耐热毛栓孔菌S0301同核体菌株的快速鉴定及产漆酶能力比较

耐热毛栓孔菌S0301同核体菌株的快速鉴定及产漆酶能力比较

论文摘要

栓孔菌属(Trametes)真菌菌株漆酶同工酶种类多,产漆酶优势独特,是重要的工业漆酶来源之一.为建立方便快捷的获得同核体菌株的方法,以高产漆酶耐热毛栓孔菌Trametes trogii S0301为研究对象,在利用原生质体再生技术得到再生单菌、通过PCR克隆获得该菌株交配型基因b1、b2位点序列的基础上,设计b1、b2交配型基因特异引物并对各再生菌落中不同交配型基因类型进行识别,结合经典的锁状联合显微镜观察,共从45个性状稳定的再生菌株中获得了19个b1b2型异核体菌株,26个b1型同核体菌株,同核体菌株检出率为57.8%,且PCR鉴定结果和锁状联合观察结果一致.此外,还发现b1型同核体菌株菌丝细、菌落稀疏,有更快的蔓延速度,在不添加漆酶诱导剂Cu2+的固体培养基中表现出更强的产漆酶能力.本研究表明PCR克隆交配型基因的方法适用于同核体菌株的快速鉴定,同时b1型同核体菌株具有产漆酶的优势.

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 供试菌株及培养基
  •   1.2 交配型基因的克隆及基因分析
  •   1.3 原生质体的制备及再生
  •   1.4 菌丝培养及再生单菌菌株锁状联合观察
  •   1.5 再生同核和异核菌株的分子验证
  •   1.6 再生单菌菌丝生长和产漆酶能力比较
  • 2 结果与分析
  •   2.1 再生菌株的显微观察
  •   2.2 交配型基因的克隆及基因分析
  •   2.3 菌株交配型的分子鉴定分析
  •   2.4 同核体和异核体菌株菌落形态及产漆酶能力比较
  • 3 讨论与结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 高升,张宇,伍圆圆,杨恩,徐慧妮,伊日布斯,陈玉惠,严金平

    关键词: 毛栓孔菌,漆酶,原生质体制备,交配型基因,同核体菌株,异核体菌株

    来源: 应用与环境生物学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学

    单位: 昆明理工大学生命科学与技术学院生物转化实验室,西南林业大学生命科学学院

    基金: 国家自然科学基金项目(31560036)资助~~

    分类号: Q936

    DOI: 10.19675/j.cnki.1006-687x.2018.01017

    页码: 151-155

    总页数: 5

    文件大小: 1513K

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