紫花苜蓿MsLEA4启动子的克隆及表达分析

紫花苜蓿MsLEA4启动子的克隆及表达分析

论文摘要

为了深入研究紫花苜蓿(Medicago sativa)MsLEA4基因的功能,本试验采用染色体步移技术从紫花苜蓿基因组中扩增出MsLEA4启动子序列,构建GUS植物超表达载体,并根据序列分析结果对紫花苜蓿进行相应逆境胁迫。结果表明:紫花苜蓿MsLEA4启动子含有响应脱落酸(abscisic acid,ABA)调控的顺式作用元件ABRE,响应赤霉素(gibberellin,GA)调控的顺式作用元件P-box,参与胚乳合成的顺式作用元件GCN4和Skn-1,以及涉及光调控和光周期的顺式作用元件;外源ABA、GA、持续光照以及黑暗均能诱导MsLEA4基因的表达;GUS基因只在拟南芥花和荚果中表达。因此,MsLEA4基因能参与紫花苜蓿的逆境调控,与该基因启动子序列中所含的一系列顺式作用元件相关。本研究为进一步探索MsLEA4基因在紫花苜蓿逆境胁迫、光调控以及组织特异性表达中的作用奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 DNA和RNA提取
  •     1.2.2 胁迫处理
  •     1.2.3 实时定量PCR检测MSLEA4基因在各胁迫下的表达模式
  •     1.2.4 MsLEA4启动子克隆
  •     1.2.5 MsLEA4启动子序列分析
  •     1.2.6 MSLEA4启动子瞬时表达载体的构建及遗传转化
  •     1.2.7 转基因植株GUA染色
  • 2 结果与分析
  •   2.1 MsLEA4启动子克隆
  •   2.2 MsLEA4启动子序列分析
  •   2.3 不同逆境胁迫下MsLEA4基因的表达量
  •   2.4 MsLEA4启动子Promoter::GUS超表达载体的构建及遗传转化
  •   2.5 MsLEA4组织特异性表达
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 贾会丽,石永红,王学敏,王运琦,吴欣明,刘建宁,方志红,张燕,董宽虎

    关键词: 紫花苜蓿,启动子,逆境胁迫,顺式作用元件

    来源: 草地学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,农作物

    单位: 山西农业大学动物科技学院,山西省农业科学院畜牧兽医研究所,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

    基金: 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-34),山西省重点研发计划重点项目(201703D211002-9-2),山西省农业科学院雁门关农牧交错带专项(YCX2017D2107,YCX2018102)资助

    分类号: S541.9;Q943.2

    页码: 789-796

    总页数: 8

    文件大小: 385K

    下载量: 139

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