导读:本文包含了神经细胞粘附分子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:神经细胞,分子,唾液酸,突触,细胞,可塑性,信号。
神经细胞粘附分子论文文献综述
高尧鑫[1]（2018）在《神经细胞粘附分子（NCAM）对成骨细胞分化的作用和机制研究》一文中研究指出背景骨质疏松(Osteoporosis,OP),是一种多重因素所导致的系统性骨代谢性疾病,多数骨质疏松患者表现为骨骼疼痛、易于骨折等特征。骨质疏松患病的主要原因是成骨细胞与破骨细胞作用的平衡被打破,其主要的特征表现为单位体积内骨组织量降低,骨形成不足,成骨分化能力减弱是骨质疏松发病的一个重要因素。神经细胞粘附分子(Neural cell adhesion molecule,NCAM)广泛表达于神经细胞,在神经系统中的功能研究较多。近年来发现NCAM在成骨细胞、间充质干细胞中也有表达,而其生物学意义却不完全清楚。NCAM可能参与调控干细胞分化,已有研究表明,NCAM参与维持骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向脂肪细胞分化,但是NCAM在成骨细胞分化中的作用和机制尚不清楚。本课题的目标旨在阐明NCAM对成骨细胞分化的调控作用和机制。目的1.通过成骨前体细胞(MC3T3-E1)和BMSCs确定NCAM对成骨细胞分化的影响;2.阐明NCAM对成骨细胞分化的作用是通过哪条信号通路来影响的。方法1.在正常的MC3T3-E1细胞中加入特定的成骨细胞诱导液分化0 d,3 d,7d,14 d后,检测钙沉积和NCAM的变化;2.在正常的MC3T3-E1细胞中转染NCAM沉默质粒,利用Western blot和qPCR等技术手段检测成骨细胞标志物RunX2和Osterix以及钙沉积的变化;3.细胞的培养和分化,建立NCAM敲除的BMSCs(KO细胞)进行体外的研究;4.在WT和KO细胞中加入特定的成骨细胞诱导液分化0 d,3 d,7 d,14 d后,利用Western blot和qPCR等技术手段检测成骨细胞标志物RunX2和Osterix以及钙沉积的变化;5.在对照和NCAM沉默的MC3T3-E1细胞中加入Wnt蛋白激酶特异性抑制剂XAV939和激活剂LiCl。Western blot,qPCR和茜素红染色检测RunX2和Osterix的变化和钙沉积的变化。结果1.前期的研究显示,在正常的成骨前体细胞MC3T3-E1的诱导成骨细胞分化的过程中,随着成骨细胞分化天数的增加NCAM的表达量明显上调。为了明确NCAM对成骨细胞分化的影响,我们将NCAM基因在正常的成骨前体细胞MC3T3-E1中进行沉默。结果发现NCAM沉默后成骨细胞标志物RunX2和Osterix都有明显的下调,钙沉积也显着减少,这表明NCAM沉默能明显抑制成骨细胞分化;2.为了验证NCAM对成骨分化的影响,我们利用NCAM敲除的BMSCs(KO细胞)进行体外的研究。在正常的BMSCs(WT细胞)中,同样发现随着成骨细胞分化天数的增加NCAM的表达量明显上调。当NCAM缺失后,成骨细胞的标志物RunX2和Osterix的mRNA和蛋白质表达量都明显下调,并且钙沉积明显减少。这表明,NCAM的缺失能抑制进BMSCs向成骨细胞分化;3.为了探究NCAM缺失抑制成骨细胞分化的分子机制,我们对涉及的信号通路进行了探究。结果显示NCAM缺失后β-catenenin的表达量明显降低;并且将Wnt信号通路进行抑制或激活后,发现成骨细胞的指标RunX2和Osterix具有明显的下调或上调。表明NCAM缺失而导致的抑制成骨细胞分化是通过Wnt信号通路来实现的。结论1.NCAM缺失具有抑制骨细胞分化的作用;2.Wnt通路参与NCAM调控成骨细胞分化。(本文来源于《新乡医学院》期刊2018-03-01）
马建[2]（2018）在《神经细胞粘附分子NCAM促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖与转移的分子机制研究》一文中研究指出背景恶性黑色素瘤是由源于神经嵴的色素细胞恶变而产生的一种皮肤癌,通常见于皮肤,但也可能在鼻腔、眼睛中出现。早期局部的黑色素瘤可通过外科手术切除从而痊愈;一旦黑色素瘤细胞发生转移,其致死率将大大增加,且现有的治疗手段很难取得有效的治疗效果。神经细胞粘附分子(NCAM)首先发现于中枢神经系统,是一类属于免疫球蛋白超家族的细胞粘附分子。有研究显示,NCAM在多种肿瘤进程中均发挥关键作用。但在黑色素瘤细胞中,NCAM是如何调控黑色素瘤细胞转移;以及黑色素瘤细胞中高表达的NCAM140、NCAM180对其转移产生了怎样的影响,目前却并不清楚。目的1.探究NCAM140/180对黑色素瘤B16F0细胞增殖、迁移以及侵袭的影响;2.