导读:本文包含了细胞表面展示论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:表面,细胞,乳糖,甲基,病毒,催化剂,因子。
细胞表面展示论文文献综述
郭佳,蒋韵,滕飞,尹衍新,于丽华[1]（2019）在《间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体重链CDR3随机突变哺乳动物细胞表面展示文库的构建》一文中研究指出目的采用哺乳动物细胞表面展示技术构建间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体3E1D7的重链补体决定区3(CDR3)随机突变抗体库。方法用定向进化的方法在嵌合抗体3E1D7重链CDR3内部造成基因随机突变,将其通过双酶切克隆到哺乳动物细胞展示载体pSZI-CD中构建随机突变抗体库。抗体库基因转染CHO细胞,流式细胞术检测抗体基因是否在细胞表面表达。结果 3E1D7重链CDR3随机突变抗体库构建成功,库容量达到5.52×10~6。随机挑选20个阳性克隆进行测序鉴定, 20个克隆均在不同位置发生碱基突变且没有重复突变,编码20种不同的氨基酸序列,抗体库具有较好的多样性和随机性。流式细胞术分析抗体基因库上膜情况,均检测到全长抗体在CHO细胞表面的表达。结论通过哺乳动物细胞表面展示技术,成功构建了库容量达到5.52×10~6的c-Met嵌合抗体重链CDR3随机突变抗体库。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年06期）
刘敏瑞[2]（2019）在《利用细胞表面展示技术去除典型环境污染物的研究及应用》一文中研究指出环境污染问题变的日益突出,尤其是重金属和抗生素这两大环境污染物无处不在,汞是毒性最大的金属污染物之一,在环境中最常见的有两种形式,即无机汞和有机汞,其中无机汞所占的比例较大;但是,有机汞是汞最毒的一种存在形式,具有神经毒性,对人类造成不可逆转的危害;甲基汞是最常见的有机汞,人类摄入的甲基汞主要来自于鱼类的消费,鱼体内94%以上的汞是以甲基汞的形式存在,而且人体摄入的甲基汞会长期积累在体内。此外,抗生素是一种新型的环境污染物,我国是一个抗生素生产和使用量最大的国家,其中大部分的抗生素应用于畜禽养殖行业。人和动物服用的抗生素大部分(50%~90%)不能被完全吸收和代谢,导致大量的抗生素以原始形式随排泄物排放到环境中,对人类的健康造成巨大的威胁。而且牲畜粪便中残留的抗生素会抑制厌氧发酵过程中的甲烷生产。本文利用细胞表面展示技术对汞和抗生素的污染进行微生物修复,并将微生物的修复技术初步应用于这些污染物的治理。主要研究内容如下:1.浮游植物中所含的汞大多数为无机汞,进入食物链以后会不断的富集放大。文中将无机汞结合多肽通过冰晶核蛋白的锚定作用展示在大肠杆菌细胞表面获得工程菌株,发现工程菌株在不同金属离子溶液中可以选择性的吸附无机汞,对无机汞的最大吸附能力可达394.9μmol/g细菌干重。与对照细胞相比,无机汞的吸附能力提高了4倍,能去除约95%的无机汞。以可食用的鲫鱼作为研究模型,工程菌株投喂给鲫鱼并在鲫鱼肠道内定植,发现定植在鱼肠道内的工程菌株可以减少鱼体内无机汞含量的51.1%,同时促进了无机汞在粪便中的排除。工程菌株有效的保护鲫鱼不受环境中无机汞的污染,通过吸附作用缓解无机汞在鱼体内的毒性,而且工程菌株缓解了鱼肠道微生物在汞暴露条件下的变化,对鱼肠道微生物起到保护作用,这一新的技术有望控制无机汞对鱼类的污染。2.无机汞很容易被某些微生物转化为甲基汞,而且甲基汞进入食物链以后会不断的积累。