间接非竞争型论文_郎倩萍,李少南,郑佳豪,张文萍

导读:本文包含了间接非竞争型论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:竞争,胆碱,免疫,蛋白,乙酰胆碱,金属,氨基。

间接非竞争型论文文献综述

郎倩萍,李少南,郑佳豪,张文萍[1](2016)在《大型溞ChE和NAGase间接竞争和非竞争ELISA方法的比较》一文中研究指出[目的]探索间接非竞争ELISA和间接竞争ELISA法测定大型溞ChE和NAGase的试验条件及方法灵敏度。[方法]分别采用间接竞争和间接非竞争ELISA方法测定大型溞ChE和NAGase。[结果]对于ChE,间接非竞争ELISA的最适抗原浓度和抗体稀释倍数分别为1.466μg/m L和1∶10 000,灵敏度为7.426 7 ng/m L;间接竞争ELISA的最适抗原浓度和抗体稀释倍数分别为5.277μg/m L和1∶8 000,灵敏度为0.163 4 ng/m L。对于NAGase,间接非竞争ELISA的最适抗原浓度和抗体稀释倍数分别为8.961μg/m L和1∶6 000,灵敏度为4.199 9 ng/m L;间接竞争ELISA的最适抗原浓度和抗体稀释倍数分别为6.450μg/m L和1∶4 000,灵敏度为0.250 8 ng/m L。[结论]无论是ChE还是NAGase,间接竞争ELISA在最适抗体浓度下的检测灵敏度均高于间接非竞争ELISA,加之其操作简便,间接竞争ELISA在生物和环境样品ChE和NAGase含量检测中值得推广应用。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2016年24期)

刘洪翠,杨艳霞,李少南[2](2012)在《大型溞胆碱酯酶间接非竞争酶联免疫吸附定量分析法的建立》一文中研究指出用达到电泳纯的大型溞(Daphnia magna)胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)免疫BALB/c小鼠,得到效价达1∶8 000的鼠抗大型溞ChE多克隆抗血清;通过优化抗原抗体反应条件,建立定量分析大型溞ChE含量的间接非竞争酶联免疫吸附法(indirect and non-competitive enzyme-linked immunosorbentassay)。结果表明:此方法检测灵敏度为24ng.mL-1;经免疫交叉反应鉴定,所获抗血清与5、10μg.mL-1标准蛋白质和其他生物如花翅摇蚊、尖额溞、斑马鱼(脑、脑除外的整体)、家蚕、意大利蜜蜂、赤子爱胜蚯蚓、非洲爪蟾(蝌蚪)等来源的ChE交叉反应率分别为:<0.25%、<0.25%、2.13%、10.19%、3.88%、3.56%、2.81%、3.93%、5.00%和2.75%,具较高的特异性。说明用本试验得到的抗血清建立的间接非竞争酶联免疫吸附法可用于大型溞体内ChE含量的测定,以利于在农药暴露环境下大型溞体内ChE活性的精确检测。(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2012年03期)

