金黄色葡萄球菌蛋白A突变体的表达纯化与亲和色谱填料的制备

金黄色葡萄球菌蛋白A突变体的表达纯化与亲和色谱填料的制备

论文摘要

对本实验室构建表达金黄色葡萄球菌蛋白A突变体的工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a-SP1SPA进行高密度发酵和重组蛋白的表达。发酵液经2步色谱纯化后获得纯度98.48%的蛋白A突变体。对其与环氧预活化琼脂糖的键合反应条件进行优化,确定最佳参数为:反应体系中每克基质加入50 mg蛋白A突变体至终浓度16 mg/ml,在pH 8.5条件下反应18 h。性能测定结果表明抗体结合时间为6 min时,自制填料的动态结合载量为75 mg/ml填料:抗体纯化回收率为85%;使用0.1 mol/L氢氧化钠溶液在位清洗20轮(每轮5次运行)后,填料动态结合载量保持在初始载量的97%以上。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 韩依珂,吴勇,赵伟,张喜全,冯军

关键词: 金黄色葡萄球菌蛋白突变体,键合反应条件,动态结合载量

来源: 中国医药工业杂志 2019年07期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 中国医药工业研究总院,上海多米瑞生物技术有限公司,正大天晴药业股份有限公司

分类号: TQ920.6

DOI: 10.16522/j.cnki.cjph.2019.07.010

页码: 755-761

总页数: 7

文件大小: 757K

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