本文从健康鲫鱼粪便中分离到一株大肠杆菌W-1,并将一个含有七个氨基酸的甲基汞结合多肽展示在大肠杆菌W-1细胞表面,此工程菌株对甲基汞具有很高的亲和力和结合能力,在12μM甲基汞溶液中的吸附效率达96%以上,吸附效率是野生型大肠杆菌的4倍,而且不受其他金属离子的干扰,温度对工程菌株的吸附作用影响不大。而且通过透射电镜确认甲基汞吸附在工程菌株的细胞膜上。本实验以鲫鱼作为动物模型,将工程菌株喂给鲫鱼,发现食用了工程菌株的鱼体内甲基汞含量比没有食用工程菌的鱼降低了36.3%,而鱼粪便中的甲基汞增加了36.7%。工程菌株吸附了甲基汞阻止其被鱼体内吸收,吸附了甲基汞的菌株最终随粪便排出,通过这种方法可以减少甲基汞在鱼体内的富集。3.大量的抗生素应用于养殖行业导致牲畜粪便中含有高浓度的抗生素残留,这些残留的抗生素会抑制后续的厌氧发酵。在该研究中,利用细胞表面展示技术将β-内酰胺酶展示在大肠杆菌的细胞表面获得全细胞生物催化剂的工程菌株,这个工程菌株具有较高的酶活(4.93 U/mg细菌干重),能高效降解β-内酰胺类抗生素,与游离的β-内酰胺酶相比,全细胞催化剂具有更高的稳定性。在室温条件下存放60天后的酶活性为最初酶活的82.7%,但是游离的β-内酰胺酶的酶活性降为18.0%。100 mg/L的青霉素、头孢唑林和阿莫西林分别在一小时内可以完全降解。用全细胞催化剂前处理含有β-内酰胺类抗生素的猪粪提高厌氧发酵产甲烷(93.2%),他可以通过降解抗生素避免发酵体系中微生物群落结构的变化,从而有利于产甲烷菌的生长。这种新型的策略不仅消除了粪便中残留的抗生素,而且还提高了甲烷产量,因此实现了可再生能源的最大化利用。4.红霉素是大环内酯类抗生素之一,广泛应用于药疗和畜禽等行业,红霉素是环境中检出率较高的抗生素之一。利用细胞表面展示技术将红霉素酯酶展示在大肠杆菌的细胞表面获得全细胞生物催化剂的工程菌株,该工程菌株的红霉素酯酶酶活力为1.0 U/mg细菌干重,酶活反应的最佳温度为30℃,最佳pH为7。全细胞生物催化剂能在24 h内完全降解50 mg/L的红霉素,酶的稳定性很高,室温下存放40天后依然能保持初始酶活的86%。此工程菌株可以回收利用,重复使用7次后的酶活性达最初活力的80%。为了减少环境中的红霉素残留,该全细胞生物催化剂用于含红霉素的生活废水处理,降解效率达100%。(本文来源于《兰州大学》期刊2019-03-01）
王自锋,荣绍丰,张硕,管世敏,Tian,Peng[3]（2018）在《杜兰病毒衣壳蛋白细菌细胞表面展示体系的构建及与受体互作分析》一文中研究指出人源诺如病毒(Human norovirus,HuNoVs)是世界范围内引起人类患食源性胃肠道疾病的主要病原体,对食品安全和公共卫生有重要影响。由于当前没有稳定的培养HuNoVs细胞系和小动物模型,导致人们对HuNoVs受体了解甚少。杜兰病毒(Tulane virus,TV)是目前常用的HuNoVs替代物之一,是认识HuNoVs的重要途径之一。TV可体外培养,并与HuNoVs一样,可识别人类组织血型抗原。本研究克隆了TV衣壳蛋白编码基因并构建其大肠杆菌细胞表面展示体系。该体系能直接捕获病毒受体并通过特异性剪切直接释放TV衣壳蛋白-受体复合物。通过Western-blot对TV衣壳蛋白的诱导展示性能进行优化与评估;分别用煮沸(蛋白质失活)和NaIO_4(糖氧化)处理恒河猴肾细胞(LLC-MK2),通过改进的酶联免疫吸附试验(ELISA)初步证明TV衣壳蛋白受体是多糖类物质(P<0.01)而非蛋白质(P>0.05)。进一步用该体系捕获TV受体,通过超高效液相色谱-串联质谱检测获得LLC-MK2细胞中与TV结合的单糖为鼠李糖、葡萄糖和核糖。本研究为进一步发掘和认识HuNoVs受体提供理论基础和技术支撑。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07）