阐明NCAM140/180促进黑色素瘤B16F0细胞转移的分子机制。方法1.NCAM140/180对小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖能力的影响将NCAM140/180腺病毒侵染黑色素瘤B16F0细胞,48 h后将细胞接种到96孔板,通过MTT法测定过表达NCAM140/180对黑色素瘤B16F0细胞增殖的影响。将NCAM140/180过表达的黑色素瘤B16F0细胞接种到6孔板中,通过平板克隆形成实验测定NCAM140/180对黑色素瘤B16F0细胞克隆形成能力的影响。2.NCAM140/180对小鼠黑色素瘤B16F0细胞迁移和侵袭能力的影响将NCAM140/180腺病毒侵染黑色素瘤B16F0细胞,48 h后更换为无血清培养液饥饿处理12 h,在培养板底部划出痕迹,不同时间点照相记录直至某一组划痕愈合,通过计算划痕面积的变化,得出黑色素瘤B16F0细胞的迁移能力的的变化。将NCAM140/180腺病毒侵染黑色素瘤B16F0细胞,48 h后更换为无血清培养液饥饿处理12 h,使用康宁公司的Transwell小室检测黑色素瘤B16F0细胞的迁移以及侵袭能力的变化,制备的NIH-3T3条件培养基为下室趋化因子培养液。接种24 h后,擦除上室未迁移的细胞,通过结晶紫染色后计算发生迁移的细胞个数,并分析其迁移能力的变化。侵袭小室预先包被基质胶,实验方法与Transwell迁移实验相同。3.NCAM140/180促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制将NCAM140/180腺病毒侵染黑色素瘤B16F0细胞,48 h后提蛋白,通过蛋白质免疫印迹检测相关信号分子FGFR、AKT以及转录因子CREB、c-Jun活化水平的变化,通过PKA酶活检测试剂盒测定PKA活化水平的变化;并通过引入相关信号通路的特异性抑制剂,进一步确认该信号通路在黑色素瘤B16F0细胞增殖、转移过程中的作用。结果1.NCAM140/180促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖通过MTT实验测得的吸光度值,间接反映了活细胞的数目,结果显示,过表达NCAM140/180组的吸光度值均显着高于对照组,过表达NCAM140/180组活细胞数目显着多于对照病毒组,说明NCAM140/180对于小鼠黑色素瘤B16F0细胞的增殖有促进作用;平板克隆实验也显示,NCAM140/180显着促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞的克隆形成。2.NCAM140/180促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞迁移和侵袭划痕实验结果显示,过表达NCAM140/180组划痕愈合均早于对照组;Transwell迁移实验和侵袭实验结果显示,过表达NCAM140/180显着促进了小鼠黑色素瘤B16F0细胞的迁移和侵袭。这显示了NCAM140/180对于小鼠黑色素瘤B16F0细胞的迁移和侵袭均有促进作用。3.NCAM140/180通过FGFR/AKT/PKA信号通路促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖、迁移和侵袭蛋白质免疫印迹结果及抑制剂实验显示,过表达NCAM140/180细胞中FGFR、AKT、PKA蛋白的磷酸化水平均呈现上升趋势,在加入抑制剂后,信号的活化程度则显着降低,并且显着抑制了小鼠黑色素瘤B16F0细胞的增殖以及迁移能力。以上结果显示,NCAM140/180通过激活FGFR/AKT/PKA信号通路促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖、迁移以及侵袭。结论本研究发现,NCAM140/180均能够显着促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞的增殖、迁移以及侵袭,且主要是通过活化FGFR/AKT/PKA信号发挥其生物学功能,这将为黑色素瘤的治疗提供新的靶标。相关分子机制的研究也为抑制黑色素瘤转移药物的开发提供了理论基础。(本文来源于《新乡医学院》期刊2018-03-01）
亢依婷,赵新娟,张静,赵婷婷[3]（2018）在《神经细胞粘附分子对脑学习记忆功能的影响及其运动干预展望》一文中研究指出神经细胞粘附分子(NCAM)与学习记忆能力相关的突触可塑性和神经发生有着重要的影响。运动可加强与学习记忆相关脑区NCAM的m RNA表达,对学习记忆的形成和巩固有着重要的作用。本文对NCAM在运动与学习记忆中的作用进行分析,并探讨运动对NCAM基因表达影响的可能机制。(本文来源于《辽宁体育科技》期刊2018年01期）
