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以霍乱毒素B亚单位为载体的甲型副伤寒多糖结合疫苗理化及生物学特性

2020-12-10阅读(791)

以霍乱毒素B亚单位为载体的甲型副伤寒多糖结合疫苗理化及生物学特性

论文摘要

目的制备甲型副伤寒沙门菌（Salmonella paratyphi A,SPA）O特异多糖（O-specific polysaccharide,OSP）-霍乱毒素B亚单位（cholera toxin B subunit,CTB）结合疫苗,并初步探讨其理化及生物学特性。方法 SPA OSP多糖原液（简称OSP多糖）经溴化氰活化,己二酰肼（ADH）衍化,在碳二亚胺（EDAC）作用下与CTB偶联,结合物经Sepharose4FF柱纯化,获得多糖-蛋白结合物,对其理化指标、血清特异性、免疫原性及血清体外杀菌力进行检测。结果制备的SPA OSP-CTB结合物（简称OSP-CTB结合物）衍化度为（2. 63±0. 13）%、多糖回收率为（74±0. 2）%;鉴别试验显示OSP-CTB结合物与SPA O诊断血清、CTB抗体均有阳性沉淀线产生;免疫小鼠血清中OSP-CTB结合物抗体滴度显著增长,阳转率达100%,血清体外杀菌抗体滴度为1∶64。结论用溴化氰活化多糖制备的SPA OSP-CTB结合物具有良好免疫原性,可进一步进行疫苗研发。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 原液、血清及菌株
  •   1.2 主要试剂及仪器
  •   1.3 实验动物
  •   1.4 OSP-CTB结合物制备
  •   1.5 OSP-CTB结合物检测
  •     1.5.1 蛋白及多糖含量测定
  •     1.5.2 结合物分子大小分布
  •     1.5.3 鉴别试验
  •     1.5.4 EDAC及氰化物残留量测定
  •     1.5.5 O-乙酰基含量测定
  •     1.5.6 游离多糖测定
  •   1.6免疫原性检测
  •   1.7免疫血清体外杀菌力检测
  • 2 结果
  •   2.1 OSP-CTB结合物HPLC分析
  •   2.2 OSP-CTB结合物理化指标及血清特异性检测
  •     2.2.1蛋白及多糖含量
  •     2.2.2 结合物分子大小分布
  •     2.2.3 鉴别试验
  •     2.2.4 EDAC及氰化物残留量
  •     2.2.5 O-乙酰基含量
  •     2.2.6 游离多糖含量
  •   2.3 免疫原性检测
  •     2.3.1 OSP多糖免疫原性
  •     2.3.2 OSP-CTB结合物免疫原性
  •   2.4 免疫血清体外杀菌力
  •     2.4.1 OSP多糖与OSP-CTB结合物免疫血清体外杀菌力
  •     2.4.2 不同免疫次数OSP多糖与OSP-CTB结合物免疫血清体外杀菌力
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 胡玥,梁昊宇,周富昌,李颖茵,董思国,曾明,王斌

    关键词: 甲型副伤寒沙门菌,特异多糖,霍乱毒素亚单位,结合疫苗,免疫原性

    来源: 中国生物制品学杂志 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 中国食品药品检定研究院,罗益(无锡)生物制药有限公司

    分类号: R392

    DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002713

    页码: 833-836+840

    总页数: 5

    文件大小: 228K

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