牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌强菌株rpoE蛋白的原核表达及其免疫保护效力研究

牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌强菌株rpoE蛋白的原核表达及其免疫保护效力研究

论文摘要

为研究牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌(PM)强菌株rpoE蛋白的免疫保护性,本研究利用PCR方法扩增牛荚膜A型PM的rpoE基因,构建pET-28a-rpoE重组表达质粒,经诱导表达后SDS-PAGE检测结果显示,表达的rpoE蛋白相对分子量约为20 ku,与理论值一致;western blot结果显示该蛋白具有很好的特异性和反应原性;纯化的rpoE蛋白经皮下免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测融合蛋白的免疫原性,结果显示rpoE蛋白可以诱导小鼠产生较高水平的特异性抗体;PM攻毒后,免疫组保护率为70%。本研究获得的牛荚膜A型PM重组rpoE蛋白具有良好的免疫原性,免疫小鼠后能够提供一定的保护,可以作为研发PM亚单位疫苗的候选抗原。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要实验材料
  •   1.2 引物设计
  •   1.3 rpoE基因的扩增和重组质粒的构建与鉴定
  •   1.4 重组蛋白的表达、纯化及western blot鉴定
  •   1.5 攻毒保护试验
  • 2 结果
  •   2.1 重组质粒的构建与鉴定
  •   2.2 rpoE重组蛋白的表达及western blot鉴定
  •   2.3 重组蛋白的免疫保护试验结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 嵇少泽,高云航,勾长龙,张喜庆,王羽,田佳琪,李晨

    关键词: 荚膜型,基因,原核表达,免疫原性,免疫保护力

    来源: 中国预防兽医学报 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 吉林农业大学动物科学技术学院

    基金: 肉牛产业技术体系废弃物处理与环境控制岗位(CARS-38),畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发(2016YFD0501400),畜禽养殖固体废弃物无害化处理及资源化利用技术研究(20170101073JC),养殖场固体废弃物处理功能性菌剂研发及资源化利用技术研究(JJKH20180643KJ)

    分类号: S852.61

    页码: 740-743

    总页数: 4

    文件大小: 122K

    下载量: 106

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