蒋晓敏,王贺,王允祥,钱永常,尹良鸿[4]（2019）在《β-半乳糖苷酶的微生物细胞表面展示及其应用》一文中研究指出β-半乳糖苷酶是一种在乳制品生产、医药、生化分析等领域得到广泛应用的酶制剂。商品化β-半乳糖苷酶多以游离形式存在,但游离的β-半乳糖苷酶制造过程复杂、稳定性低、易失活、有机溶剂耐受性差、重复利用率低,这些制约因素限制了β-半乳糖苷酶的进一步应用。将β-半乳糖苷酶通过基因工程技术固定在微生物细胞表面,该系统的优点有:1)在工业生产过程中,无需经复杂的分离纯化和固定化操作,成本低;2)稳定性高、有机溶剂耐受性强,既可用于反应条件温和又能满足复杂体系、反应条件剧烈的催化需求;3)拓展β-半乳糖苷酶在蛋白质工程研究、生物传感器制造等领域的应用。β-半乳糖苷酶表面展示所用宿主包括乳酸菌、酵母和芽孢,该文分别综述这3种宿主中β-半乳糖苷酶表面展示系统的研究进展及其在酶的生产、作为报告蛋白和全细胞生物催化方面的应用。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年07期）
王艺颖,程海荣[5]（2018）在《解脂耶氏酵母细胞表面展示乳糖水解酶高效水解乳糖》一文中研究指出乳糖是婴幼儿获取能量的重要碳源之一,但乳糖需要在乳糖酶的作用下水解成半乳糖与葡萄糖后才能被吸收。缺少乳糖分解酶的婴幼儿在摄入含乳糖的食品后,未被消化的乳糖会直接进入大肠,刺激大肠蠕动加快,造成一系列不适应症状即乳糖不耐症,我国属于乳糖不耐症高发国家。因此,解决乳糖的体外水解问题对减轻该症状有重要的意义。研究通过将β-半乳糖苷酶(也称为乳糖水解酶)表面展示在食品安全微生物解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)细胞表面,通过培养获得该酵母,然后直接利用酵母细胞来水解乳糖生成半乳糖与葡萄糖。采用该工程酵母细胞(HCY10),能在24小时内完全水解50g/L的乳糖,生成半乳糖与葡萄糖。该方法具有高效、简便的优点,能为乳糖的高效水解提供一条新的途径。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2018年08期）
杨玥,杜济良,左然然,陈乐,李建安[6]（2018）在《细胞表面展示木聚糖酶对纤维素酶水解底物的协同促进作用》一文中研究指出为了解木质纤维素水解过程中木聚糖酶作为辅助酶对纤维素酶的协同促进作用,采用实验室保存的单展示3种纤维素酶(内切葡聚糖酶EGII、外切葡聚糖酶CBHII和β-葡糖苷酶BGLI)和2种木聚糖酶(β-D-1,4内切木聚糖酶Xyn II和β-D-1,4外切木聚糖酶Xyl A)的酿酒酵母功能菌群,以蒸汽爆破玉米秸秆为底物进行乙醇发酵实验(SSF).结果显示,以蒸汽爆破玉米秸秆为底物时,加入纤维素酶和木聚糖酶共发酵96 h的最高乙醇浓度达到0.695 g/L,乙醇产率为0.254 g/g,相当于理论值的49.8%,纤维素酶与木聚糖酶之间的协同因子(DS)最高达到1.16(始终大于1).本研究表明在细胞表面展示体系中适量添加木聚糖酶对纤维素酶水解底物具有较明显的促进作用,为直接以木质纤维素为原料制取纤维素乙醇提供了一定的可行性依据,可通过调节单展示酵母细胞在菌群间的动态比例实现对酶协同作用的优化调控.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2018年02期）
