热休克蛋白5调控内质网应激在视网膜色素上皮细胞保护中的作用

论文摘要

目的探讨相对分子质量70 000的热休克蛋白5（heat shock 70 kDa protein 5,HSPA5）调控内质网应激在N-亚视黄基-N-视黄基乙醇胺（N-retinylidene-N-retinylethanolamine,A2E）联合蓝光诱导视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞损伤对RPE细胞的保护作用。方法建立A2E联合蓝光诱导RPE细胞损伤模型,显微镜下观察RPE细胞对A2E的摄取。在RPE细胞损伤后3 h、6 h、12 h、24 h和48 h,运用CCK-8法检测RPE细胞活力;Western blot检测RPE细胞内质网应激相关蛋白HSPA5和CHOP的表达情况。构建HSPA5 shRNA慢病毒载体抑制RPE细胞中HSPA5的表达,实验分3组,HSPA5干扰组转染了HSPA5干扰序列,阴性干扰组转染了阴性对照序列,野生型组为未转染的RPE细胞。检测在RPE细胞损伤时,干扰HSPA5对内质网应激相关凋亡分子CHOP、Caspase-12表达以及RPE细胞活力的影响。结果细胞活力检测结果显示,A2E联合蓝光照射后3 h、6 h、12 h、24 h和48 h,RPE细胞活力分别是对照组的（80.9±6.2）%、（73.3±5.8）%、（70.6±5.4）%、（62.3±6.1）%和（51.4±4.5）%,与对照组相比差异均有统计学意义（均为P<0.05）。Western blot检测结果显示,HSPA5和CHOP蛋白表达在RPE细胞损伤后均有不同程度增高（P<0.05）。在A2E联合蓝光处理后12 h,HSPA5干扰组的CHOP和Caspase-12蛋白表达较对照组显著升高,并且RPE细胞活力明显下降（均为P<0.05）。结论 A2E联合蓝光可诱导RPE细胞发生损伤,损伤机制与内质网应激相关。HSPA5具有调控内质网应激,减轻A2E及蓝光损伤,促进RPE细胞存活的作用。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 冯竞仰,陆冰,朱鸿,孙向军,孙晓东

关键词: 视网膜色素上皮细胞,脂褐素,内质网应激,热休克蛋白,年龄相关性黄斑变性

来源: 眼科新进展 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 眼科与耳鼻咽喉科

单位: 上海交通大学附属第一人民医院,上海市眼底病重者点实验室,上海交通大学

基金: 国家自然科学基金青年项目(编号:81500732)~~

分类号: R774.1

DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2019.0255

页码: 1111-1115

总页数: 5

文件大小: 1497K

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