吴力专[3](2004)在《Zn-金属硫蛋白间接竞争型ELISA的建立与应用》一文中研究指出ELISA以其快速、准确、安全、简便的特点而成为定量测定生物体内微量有机物的理想方法。本实验的目的就是为了建立一套快速、有效、方便并能定量测定猪体组织中MT含量的ELISA法,为动物科学中的研究和应用提供MT的定量测定技术。 1.猪MT抗小鼠抗血清的制备:用戊二醛法将纯品Zn-MT与载体蛋白(BSA)偶联后,作为人工抗原,对昆明小鼠皮下注射。首次免疫时抗原中MT量分别为8ug/只、16ug/只、32ug/只、64ug/只、128ug/只;加强免疫时所用抗原量依次加倍。前3次免疫时采用的是弗氏完全佐剂乳化,后3次免疫采用弗氏不完全佐剂乳化。两批小鼠加强免疫的时间隔分别为10日和14日。用免疫双扩散方法测定抗血清效价。得出以下结论:当首次免疫抗原中MT的量为16-32ug/只,每次加强免疫时抗原量加倍,加强免疫间隔时间为10日时,其免疫效果较佳,可使大部分小鼠抗血清效价达到1:16以上。 2.抗体的纯化及鉴定:将效价达到1:16以上的MT小鼠抗血清用饱和硫酸铵盐析法浓缩出γ-球蛋白,然后用DEAE-Sephadex A50层析柱分离提纯IgG。实验中发现洗脱液pH值为7.4时洗脱第一峰即为纯化的IgG,用不连续缓冲系统聚丙烯酰胺凝胶浓度梯度电泳鉴定层析洗脱下的IgG达到电泳纯。对纯化后的IgG进行辣根过氧化物酶标记,用直接ELISA鉴定其为MT的特异性抗体。 3.ELISA的建立:运用固相抗原间接非竞争型ELISA和固相抗原间接竞争型ELISA检测猪体组织中部分样品MT的含量,结果表明:用间接非竞争型ELISA测定样品时其结果不够稳定,同一样品所对应的0D值相差较大,此方法仅适合于样品中MT定性检测;采用间接竞争型ELISA测定样品,0D值比较稳定。用方阵滴定法确定了间接竞争型ELISA的各项具体条件:抗原最佳包被浓度为6.25ug/ml,一抗(鼠抗猪)使用适宜浓度为50ug/ml,酶标抗体(山羊抗小鼠)的使用浓度为1/8000倍,反应时间为3hr。用标准MT,采用间接竞争型ELISA方法拟合的标准曲线回归方程为:y=10~5×2~((22.32880-0.39583x)),相关系数为:R=0.9592。本方法的灵敏度为4.1ng/ml,批间和批内变异系数为9.9760%-14.3858%,在实际应用中有较好的稳定性。说明本试验建立的间接竞争型ELISA具有特异性强、灵敏度较高、稳定性和重复性好、适合于大批量样品的检测等优点,不失为对MT进行定量分析的一种有效方法。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2004-06-15)

李少南,谢显传,谭亚军,朱国念[4](2003)在《麦穗鱼脑AChE间接非竞争ELISA定量分析法的建立》一文中研究指出用PEG2000双水相萃取、DEAE-SephadexA-50和SephadexG-200方法分离纯化麦穗鱼Pseudorasboraparva脑中的乙酰胆碱酯酶(AChE),并制备了兔抗麦穗鱼脑AChE抗血清。用兔抗麦穗鱼脑AChE抗体连接抗原,建立了定量分析麦穗鱼脑AChE的间接非竞争酶联免疫吸附法(Indirectandnon-competitiveELISA),此法操作简便、灵敏度高,适用于定量检测。该方法的建立有利于AChE在环境科学和农药学研究领域的进一步研究和应用。(本文来源于《农药学学报》期刊2003年03期)

间接非竞争型论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

用达到电泳纯的大型溞(Daphnia magna)胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)免疫BALB/c小鼠,得到效价达1∶8 000的鼠抗大型溞ChE多克隆抗血清;通过优化抗原抗体反应条件,建立定量分析大型溞ChE含量的间接非竞争酶联免疫吸附法(indirect and non-competitive enzyme-linked immunosorbentassay)。结果表明:此方法检测灵敏度为24ng.mL-1;经免疫交叉反应鉴定,所获抗血清与5、10μg.mL-1标准蛋白质和其他生物如花翅摇蚊、尖额溞、斑马鱼(脑、脑除外的整体)、家蚕、意大利蜜蜂、赤子爱胜蚯蚓、非洲爪蟾(蝌蚪)等来源的ChE交叉反应率分别为:<0.25%、<0.25%、2.13%、10.19%、3.88%、3.56%、2.81%、3.93%、5.00%和2.75%,具较高的特异性。说明用本试验得到的抗血清建立的间接非竞争酶联免疫吸附法可用于大型溞体内ChE含量的测定,以利于在农药暴露环境下大型溞体内ChE活性的精确检测。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

间接非竞争型论文参考文献

[1].郎倩萍,李少南,郑佳豪,张文萍.大型溞ChE和NAGase间接竞争和非竞争ELISA方法的比较[J].安徽农业科学.2016

[2].刘洪翠,杨艳霞,李少南.大型溞胆碱酯酶间接非竞争酶联免疫吸附定量分析法的建立[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2012

[3].吴力专.Zn-金属硫蛋白间接竞争型ELISA的建立与应用[D].湖南农业大学.2004

[4].李少南,谢显传,谭亚军,朱国念.麦穗鱼脑AChE间接非竞争ELISA定量分析法的建立[J].农药学学报.2003

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