重组SOD发酵液去除内毒素的效果研究

论文摘要

目的:去除重组毕赤酵母表达人Cu,Zn-SOD蛋白溶液中的内毒素,为后续活体动物试验和临床应用提供基础数据。方法:采用Triton X-114萃取与活性炭吸附两种方法单独使用或联合使用的纯化方案,比较不同纯化方案对去除重组蛋白溶液中内毒素以及目标蛋白回收率的效果。结果:通过单因素条件优化,确定重组蛋白溶液最佳操作pH为5.0,活性炭最适添加量为5%以及Triton X-114最适添加量为1%（体积分数）。最后确定活性炭吸附和Triton X-114萃取法联合使用的三步法操作工艺,可高效去除重组蛋白溶液中内毒素。终产品内毒素含量降至26.8EU/10 000 U SOD,去除率达到99.8%,目标蛋白回收率为66%,Triton X-114残余量为5.7μg/mL。结论:纯化后所得重组SOD蛋白溶液符合中国药典规定的注射用针剂中内毒素限量与Triton残余量的质量要求,可用于潜在的保健食品开发。

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类型: 期刊论文

作者: 陈晓超,王友,崔文明,李伟松,刘树滔,饶平凡

关键词: 重组蛋白,毕赤酵母,超氧化物歧化酶,蛋白溶液,内毒素,活性炭

来源: 中国食品学报 2019年09期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 福州大学生物科学与工程学院,浙江工商大学食品与生物工程学院

基金: 国家重点研发项目(2016YFD04002000),国家自然科学基金面上项目(31271859,31071497),福建省自然科学基金项目(2015J01134)

分类号: TQ920.1

DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.09.020

页码: 172-178

总页数: 7

文件大小: 570K

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