黄灿[7]（2018）在《超折迭GFP介导的有机磷水解酶在大肠杆菌细胞表面展示研究》一文中研究指出有机磷化合物是一类具有神经毒性的化学试剂,对生物体有极大的危害性,因此人们不仅利用有机磷化合物研制化学武器,还使用它进行杀虫、灭鼠,然而有机磷化合物的大量使用和残留不仅会导致严重的水资源,土壤、大气环境污染,还会严重威胁着人类的生命安全。因此有机磷化合物的降解具有重要的研究意义,随着对研究的深入,目前越来越多的有机磷水解酶基因被克隆和表达,有机磷水解酶受到了广泛的研究,其中甲基对硫磷水解酶MPH(Methyl Parathion Hydrolase)是一种能降解甲基对硫磷的磷酸叁酯酶,它可以特异性的与有机磷化合物结合,使有机磷化合物的P-O或者P-S等磷酯键断裂,生成对硝基酚和磷酸酯类物质,降低有机磷化合物的毒性。但是由于MPH的表达量很低,生产成本较高等原因阻碍了其工业化应用。本实验选用的是来源于邻单胞菌属中Plesiomonas sp.M6菌株的mph基因,通过利用折迭GFP的突变体SF-GFP作为N端锚定蛋白与甲基对硫磷水解酶MPH融合,构建了一株在大肠杆菌表面展示MPH的工程菌株,具体实验结果如下:1.甲基对硫磷水解酶基因mph-r合成根据大肠杆菌密码子偏爱性原则,本研究首先在来源于Pseudomonas sp.M6的甲基对硫磷水解酶基因mph原始序列基础上,经改造,优化设计合成了新的甲基对硫磷水解酶基因mph-r,新基因全长930bp,其中C端携带HA标签。然后按照设计的基因序列通过DNA woks设计overlapping PCR引物,合成了新的基因mph-r。2.融合表达质粒pET23a-sfgfp-mph-r的构建及表达菌株的获得通过无酶克隆技术,将合成的mph-r基因克隆至表达载体pET23a-sfgfp,获得大肠杆菌融合表达质粒pET23a-sfgfp-mph-r。然后将该表达质粒转至E.coli Rosetta blue菌株,获得重组子。通过对PAGE上目的条带进行灰度扫描,检测结果表明,重组菌株表达的融合蛋白表达量比MPH-R单独表达有了很大的提高。3.sfGFP-MPH融合蛋白的表面展示通过离心处理,分别提取出细胞各组分的蛋白,对各组分蛋白进行变性处理后,SDS-PAGE电泳检测分析,Western blot验证MPH在细胞中的定位,实验发现MPH-R被成功展示到细胞外膜上。由于融合蛋白的N端是sf-GFP而C端带有HA标签,因此我们通过荧光抗体对HA标签进行免疫荧光标记,进一步实验发现,通过流式细胞仪检测到融合蛋白的展示效率约64.7%,并通过激光共聚焦显微镜能观察到蛋白确实展示在细胞表面。4.表面固定化表面酶的活性和稳定性对培养后的细胞进行处理后,通过以甲基对硫磷作为反应混合物中的底物,分光光度测定法检测全细胞的活性。经过测定,全细胞的最适温度为30℃,最适pH为9,全细胞最高酶活为11.4U,是不融合SF-GFP表达MPH的40倍。金属离子作为添加剂检测全细胞催化活性的变化,当浓度为1mM时,、Co2+能有效增加全细胞的活性,达到了 151%。通过将收获的细胞在常温下静置8天,我们发现细胞仍能维持60%的活性,能持续的降解甲基对硫磷。(本文来源于《湖北大学》期刊2018-04-13）
李远锋[8]（2018）在《黑曲霉细胞表面展示CALB的催化特性及其应用》一文中研究指出黑曲霉(Aspergillus niger)具有非常强的蛋白分泌能力,是GRAS(Generally recognized as safe)认证的微生物,是重要工业酶生产的菌株。细胞表面展示技术是将功能蛋白锚定于微生物细胞表面实现将功能蛋白固定于细胞表面,从而赋予细胞全新的功能,其中微生物表面展示酶在生物催化和制备生化产品等方面表现出优秀性能。手性醇是合成一些复杂天然产物的手性中心,是用于生产药物中间体的重要手性砌块,利用酶法催化动力学拆分手性醇是绿色制造领域的研究热点。