低剂量溴化乙锭建立低含量线粒体DNA大鼠骨髓来源间充质干细胞模型

低剂量溴化乙锭建立低含量线粒体DNA大鼠骨髓来源间充质干细胞模型

论文摘要

目的:研究低剂量溴化乙锭对大鼠骨髓来源间充质干细胞(BMSC)中线粒体DNA(mtDNA)的影响,建立低含量mtDNA的BMSC模型。方法:实验分为对照组(细胞未处理)、C-49d组(50ng/mL溴化乙锭处理49d+100μg/mL丙酮酸钠+50μg/mL尿嘧啶)及无尿嘧啶C-49d组(50ng/mL溴化乙锭处理49d)。于倒置显微镜下观察各组BMSC的形态,测定细胞活力,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测对照组和C-49d组mtDNA相关基因的表达情况。结果:与对照组比较,C-49d组细胞生长速度缓慢,细胞轮廓变大,呈现多角状,较之对照组更为短且扁平。对照组细胞活力高于C-49d组和无尿嘧啶C-49d组(P<0.05),无尿嘧啶C-49d组细胞活力低于C-49d组(P<0.05)。C-49d组线粒体相关基因ND1、ND2、ND3、COX1、COX2、COX3及CYTB表达量均显著低于对照组(均P<0.05)。结论:低剂量溴化乙锭处理可抑制BMSC中mtDNA的含量,成功构建低含量mtDNA的BMSC模型。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 动物、主要试剂和仪器
  •   1.2 大鼠BMSC的提取
  •   1.3 mtDNA降低的BMSC的建立
  •   1.4 实验分组及处理
  •   1.5 显微镜观察细胞生长状态
  •   1.6 mtDNA的敲低对BMSC细胞活力的影响
  •   1.7 mtDNA相关基因表达的检测
  •   1.8 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 细胞生长情况
  •   2.2 细胞活力
  •   2.4 mtDNA相关基因的表达情况
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 何熠,衡淑君,郑立

    关键词: 间充质干细胞,线粒体,溴化乙锭

    来源: 广西医科大学学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 广西医科大学广西生物医药协同创新中心

    基金: 国家自然科学基金资助项目(No.81760326),广西医疗卫生适宜技术开发与推广应用项目(No.S201670)

    分类号: R329.2

    DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2019.04.006

    页码: 520-523

    总页数: 4

    文件大小: 585K

    下载量: 84

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