连俊江[4]（2017）在《神经细胞粘附分子（NCAM）对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的作用和机制研究》一文中研究指出背景骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种常见的关节变性疾病,以软骨外细胞基质成分被过度降解导致软骨进行性破坏为主要特点。由于软骨细胞属于终末分化细胞,自身的修复能力有限,破坏后很难再生,目前尚缺乏满意的治疗措施。骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)是一种多向分化潜能的成体干细胞,具有向软骨、成骨、脂肪、肌腱、韧带等分化的能力。BMSCs具有来源丰富、取材方便、增殖快、定向分化能力强等优点,逐渐成为软骨组织修复构建的最佳种子细胞来源之一。另外,神经细胞粘附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)在骨髓间充质干细胞中目前已经被发现,并且NCAM可参与调控间充质干细胞分化。NCAM在BMSCs向软骨细胞分化过程中高表达,而其具体的调控作用及其机制却不完全清楚,本课题的目标旨在阐明NCAM对BMSCs向软骨细胞分化的作用和机制。目的1.研究神经细胞粘附分子(NCAM)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成软骨细胞分化是否有作用;2.通过软骨细胞分化前体细胞(ATDC-5)确定NCAM对软骨细胞分化的影响;3.研究NCAM对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨细胞分化的调控作用是通过哪些信号通路来影响的;4.研究NCAM与骨关节炎之间的关系。方法1.细胞的培养和分化,建立NCAM敲除的BMSCs(KO细胞)进行体外的研究。2.在正常(WT)和KO的BMSCs中加入软骨细胞诱导液分化0d、1d、3d、7d、10d、14d后,通过Western blot和qPCR方法分析NCAM敲除缺失后软骨细胞肥大的指标RunX2和ColⅩ的变化,茜素红染色研究钙沉积的变化。3.在ATDC-5细胞中转染NCAM干扰质粒,采用Western blot和茜素红染色的方法检测软骨细胞肥大的指标(RunX2和ColⅩ)以及钙沉积的变化,确定NCAM确实参与了软骨细胞的分化。4.在WT细胞中转染EMEK和在KO细胞中加入ERK激酶的特异性抑制剂U0126,采用Western blot、qPCR和茜素红染色的方法研究(RunX2和ColⅩ)以及钙沉积的变化,确定ERK信号通路参与软骨细胞分化。5.建立单碘醋酸盐(mono-iodoacetate,MIA)诱导的大鼠骨关节炎模型,提取关节软骨的组织蛋白,采用Western blot的方法检测NCAM在骨关节炎中的表达变化情况。6.通过在ATDC5细胞中加入interleukin(IL)-1β,建立细胞炎症模型,采用Western blot的方法检测在体外炎症环境条件下BMSCs向软骨细胞分化过程中NCAM的变化情况。7.在IL-1β诱导的ATDC5细胞中,过表达NCAM,采用Western blot和免疫荧光的方法检测软骨细胞肥大的指标RunX2和ColⅩ的变化情况。结果1.前期的研究显示,在正常的BMSCs中,随着软骨细胞分化天数的增加NCAM的表达量明显上调。因此,我们建立了NCAM敲除的BMSCs进行体外的研究。结果发现,当NCAM缺失后,软骨细胞肥大的指标RunX2和ColⅩ的表达量明显上调,并且茜素红染色颜色明显加深。这些结果说明,NCAM的缺失能促进BMSCs肥大(增生)的软骨细胞分化。2.为了进一步的确认NCAM缺失能促进增生的软骨细胞分化,我们在软骨细胞分化前体细胞ATDC5细胞中将NCAM沉默。结果发现NCAM干扰后能明显的促进肥大的软骨细胞分化。3.为了探究NCAM缺失促进肥大的软骨细胞分化的分子机制,我们对涉及的信号通路进行了探究。结果显示NCAM缺失后p-ERK的表达量明显上调;并且分别将ERK信号通路进行抑制或激活后,发现软骨细胞肥大的指标RUNX2和ColⅩ具有明显的下调或上调。说明NCAM缺失可能是通过ERK信号通路来促进肥大的软骨细胞分化。4.建立单碘醋酸钠诱导的大鼠骨关节炎模型,发现NCAM的表达量明显下调。另外,在ATDC5细胞中加入IL-1β在体外模拟骨关节炎的环境条件,结果发现当加入IL-1β后NCAM的表达量明显下调,而软骨细胞肥大的指标RUNX2的表达量明显上调。这些结果说明,NCAM的表达量在体内外的骨关节炎模型中都是下调的。5.为了进一步说明NCAM过表达后能否缓解骨关节炎的症状,我们在IL-1β诱导的ATDC5细胞中将NCAM进行过表达。结果发现,当NCAM过表达后,软骨细胞肥大的指标RunX2和ColⅩ明显下调。这些结果说明NCAM在骨关节炎中起着重要的作用。结论1.NCAM缺失具有促进肥大性软骨细胞分化的作用。2.ERK通路参与NCAM调控肥大性的软骨细胞分化。3.NCAM调控炎症诱导的肥大软骨细胞分化,提示NCAM在骨关节炎中起重要作用。(本文来源于《新乡医学院》期刊2017-03-01）