目前,基于细胞表面展示酶技术制备的全细胞催化剂进行拆分手性醇存在着反应时间长、拆分效率不高、难以实现工业化应用等问题,因此,有必要进行探索和评价新的细胞表面展示酶技术用于拆分手性醇。本文研究了黑曲霉细胞表面展示CALB的催化特性,然后将黑曲霉细胞表面展示CALB首次应用于催化仲醇的动力学拆分。研究内容和结果如下:首先,研究黑曲霉细胞表面展示CALB的菌体表面疏水性及其对不同碳链长度的对硝基苯酚酯类的水解活性,表明黑曲霉细胞表面展示CALB具有较强的表面疏水性,推测其可能在非水相体系催化具有更强的催化活性,对硝基苯酚丁酯为底物时,其水解活性最高。其次,通过化学合成法获得脂肪酶催化仲醇动力学拆分的产物,并建立了脂肪酶催化仲醇动力学拆分的底物和产物的气相色谱检测方法,为黑曲霉细胞表面展示CALB催化仲醇动力学拆分提供实验技术支撑。最后,利用黑曲霉细胞表面展示CALB催化仲醇动力学拆分。以2-辛醇为催化仲醇动力学拆分的模式底物,研究仲醇动力学拆分的关键影响因素,如酰基供体、底物摩尔比、黑曲霉细胞表面展示CALB的添加量、水活度、温度和溶剂等,对黑曲霉细胞表面展示CALB催化仲醇动力学拆分的影响。得到黑曲霉细胞表面展示CALB催化仲醇动力学拆分的优化工艺条件为:以乙酸异丙烯酯为酰基供体,底物:酰基供体摩尔比为1:1,黑曲霉细胞表面展示CALB的添加量为50 g/L,水活度为0.11,反应溶剂为甲苯,温度为45℃,转速为200 rpm。在该优化工艺下,研究黑曲霉细胞表面展示CALB催化2-辛醇动力学拆分的时间进程,得到黑曲霉细胞表面展示CALB催化2-辛醇拆分反应12 h,2-辛醇转化率达47.4%,(R)-乙酸-2-辛酯的ee_p大于99%,E值大于600,且在该工艺条件下进行8批次连续催化反应的前7个批次,底物摩尔转化率保持在70%以上,具有较好的重复利用性。黑曲霉细胞表面展示CALB继续利用优化工艺条件拓展应用于催化其他7种仲醇的动力学拆分,其中2-戊醇、1-(4-氯苯基)-乙醇、1-(4-溴苯基)-乙醇的底物摩尔转化率达47%以上,ee_p达到99.6%,E值大于600;3-庚醇、1-苯乙醇、1-(4-甲基苯基)-乙醇的底物摩尔转化率分别为18%、39.3%、43.7%,ee_p和E值都分别达到99.9%和600以上;4-甲氧基-α-甲基苄基醇的底物摩尔转化率达到48.8%,但ee_p和E值分别为97.8%和311.3。与已经报道的细胞表面展示脂肪酶催化拆分1-苯乙醇作比较,黑曲霉表面展示CALB催化1-苯乙醇拆分体系的时空产率是文献报道的2倍以上,具有良好的拆分1-苯乙醇的效果。总体来说,黑曲霉细胞表面展示CALB在催化仲醇的动力学拆分表现出了良好的立体选择性,对2-戊醇、1-(4-氯苯基)-乙醇、1-(4-溴苯基)-乙醇、1-苯乙醇、1-(4-甲基苯基)-乙醇、4-甲氧基-α-甲基苄基醇具有良好的拆分效果,黑曲霉细胞表面展示CALB为催化仲醇动力学拆分提供新的催化剂选择。(本文来源于《华南理工大学》期刊2018-04-12）
杨萌萌,李梦婷,王志升,吴璟,李红兵[9]（2018）在《细粒棘球蚴Eg95蛋白在昆虫Sf-9细胞表面的展示》一文中研究指出目的构建杆状病毒表面展示系统,将细粒棘球蚴主要保护性抗原Eg95蛋白展示在昆虫Sf-9细胞膜上,为下一步研究细粒棘球蚴亚单位疫苗奠定基础。方法将Eg95基因插入到昆虫细胞表面展示转座载体p Bac SC中,转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf-9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western blot鉴定以及表面展示分析。结果成功构建重组质粒p Bac SC-Eg95,经Western blot和激光共聚焦显微镜分析,Eg95蛋白成功获得表达。结论成功将细粒棘球蚴Eg95蛋白展示在了感染的昆虫Sf-9细胞膜上。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2018年19期）
