猪SERPINC1基因对PCV2复制的效应及其转录调控

猪SERPINC1基因对PCV2复制的效应及其转录调控

论文摘要

旨在研究猪SERPINC1基因对PCV2复制的影响,并探究SERPINC1基因的转录调控。本研究以15头纯种的莱芜猪(LW)和15头大约克夏-长白杂交的商品猪(YL)为试验动物。每个品种分为2组:接毒组(10头)和对照组(5头)。对接毒组的猪肌肉注射3 mL 6.3×10-3TCID50的PCV2-SD毒株,对照组的猪肌肉注射3 mL的磷酸盐缓冲液。在前期转录组测序的基础上,分析SERPINC1基因对PCV2复制的效应,并分析检测SERPINC1基因启动子和转录活性。结果表明,过表达SERPINC1能显著抑制猪肺泡巨噬细胞(PAM)中PCV2的复制。分别克隆了LW和YL猪SERPINC1基因转录起始位点上游3 854 bp的序列,并进行启动子活性的分析,发现PCV2接毒后LW猪SERPINC1基因的启动子活性显著升高(P<0.05),而YL猪的启动子活性无显著变化。在SERPINC1基因的5′调控区找到4个调控该基因转录的关键区段,并对上述关键调控区中的4个多态性位点对SERPINC1基因启动子活性的影响进行了分析。综上表明,这4个多态位点均不影响SERPINC1基因的启动子活性。该研究结果为找到与猪抗PCV2有关的基因及分子标记奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞与病毒
  •   1.2 试验动物
  •   1.3 猪SERPINC1基因过表达载体的构建和细胞转染
  •   1.4 猪SERPINC1基因5′调控区的扩增及启动子活性分析
  •   1.5 猪SERPINC1基因5′调控区删除载体的构建及转录活性检测
  •   1.6 猪SERPINC1基因启动子突变载体的构建和转录活性的检测
  •   1.7 PCV2病毒拷贝数的检测
  •   1.8 数据统计分析
  • 2 结 果
  •   2.1 猪SERPINC1基因对PCV2病毒复制的效应
  •   2.2 PCV2接毒后LW猪与YL猪SERPINC1基因启动子活性的变化
  •   2.3 猪SERPINC1基因启动子区关键调控区段的确定
  •   2.4 猪SERPINC1基因启动子区关键调控区段内多态位点的效应
  • 3 讨 论
  • 4 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王昌英,鹿红宇,隋敏敏,王岩超,刘根,孙亿,姜运良

    关键词: 启动子

    来源: 畜牧兽医学报 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 山东农业大学动物科技学院

    基金: 国家科技支撑计划(2015BAD03B02),山东农业大学青年科技创新基金项目,山东省“双一流”奖补资金资助(SYL2017YSTD12)

    分类号: S852.651

    页码: 1545-1553

    总页数: 9

    文件大小: 1889K

    下载量: 102

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