王欣[5]（2015）在《上皮间质转化中多聚唾液酸(PSA)修饰对神经细胞粘附分子(NCAM)功能的影响》一文中研究指出唾液酸(Sialic acids,Sias)是一类九碳糖,通常连接在糖蛋白和糖鞘脂的糖链末端。在多种肿瘤细胞表面Sia表达异常,因此可作为潜在的肿瘤标志物。唾液酸可通过α-2,8键连接成多聚唾液酸(Polysialic acid,PSA),由于其携带负电荷,PSA在细胞-细胞相互作用,细胞表面糖蛋白的构象,以及屏蔽受体分子的抗原决定簇等方面具有重要功能。由ST8Sia II(STX)和ST8Sia IV(PST)两种多聚唾液酸转移酶催化将Sia添加在神经粘附分子(Neural cell adhesion molecule,NCAM)上的N-糖链末端,形成PSA-NCAM。PSA-NCAM在哺乳动物成体内表达量低,在肺癌,胰腺癌,成神经细胞瘤,胶质瘤多种肿瘤中有“再表达”现象,影响细胞的粘附、迁移和侵袭能力。在乳腺癌细胞中,NCAM随着恶性程度的增高而表达增加,同时伴随PSA表达异常,但是NCAM和PSA的表达以及它们在乳腺癌中的生物学功能尚不清楚。因此,对恶性肿瘤中PSA及PSA-NCAM的研究将有助于深入了解其在癌症发生及转移中的作用,为癌症的治疗提供一定的理论基础。本课题组以人和小鼠乳腺细胞为研究对象,通过建立上皮间质转化(Epithelial–mesenchymal transition,EMT)模型,分析其中NCAM唾液酸化的表达变化,以及PSA对NCAM的修饰作用对乳腺细胞生物学行为的影响,以期理解PSA以及PSA-NCAM在肿瘤发展过程中的作用。主要研究结果如下:(1)人乳腺癌临床样本中NCAM及PSA-NCAM表达水平的研究。在乳腺癌组织(n=24)中,Sias及多聚唾液酸转移酶PST的表达增高,并与临床TNM分级呈正相关。利用乳腺癌组织芯片(n=60)分析发现,分级较高的组织中NCAM表达高而PSA-NCAM的表达相对较低。NCAM的乳腺癌组织芯片得分阳性率为93%(TNM I,87.5%;TNM II,92%;TNM III,100%),与TNM分级呈正相关。而PSA-NCAM高表达主要集中在TNM I期(75%),表明乳腺癌初期即表现出PSA对NCAM的异常修饰。高表达的NCAM与乳腺癌生存期没有直接相关性,提示NCAM以及PSA-NCAM可能在乳腺癌生成与发展中发挥不同作用。(2)EMT细胞模型中NCAM及PSA-NCAM表达水平的研究。本实验使用TGF-β1诱导人和小鼠正常乳腺上皮细胞发生EMT,发现伴随EMT标志蛋白的表达变化,NCAM及PSA-NCAM表达都异常增高。(3)PSA对NCAM的修饰作用对乳腺细胞行为影响的研究。NCAM-140过表达诱导NMu MG细胞发生一个基于“cadherin转换”的EMT过程,提高细胞的增殖和迁移,但不影响细胞的运动能力;而PSA过表达提高细胞运动能力,降低细胞与细胞外基质的粘附能力;另一方面,PSA对NCAM的修饰作用提高NCAM介导的细胞增殖和迁移,降低NCAM介导的细胞粘附,说明PSA的过表达提高了细胞的转移潜能。(4)NCAM及PSA介导的不同信号通路的研究。PSA激活EGFR/STAT3信号通路;而NCAM则激活β-catenin/slug信号通路。NCAM通过减弱CK1α的表达激活细胞中的β-catenin/slug信号,上调axin 2、slug、c-myc和ccnd1基因的表达,促进细胞增殖和迁移能力提高。而PSA通过上调GSK 3β的表达激活EGFR/STAT3信号通路,促进细胞运动能力提高。说明NCAM和PSA介导了不同的信号通路,调节乳腺癌发展中的细胞行为。综上所述,本文发现乳腺癌中NCAM表达升高,多聚唾液酸化修饰增强,NCAM-140过表达可以诱导EMT的发生,而PSA对NCAM的修饰作用提高NCAM介导的细胞增殖和迁移,降低NCAM介导的细胞粘附,并通过诱导与NCAM不同的下游信号通路促进乳腺细胞转移潜能。(本文来源于《江南大学》期刊2015-12-01）