田淑芳,王雨,李春华[10]（2018）在《变形杆菌脂肪酶在大肠杆菌细胞表面的展示表达及重组酶的特性》一文中研究指出在生物转化处理工业中利用细胞表面展示技术表达脂肪酶作为一种全细胞催化形式具有很大优势,因为脂肪酶展示在细胞表面作为一种固定化酶.以超折迭绿色荧光蛋白的羧基端结构域作为锚定区,构建变形杆菌来源的脂肪酶与羧基端结构域的融合基因.将融合基因插入到p ETsf GFP表达载体中,得到表面展示载体p ETsf GFP-Lip A.将重组质粒转入大肠杆菌Rosetta-Blue宿主菌中经自诱导后,利用免疫荧光显微技术和流式细胞仪分析确定脂肪酶成功展示于大肠杆菌细胞表面.重组酶的最高酶活达到7 009 U/g干细胞,最适反应温度和p H分别为为37℃和8.0,表面活性剂Tirton X-100、Co~(2+)和Ni~(2+)能显着提高脂肪酶的酶活,60%丙酮处理该酶18 h后脂肪酶残余酶活性为104%,60%乙醇处理该酶18 h后脂肪酶残余酶活性为117%,表明脂肪酶对有机试剂具有很好的耐受性.以上实验结果表明:细胞表面展示技术表达脂肪酶的最大优点为工业化应用提供了坚实的基础.(本文来源于《湖北大学学报(自然科学版)》期刊2018年01期）
细胞表面展示论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
环境污染问题变的日益突出,尤其是重金属和抗生素这两大环境污染物无处不在,汞是毒性最大的金属污染物之一,在环境中最常见的有两种形式,即无机汞和有机汞,其中无机汞所占的比例较大;但是,有机汞是汞最毒的一种存在形式,具有神经毒性,对人类造成不可逆转的危害;甲基汞是最常见的有机汞,人类摄入的甲基汞主要来自于鱼类的消费,鱼体内94%以上的汞是以甲基汞的形式存在,而且人体摄入的甲基汞会长期积累在体内。此外,抗生素是一种新型的环境污染物,我国是一个抗生素生产和使用量最大的国家,其中大部分的抗生素应用于畜禽养殖行业。人和动物服用的抗生素大部分(50%~90%)不能被完全吸收和代谢,导致大量的抗生素以原始形式随排泄物排放到环境中,对人类的健康造成巨大的威胁。而且牲畜粪便中残留的抗生素会抑制厌氧发酵过程中的甲烷生产。本文利用细胞表面展示技术对汞和抗生素的污染进行微生物修复,并将微生物的修复技术初步应用于这些污染物的治理。主要研究内容如下:1.浮游植物中所含的汞大多数为无机汞,进入食物链以后会不断的富集放大。文中将无机汞结合多肽通过冰晶核蛋白的锚定作用展示在大肠杆菌细胞表面获得工程菌株,发现工程菌株在不同金属离子溶液中可以选择性的吸附无机汞,对无机汞的最大吸附能力可达394.9μmol/g细菌干重。与对照细胞相比,无机汞的吸附能力提高了4倍,能去除约95%的无机汞。以可食用的鲫鱼作为研究模型,工程菌株投喂给鲫鱼并在鲫鱼肠道内定植,发现定植在鱼肠道内的工程菌株可以减少鱼体内无机汞含量的51.1%,同时促进了无机汞在粪便中的排除。工程菌株有效的保护鲫鱼不受环境中无机汞的污染,通过吸附作用缓解无机汞在鱼体内的毒性,而且工程菌株缓解了鱼肠道微生物在汞暴露条件下的变化,对鱼肠道微生物起到保护作用,这一新的技术有望控制无机汞对鱼类的污染。2.无机汞很容易被某些微生物转化为甲基汞,而且甲基汞进入食物链以后会不断的积累。