管靶向性多肽有可能触发机体免疫反应的变化,从而有助于靶向性免疫治疗的发展。本研究假设小鼠胸腺血管靶向性的噬菌体多肽能够诱发胸腺相关免疫功能的变化,从而可以利用该多肽作为工具靶向性地调节胸腺相关的免疫功能。本研究选择噬菌体展示的随机多肽文库对小鼠进行了连续叁轮体内筛选。胸腺结合的噬菌体多肽CHAQGSAEC得到了富集。免疫组织化学和同源合成多肽的竞争性结合实验证明噬菌体多肽CHAQGSAEC在小鼠体内可以与胸腺血管特异性结合。通过对外周血T细胞受体切除环水平的检测,本研究证实胸腺血管靶向性噬菌体多肽CHAQGSAEC及其同源合成多肽均可以有效地降低小鼠胸腺的T细胞输出功能。本研究结果证实了实验假设,表明利用噬菌体展示随机多肽文库体内筛选得到的小鼠胸腺血管靶向性多肽能够诱发胸腺相关免疫功能的变化。该多肽靶向性抑制胸腺的T细胞输出功能,可以为研究胸腺功能的异常激活和在该病理状态下调节机体免疫功能奠定基础。本研究也印证了利用噬菌体展示随机多肽文库进行体内筛选鉴定靶向性载体的应用价值,为本课题组后续利用肿瘤动物模型鉴定肿瘤组织靶向性多肽配体的研究奠定了基础。(本文来源于《南京医科大学》期刊2009-03-01)

呼圣娟,郭新宁,赵进,樊代明[10](2008)在《噬菌体多肽peptide 20抗胃癌细胞肝转移作用的实验研究》一文中研究指出目的:探讨噬菌体多肽peptide 20对胃癌肝高转移潜能细胞XGC9811-L肝转移能力的影响。方法:细胞体外生长实验观察噬菌体多肽peptide 20是否可影响胃癌肝高转移潜能细胞XGC9811-L的生长能力;侵袭、运动实验检测peptide 20对XGC9811-L细胞的侵袭和运动能力的影响;体外黏附试验检测peptide 20是否可抑制XGC9811-L对不同细胞外基质的黏附能力。结果:噬菌体多肽peptide 20对细胞的生长无影响,但可减弱XGC9811-L的侵袭、运动、及对collagen Ⅳ的黏附能力。结论:噬菌体多肽peptide 20可抑制胃癌肝高转移潜能细胞的侵袭、运动和对collagen Ⅳ的黏附能力。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2008年11期)

噬菌体多肽库论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)主要是由青霉属和曲霉属代谢的次级产物,对人畜有强致癌性。因此,各国普遍加强了对OTA的监管。免疫传感器作为一种重要的分析手段,在OTA检测中具有举足轻重的地位。本研究采用金纳米粒子(Gold nanoparticles,GNPs)和PEG聚合物(Mal-PEG-NH2)于金电极(Gold electrode,GE)表面合成功能化PEG聚合物刷,使anti-OTA-McAb与聚合物刷共价偶联,并通过特异性结合OTA噬菌体多肽模拟表位,建立了基于免疫学竞争原理的OTA传感器。主要研究内容如下:1基于OTA噬菌体多肽模拟表位建立ELISA分别以OTA噬菌体多肽模拟表位与人工抗原为免疫元件建立了ELISA。测得以人工抗原/anti-OTA-McAb建立的ELISA标准曲线的线性范围为0.20~13.52ng/mL,半抑制浓度(Half inhibition concentration,IC50)为1.66 ng/mL;以OTA噬菌体模拟表位/anti-OTA-McAb建立的Phage-ELISA标准曲线,其线性范围为0.01~0.57 ng/mL,IC50为0.09 ng/mL。2基于OTA噬菌体多肽模拟表位建立传感器2.1 GNPs-传感器采用循环伏安(cyclic voltammetry,CV)一步沉积法在金电极表面修饰GNPs,将3-巯基丙酸(3-mercaptopropionic acid,MPA)共价键与GNPs偶联,接着固定anti-OTA-McAb于电极表面。从而制备了GNPs-免疫传感器,其线性范围0.15~1.84 pg/mL,IC50值为0.53 pg/mL,最低检测限(Limit of detection,LOD)为20.48 fg/mL。2.2 GNPs-Mal-PEG-NH2-免疫传感器以电沉积的方式将GNPs沉积在金电极表面,再通过层层自组装依次将MPA、半胱氨酸(Cysteine,Cys)和Mal-PEG-NH2修饰在电极上作为固定抗体的电极基质,制备了GNPs-Mal-PEG-NH2免疫传感器。该传感器的IC50为81.85 fg/mL,线性范围9.51~703.84 fg/m L,LOD为2.05 fg/mL,与GNPs-免疫传感器相比,灵敏度提高了近10倍。该传感器与AFB1、DON、ZEN和FB1无明显交叉反应。在啤酒和玉米样品中的加标回收率分别为99.33%~107.30%和89.61%~107.40%。3啤酒样品的检测分别采用制备的GNPs-Mal-PEG-NH2-免疫传感器、市售ELISA试剂盒及高效液相色谱对25个啤酒样品中的OTA含量进行检测,未发现有OTA超标的样品,叁者检测结果基本一致。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

噬菌体多肽库论文参考文献

[1].吴凡,庄乃保,梁延连,苏宇清,梁爽.RhD噬菌体多肽的免疫遮蔽效果研究[C].中国输血协会第九届输血大会论文专辑.2018

[2].孟慧.基于赭曲霉毒素A噬菌体多肽模拟表位的免疫传感器的研究[D].南昌大学.2017

[3].卫倩,于丽凤,赵琳,魏敏杰.利用噬菌体多肽库筛选卵巢癌细胞OVCAR3特异性靶向多肽的研究[C].中国药理学会第十叁届全国化疗药理学术研讨会会议论文集.2016

[4].王晓虹.肿瘤干细胞体外诱导培养及特异性噬菌体多肽筛选[D].清华大学.2016

[5].王乐丹,李文桔,胡越.利用噬菌体多肽库筛选卵巢癌细胞特异性结合肽[J].中国性科学.2016

[6].马世良.一种叁阴性乳腺癌细胞特异性结合多肽的噬菌体多肽库筛选[C].2015第八届世界癌症大会会刊.2015

[7].徐和敏,王琴,徐璐,范学政.猪瘟病毒E2基因噬菌体展示多肽库的构建及表位鉴定[J].畜牧兽医学报.2010

[8].刘庆鑫,崔英春,远航,顾华,苗里宁.噬菌体多肽对IgG抗体吸附的研究[J].中国实验诊断学.2009

[9].俞杨.小鼠胸腺靶向性噬菌体多肽的筛选、鉴定和功能分析[D].南京医科大学.2009

[10].呼圣娟,郭新宁,赵进,樊代明.噬菌体多肽peptide20抗胃癌细胞肝转移作用的实验研究[J].现代肿瘤医学.2008

标签:;  ;  ;  

噬菌体多肽库论文-吴凡,庄乃保,梁延连,苏宇清,梁爽
下载Doc文档

猜你喜欢