高月,黄睿,储成艳,马郁芳,李深[6]（2015）在《小鼠神经细胞粘附分子胞内段原核表达载体构建及表达》一文中研究指出[目的]构建小鼠神经细胞粘附分子胞内段(NCAM ICD)原核表达载体,诱导蛋白表达,并进一步对蛋白进行纯化和鉴定。[方法]以小鼠脑c DNA文库为模板,采用PCR技术分别扩增NCAM跨膜亚型NCAM140及NCAM180的胞内片段,连接p JET1.2克隆载体。经DNA测序正确后,构建pET29b-NCAM140 ICD及pET29b-NCAM180 ICD原核表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导目的蛋白的表达,经Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱纯化,以Western blot和质谱的方法鉴定表达的蛋白。[结果]成功构建了pET29b-NCAM140 ICD及pET29b-NCAM180 ICD原核表达质粒,并用Western blot及质谱法证实NCAM140 ICD及NCAM180 ICD蛋白的表达,分子量分别约为25 kDa及80 k Da。[结论]该方法成功构建小鼠pET29b-NCAM140 ICD及pET29b-NCAM180 ICD原核表达载体,实现了其蛋白表达,为进一步研究NCAM ICD的功能奠定了基础。(本文来源于《生物技术》期刊2015年05期）
曾英男[7]（2015）在《神经细胞粘附分子对肿瘤细胞形态、生长和运动的影响》一文中研究指出神经细胞粘附分子(Neural cell adhesion molecule,NCAM)是一种定位在细胞膜上的糖蛋白,属于免疫球蛋白超基因家族,它不仅能介导细胞与细胞之间和细胞与细胞外基质间的粘附作用,还影响神经细胞增殖、迁移以及神经突触可塑性等。多聚唾液酸(Polysialic acid,PSA)是唾液酸单体通过α-2,8键连接的长链线性聚合物,PSA主要粘附在NCAM,多聚唾液酸转移酶II(STX)和多聚唾液酸转移酶IV(PST)通过在NCAM免疫球蛋白域的第五个和第六个N-糖基化位点催化合成PSA。在非小细胞癌、神经母细胞瘤和肾母细胞瘤等恶性肿瘤均发现PSA的过量表达。PSA-NCAM在细胞的识别以及肿瘤的侵润、生长起着一定的作用。上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程与肿瘤的转移密切相关。EMT不仅存在于许多细胞生物的胚胎发育过程中,还在原发肿瘤细胞的转移和侵袭过程中扮演着重要角色,而转化生长因子(Transforming growth factor,TGF-β)可以促进诱导正常细胞发生EMT过程。本研究以正常乳腺上皮细胞和恶性乳腺肿瘤细胞为研究对象,通过建立EMT模型,研究NCAM对细胞形态、运动、增殖等细胞行为,以及NCAM和PSA-NCAM介导EGFR、STAT3信号通路的影响,阐述NCAM和PSA-NCAM在乳腺癌发生发展中的作用。首先,对比研究NCAM在正常乳腺细胞和恶性乳腺肿瘤细胞中的表达情况,发现人源恶性肿瘤细胞NCAM表达水平明显高于正常乳腺细胞。当用TGF-β诱导正常乳腺细胞MCF10A发生EMT后,NCAM表达水平上调。通过在正常乳腺上皮细胞MCF10A稳定转染鼠源NCAM-140,MCF10A细胞过表达NCAM-140后发现E-cadherin表达水平下调,N-cadherin表达水平上调,细胞运动能力明显增强,细胞增殖能力不变,激活EGFR、STAT3信号通路,这些变化在乳腺肿瘤细胞MCF7瞬时转染过表达NCAM-140得到验证,因此说明NCAM促进细胞发生EMT过程。利用高效液相色谱检测发现恶性乳腺肿瘤细胞的游离唾液酸含量比正常乳腺细胞高。通过在MCF7细胞瞬时转染NCAM-140和唾液酸转移酶PST、STX,发现分别过表达NCAM和PSA-NCAM均能激活EGFR、STAT3信号通路。将构建NCAM-140的第五个和第六个N-糖基化位点突变质粒瞬时转染到MCF10A细胞,发现去除多聚唾液酸化的NCAM仍能激活EGFR、STAT3信号通路。本论文说明了NCAM是非依赖于PSA,通过激活EGFR、STAT3信号通路,促进细胞发生EMT过程,揭示NCAM在乳腺肿瘤发生发展中起到的重要作用。(本文来源于《江南大学》期刊2015-06-01）