本文从健康鲫鱼粪便中分离到一株大肠杆菌W-1,并将一个含有七个氨基酸的甲基汞结合多肽展示在大肠杆菌W-1细胞表面,此工程菌株对甲基汞具有很高的亲和力和结合能力,在12μM甲基汞溶液中的吸附效率达96%以上,吸附效率是野生型大肠杆菌的4倍,而且不受其他金属离子的干扰,温度对工程菌株的吸附作用影响不大。而且通过透射电镜确认甲基汞吸附在工程菌株的细胞膜上。本实验以鲫鱼作为动物模型,将工程菌株喂给鲫鱼,发现食用了工程菌株的鱼体内甲基汞含量比没有食用工程菌的鱼降低了36.3%,而鱼粪便中的甲基汞增加了36.7%。工程菌株吸附了甲基汞阻止其被鱼体内吸收,吸附了甲基汞的菌株最终随粪便排出,通过这种方法可以减少甲基汞在鱼体内的富集。3.大量的抗生素应用于养殖行业导致牲畜粪便中含有高浓度的抗生素残留,这些残留的抗生素会抑制后续的厌氧发酵。在该研究中,利用细胞表面展示技术将β-内酰胺酶展示在大肠杆菌的细胞表面获得全细胞生物催化剂的工程菌株,这个工程菌株具有较高的酶活(4.93 U/mg细菌干重),能高效降解β-内酰胺类抗生素,与游离的β-内酰胺酶相比,全细胞催化剂具有更高的稳定性。在室温条件下存放60天后的酶活性为最初酶活的82.7%,但是游离的β-内酰胺酶的酶活性降为18.0%。100 mg/L的青霉素、头孢唑林和阿莫西林分别在一小时内可以完全降解。用全细胞催化剂前处理含有β-内酰胺类抗生素的猪粪提高厌氧发酵产甲烷(93.2%),他可以通过降解抗生素避免发酵体系中微生物群落结构的变化,从而有利于产甲烷菌的生长。这种新型的策略不仅消除了粪便中残留的抗生素,而且还提高了甲烷产量,因此实现了可再生能源的最大化利用。4.红霉素是大环内酯类抗生素之一,广泛应用于药疗和畜禽等行业,红霉素是环境中检出率较高的抗生素之一。利用细胞表面展示技术将红霉素酯酶展示在大肠杆菌的细胞表面获得全细胞生物催化剂的工程菌株,该工程菌株的红霉素酯酶酶活力为1.0 U/mg细菌干重,酶活反应的最佳温度为30℃,最佳pH为7。全细胞生物催化剂能在24 h内完全降解50 mg/L的红霉素,酶的稳定性很高,室温下存放40天后依然能保持初始酶活的86%。此工程菌株可以回收利用,重复使用7次后的酶活性达最初活力的80%。为了减少环境中的红霉素残留,该全细胞生物催化剂用于含红霉素的生活废水处理,降解效率达100%。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞表面展示论文参考文献
[1].郭佳,蒋韵,滕飞,尹衍新,于丽华.间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体重链CDR3随机突变哺乳动物细胞表面展示文库的构建[J].细胞与分子免疫学杂志.2019
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[4].蒋晓敏,王贺,王允祥,钱永常,尹良鸿.β-半乳糖苷酶的微生物细胞表面展示及其应用[J].食品与发酵工业.2019
[5].王艺颖,程海荣.解脂耶氏酵母细胞表面展示乳糖水解酶高效水解乳糖[J].中国生物工程杂志.2018
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[7].黄灿.超折迭GFP介导的有机磷水解酶在大肠杆菌细胞表面展示研究[D].湖北大学.2018
[8].李远锋.黑曲霉细胞表面展示CALB的催化特性及其应用[D].华南理工大学.2018
[9].杨萌萌,李梦婷,王志升,吴璟,李红兵.细粒棘球蚴Eg95蛋白在昆虫Sf-9细胞表面的展示[J].世界最新医学信息文摘.2018
[10].田淑芳,王雨,李春华.变形杆菌脂肪酶在大肠杆菌细胞表面的展示表达及重组酶的特性[J].湖北大学学报(自然科学版).2018
论文知识图
