磷酸化精氨酸抗体在蛋白质组中的应用及前生源条件下蒙脱土对二肽的保护作用研究

论文摘要

蛋白质的可逆磷酸化修饰在生物体内有着重要的作用,作为蛋白质磷酸化修饰当中的一种,N-磷酸化修饰因为遇酸易水解、天然丰度低以及缺乏有效的研究工具等一些特殊原因而常常被人们所忽略。基于此,本论文建立了以表面修饰金纳米粒子的磁性材料（Fe3O4@Si02@Au）作为pArg抗体固载工具来研究N-磷酸化修饰中的一种——精氨酸磷酸化的方法。首先,将纯化得到的pArg抗体固载到Fe3O4@SiO2@Au材料上,并以此为富集工具,探索了针对pArg富集的新方法。通过Zeta电位值的变化以及SDS-PAGE结果表明,pArg抗体己经成功的固载到Fe3O4@SiO2@Au上,并且,固载在Fe3O4@SiO2@Au上的pArg抗体依然具有生物活性。以此为富集工具,成功富集到了含有pArg位点的McsB蛋白。另外,针对N-磷酸化酸不稳定的特点,我们优化了nano LC-MS的流动相条件,将流动相的pH值增大为4,以McsB为模型,验证了改变流动相pH值后nano LC-MS的检测效果,成功鉴定到了McsB蛋白6条肽段上的7个pArg位点,表明了优化后的nano LC-MS检测条件对于McsB具有良好的检测效果。在生命的化学进化过程中,前生源有机化合物的稳定性对于生物分子的进化极其重要,尤其是在紫外线存在的情况.下,大量存在的紫外线会导致前生源有机化合物被分解。蒙脱土（MMT）作为一种在原始地球上大量存在的黏土,己经被证明是一种良好的催化剂和吸附剂,对于生物分子的化学进化起到重要作用。本论文系统地研究了pH为3和10时MMT对多肽的吸附和其吸附后的抗紫外线辐射的能力。研究结果表明,在不同的pH值条件下MMT对Phe、Phe2、Tyr2、Val2、Ala2、Leu2、Pro2、FFFFD的吸附效率是不同的。较强的酸性（pH=3）条件有利于多肽在MMT上的吸附,并且多肽在MMT上的吸附率都大于60%;碱性条件（pH=10）有利于多肽从MMT上解吸出来。通过对比Phe、Phe2、FFFFD在MMT上的吸附率可知,MMT对多肽吸附能力的强弱与肽链长度成正比。另外,pH=3时,MMT对多肽的吸附可以更好地帮助多肽抵抗紫外线的分解。与其它多肽相比,在pH=3时,MMT对Phe2的保护作用更为显著。根据我们的实验结果并结合前人的研究,我们提出了一种可能的MMT对多肽的保护机制,即多肽可以通过静电吸附和离子交换作用吸附到MMT的夹层当中,使得多肽受到的UV辐射减少,从而更好地保护多肽不被紫外线分解。

论文目录

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 林荣灿

导师: 赵玉芬,刘艳

关键词: 精氨酸磷酸化修饰,辐射,蒙脱土

来源: 厦门大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 厦门大学

分类号: Q51

总页数: 103

文件大小: 7717K

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标签：精氨酸磷酸化修饰论文;  辐射论文;  蒙脱土论文;