瞿莉[8]（2015）在《七氟醚对幼鼠海马区生长相关蛋白-43和神经细胞粘附分子表达的影响》一文中研究指出目的：探讨七氟醚麻醉对幼鼠认知功能及海马区生长相关蛋白(GAP-43)、神经细胞粘附分子(NCAM)表达的影响。方法：实验用7日龄SD大鼠45只,雌雄不拘,体重15-20g,采用随机数字表法分为5组(11=9)：L1组和L2组分别吸入1.5%七氟醚2h和6h；Hl组和H2组分别吸入3%七氟醚2h和6h；C组吸入30%氧气。待大鼠生长至出生后14d时开始Morris水迷宫训练7天,测定其定位航行和空间探索能力。水迷宫测试结束后断头取大鼠海马组织,采用Western blot法检测大鼠海马神经元GAP-43和NCAM蛋白表达。结果：1.与C组比较,L2、H1、H2组大鼠平均逃避潜伏期延长,平台象限停留时间缩短,叁组大鼠海马区GAP-43表达水平均下降,L2组和H2组穿越平台次数减少(P<0.05),L1组各项指标与C比较差异无统计学意义(P>0.05)；2.五组大鼠海马区NCAM表达结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论：1.5%七氟醚2h麻醉对7d大鼠发育期认知功能无明显影响,但1.5%七氟醚6h麻醉及3%七氟醚麻醉对大鼠认知功能有影响,可能与海马区GAP-43表达水平降低有关,七氟醚麻醉对新生大鼠海马NCAM表达无影响。(本文来源于《新疆医科大学》期刊2015-03-01）
李博[9]（2015）在《人神经细胞粘附分子及其配体1在肠道病毒71型感染所致手足口病中的表达》一文中研究指出目的:探讨EV71感染手足口病患儿血清中的神经细胞粘附分子(CD56+)及其配体1(CD171)的表达情况,从而推测EV71感染手足口病患儿在固有免疫阶段NK细胞在机体,特别是在中枢神经系统的表达情况,进一步对NK细胞在EV71感染手足口病患儿的固有免疫阶段免疫应答情况及在EV71免疫逃逸过程中,特别是对EV71感染中枢神经系统过程中,是否发挥作用及其原因做出推论,从分子免疫学角度为EV71感染人体后早期病理生理过程,特别是中枢神经系统病理生理变化提供客观事实依据,从病理生理学的角度解释EV71感染手足口病患儿中枢神经系统症状的出现原因,为预测EV71感染手足口病患儿疾病严重程度,特别是中枢神经系统感染严重程度及预后评估开拓新的思路,为未来应用生物制剂进行特效治疗EV71感染提供了新的思路及理论基础。方法:参考患儿年龄段、发病时间、是否进行院前处理、出生史、喂养史、生长发育史、既往病史、预防接种史、家族史、近期传染病接触史、居住地情况、居住环境情况、饮食习惯、作息时间、家庭经济情况、看护家属受教育程度等条件选择EV71感染手足口病患儿共60例。入选患儿均为1-3岁,发病时间1-3日,未进行院前处理,整体男女性别比例1:1,无特殊个人史、既往史及家庭情况。依照《肠道病毒71型(EV71)感染重症病例临床救治专家共识(2011年版)》将60例EV71感染的手足口病患儿分为重型病例、普通病例组,另选同一采样时期,相同年龄段,相似个人情况、家族情况及家庭环境的正常健康儿童30例为对照组,所有儿童均空腹4-6小时采集静脉血样本,采集血样手法相同,应用的采集管及采血针均为同一厂家同一批次,采集过程中患儿无剧烈哭闹,均为一次采集成功,所有EV71感染手足口病患儿均在治疗前采集血样,所有采集血样均为正常静脉血样标本,样本离心后无溶血情况,离心后30分钟内采集血清0.5毫升,严格按照CD56+、CD171试剂盒使用说明书,将血清样本进行零下20℃冷藏,无反复冻融操作,检测前血清复温至室温,采用ELISA双抗体夹心法测定技术检测各组静脉血清CD56+、CD171水平,依照CD56+、CD171试剂盒附带的标准品检测结果绘制检测曲线,依据标准曲线计算各检测样品检测物浓度。采用spss13.0软件进行统计分析,计量资料以x?s表示,组间比较用秩和检验和单因素方差分析。结果:重型病例患儿CD56+(24.67±2.41ng/L)及普通病例患儿CD56+(36.53±0.92ng/L)较健康患儿CD56+(40.10±1.31ng/L)水平降低,各组之间两两进行比较,均有统计学意义。重型病例患儿CD171(16.53±1.70ng/L)及普通病例患儿CD171(24.05±0.69ng/L)较健康患儿CD171(27.25±0.71ng/L)水平降低,各组之间两两进行比较,均有统计学意义。结论:EV71感染手足口病患儿存在NK细胞异常情况,EV71感染手足口病患儿NK细胞较正常健康儿童数量减少,活性降低,且与患儿疾病严重程度呈正相关,中枢神经系统NK细胞较正常健康儿童数量减少,活性降低,并且与患儿出现相应中枢神经系统症状呈正相关,初步提示NK细胞在EV71感染手足口病患儿的固有免疫阶段呈数量减少,活性降低,影响NK细胞的免疫应答(包括抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用、天然细胞毒性及产生细胞因子能力),从而降低机体对EV71感染免疫防御能力。NK细胞数量及活性下降,在EV71感染机体后免疫逃逸过程中发挥一定辅助作用,特别是对中枢神经系统感染产生影响。从分子免疫学角度提示NK细胞活性降低,合成、产生细胞因子能力下降,为EV71早期感染人体后各种细胞因子水平变化提供了NK细胞相关的论据,特别是为中枢神经系统病理生理变化提供了分子免疫学水平的理论支持,以细胞因子作为出发点,从病理生理学的角度揭示了EV71感染手足口病患儿中枢神经系统症状出现的原因,为预测EV71感染手足口病患儿的全身免疫应答情况,预测手足口病的严重程度,特别是中枢神经系统感染的严重程度及疾病预后评估提供了小数据样本研究的实例,为大数据样本进一步深入研究开拓了思路,提供了相关联的理论支持,为将来应用生物制剂以更大范围募集和活化NK细胞,从而增强固有免疫,有效早期及时治疗EV71感染手足口病提供了新的思路及理论基础,为彻底解决EV71感染手足口病不同程度流行过程中涉及的临床甄别疾病轻重程度及临床治疗的问题提供了更为广泛的思路。(本文来源于《河北医科大学》期刊2015-03-01）
