乙肝病毒核心蛋白病毒样颗粒表面抗原密度对抗体应答水平的影响

乙肝病毒核心蛋白病毒样颗粒表面抗原密度对抗体应答水平的影响

论文摘要

【目的】为了探究乙肝病毒核心蛋白(HepatitisBviruscoreprotein,HBc)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)表面抗原密度对免疫后抗体应答水平的影响,制备了不同抗原密度的HBc VLPs疫苗,并检测了其在小鼠体内的抗体应答水平。【方法】首先制备了N端带有3个甘氨酸的人巨细胞病毒重组抗原域AD-4作为模式抗原,接着通过Sortase A的介导将AD-4连接到HBc VLPs表面上。将系列浓度梯度AD-4抗原在SortaseA介导下分别与相同浓度的HBcVLPs发生反应,制备不同抗原密度的HBc-AD-4 VLPs。将其分别免疫6–8周龄BALB/c小鼠3次,每次免疫间隔2 w,间接ELISA法检测被免疫小鼠血清的抗体应答水平。【结果】结果表明,当HBc VLPs表面抗原密度为44.4%时,即HBc反应浓度∶AD-4反应浓度为1:0.5时,不足以引起高滴度的抗体产生;当HBc VLPs表面抗原密度为64.2%时,即HBc反应浓度∶AD-4反应浓度为1:1时,HBc-AD-4 VLPs诱导的AD-4特异性抗体滴度与100%抗原密度的HBc-AD-4VLPs所引起的抗体滴度相当;当HBcVLPs表面抗原密度大于64.2%时,引起的抗体应答水平不因抗原密度增加而进一步增强。【结论】发现了HBcVLPs表面抗原密度与免疫后抗体滴度呈正相关,然而免疫64.2%抗原密度的HBc VLPs所产生的抗体滴度可达峰值,抗原密度进一步增加,抗体应答水平不会进一步加强。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 主要试剂:
  •     1.1.2 实验动物:
  •   1.2 蛋白表达与纯化
  •   1.3 蛋白转肽反应体系的配制
  •   1.4 动物分组与免疫
  •   1.5 间接ELISA法检测免疫后小鼠抗血清效价
  •   1.6 统计分析
  • 2 结果和分析
  •   2.1 蛋白表达与纯化
  •   2.2 不同抗原密度的病毒样颗粒的确定
  •   2.3 不同抗原密度的病毒样颗粒的制备
  •   2.4 免疫小鼠的抗体应答
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李琪,汤书兵,周树敏,钱志康

    关键词: 病毒样颗粒,抗原密度,体液免疫,乙肝病毒核心蛋白

    来源: 微生物学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 上海大学生命科学学院,中国科学院上海巴斯德研究所中国科学院分子病毒与免疫重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(81572002),国家重点研发计划项目(2016YFA0502101)~~

    分类号: R392

    DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20180140

    页码: 303-313

    总页数: 11

    文件大小: 1397K

    下载量: 251

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