何发[10]（2014）在《多聚唾液酸化的神经细胞粘附分子对1d1D细胞生长及迁移的影响》一文中研究指出神经细胞粘附分子（Neural cell adhesion molecule，NCAM）是一类表达于神经元、胶质细胞、骨骼细胞以及自然杀伤细胞表面的糖蛋白，它属于免疫球蛋白超家族。NCAM在细胞粘附、神经细胞迁移及信号传递等过程中起着重要作用。该蛋白存在6个N-糖基化位点，连接的糖类主要是多聚唾液酸（Polysialic acid，PSA），故NCAM也是用来研究多聚唾液酸的模式蛋白。NCAM上的多聚唾液酸主要由多聚唾液酸转移酶STX（ST8Sia II）和PST（ST8Sia IV）催化，这两种酶属于唾液酸转移酶家族，位于高尔基体膜内腔，两者在结构和功能上都有很高的相似性。中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary，CHO）细胞的突变株ldlD-14因为存在UDP-半乳糖/UDP-N-乙酰半乳糖胺4-差向异构酶的缺陷，不能合成完整的糖链；但是添加外源半乳糖（Gal）及N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）后，糖链又能恢复完整。正是由于这一缺陷，使得该细胞成为研究糖链生物学功能非常理想的细胞模型。本课题将来源于小鼠乳腺上皮（Normal murine mammary gland epithelial，NMuMG）细胞的NCAM-140、STX及PST的基因分别克隆并连接于真核表达载体pcDNA3.1（+）、pIREShyg3和pIRESpuro3，然后转染至ldlD-14细胞中。转染的细胞通过在无血清的基本培养基中添加半乳糖与否可以轻易操纵其NCAM分子上的糖链修饰，以此进一步研究了糖基化对NCAM分子功能的影响。本实验先将NCAM-140基因转染至ldlD-14细胞中，通过抗生素G418筛选及蛋白质印迹法（Western blotting）检测，得到过表达NCAM的永久转染细胞株ldlD-14/N-140。然后用MTT法和胶体金法分别对该转染子的细胞增殖和细胞迁移进行分析，结果表明过表达NCAM-140的细胞其增殖能力和迁移能力与对照组细胞相比明显增强。显微镜下观察显示细胞形态也发生变化。接着再分别将STX和PST基因转染到ldlD-14/N-140细胞中，经抗生素筛选、实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR）和Westernblotting检测后分别得到稳定转染细胞株ldlD-14/NS和ldlD-14/NP。将细胞在含有胰岛素-转铁蛋白-硒（Insulin-transferrin-selenium，ITS）的无血清培养基以及含有ITS和半乳糖的无血清培养基中培养。检测细胞的增殖能力显示，与ldlD-14/N-140细胞相比，ldlD-14/NS细胞的增殖较慢，ldlD-14/NP细胞增殖较快；细胞的迁移性检测结果显示ldlD-14/NS细胞和ldlD-14/NP细胞的迁移能力都比ldlD-14/N-140细胞的更强。(本文来源于《江南大学》期刊2014-06-01）
神经细胞粘附分子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景恶性黑色素瘤是由源于神经嵴的色素细胞恶变而产生的一种皮肤癌,通常见于皮肤,但也可能在鼻腔、眼睛中出现。早期局部的黑色素瘤可通过外科手术切除从而痊愈;一旦黑色素瘤细胞发生转移,其致死率将大大增加,且现有的治疗手段很难取得有效的治疗效果。神经细胞粘附分子(NCAM)首先发现于中枢神经系统,是一类属于免疫球蛋白超家族的细胞粘附分子。有研究显示,NCAM在多种肿瘤进程中均发挥关键作用。但在黑色素瘤细胞中,NCAM是如何调控黑色素瘤细胞转移;以及黑色素瘤细胞中高表达的NCAM140、NCAM180对其转移产生了怎样的影响,目前却并不清楚。目的1.探究NCAM140/180对黑色素瘤B16F0细胞增殖、迁移以及侵袭的影响;2.阐明NCAM140/180促进黑色素瘤B16F0细胞转移的分子机制。方法1.NCAM140/180对小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖能力的影响将NCAM140/180腺病毒侵染黑色素瘤B16F0细胞,48 h后将细胞接种到96孔板,通过MTT法测定过表达NCAM140/180对黑色素瘤B16F0细胞增殖的影响。将NCAM140/180过表达的黑色素瘤B16F0细胞接种到6孔板中,通过平板克隆形成实验测定NCAM140/180对黑色素瘤B16F0细胞克隆形成能力的影响。2.NCAM140/180对小鼠黑色素瘤B16F0细胞迁移和侵袭能力的影响将NCAM140/180腺病毒侵染黑色素瘤B16F0细胞,48 h后更换为无血清培养液饥饿处理12 h,在培养板底部划出痕迹,不同时间点照相记录直至某一组划痕愈合,通过计算划痕面积的变化,得出黑色素瘤B16F0细胞的迁移能力的的变化。将NCAM140/180腺病毒侵染黑色素瘤B16F0细胞,48 h后更换为无血清培养液饥饿处理12 h,使用康宁公司的Transwell小室检测黑色素瘤B16F0细胞的迁移以及侵袭能力的变化,制备的NIH-3T3条件培养基为下室趋化因子培养液。接种24 h后,擦除上室未迁移的细胞,通过结晶紫染色后计算发生迁移的细胞个数,并分析其迁移能力的变化。侵袭小室预先包被基质胶,实验方法与Transwell迁移实验相同。3.NCAM140/180促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制将NCAM140/180腺病毒侵染黑色素瘤B16F0细胞,48 h后提蛋白,通过蛋白质免疫印迹检测相关信号分子FGFR、AKT以及转录因子CREB、c-Jun活化水平的变化,通过PKA酶活检测试剂盒测定PKA活化水平的变化;并通过引入相关信号通路的特异性抑制剂,进一步确认该信号通路在黑色素瘤B16F0细胞增殖、转移过程中的作用。结果1.NCAM140/180促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖通过MTT实验测得的吸光度值,间接反映了活细胞的数目,结果显示,过表达NCAM140/180组的吸光度值均显着高于对照组,过表达NCAM140/180组活细胞数目显着多于对照病毒组,说明NCAM140/180对于小鼠黑色素瘤B16F0细胞的增殖有促进作用;平板克隆实验也显示,NCAM140/180显着促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞的克隆形成。2.NCAM140/180促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞迁移和侵袭划痕实验结果显示,过表达NCAM140/180组划痕愈合均早于对照组;Transwell迁移实验和侵袭实验结果显示,过表达NCAM140/180显着促进了小鼠黑色素瘤B16F0细胞的迁移和侵袭。这显示了NCAM140/180对于小鼠黑色素瘤B16F0细胞的迁移和侵袭均有促进作用。3.NCAM140/180通过FGFR/AKT/PKA信号通路促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖、迁移和侵袭蛋白质免疫印迹结果及抑制剂实验显示,过表达NCAM140/180细胞中FGFR、AKT、PKA蛋白的磷酸化水平均呈现上升趋势,在加入抑制剂后,信号的活化程度则显着降低,并且显着抑制了小鼠黑色素瘤B16F0细胞的增殖以及迁移能力。以上结果显示,NCAM140/180通过激活FGFR/AKT/PKA信号通路促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖、迁移以及侵袭。结论本研究发现,NCAM140/180均能够显着促进小鼠黑色素瘤B16F0细胞的增殖、迁移以及侵袭,且主要是通过活化FGFR/AKT/PKA信号发挥其生物学功能,这将为黑色素瘤的治疗提供新的靶标。相关分子机制的研究也为抑制黑色素瘤转移药物的开发提供了理论基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
神经细胞粘附分子论文参考文献
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[4].连俊江.神经细胞粘附分子（NCAM）对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的作用和机制研究[D].新乡医学院.2017
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