一株Vero细胞适应的柯萨奇病毒A组10型毒株遗传稳定性研究

一株Vero细胞适应的柯萨奇病毒A组10型毒株遗传稳定性研究

论文摘要

目的探讨一株手足口病相关柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV-A10)毒株R6-19/XY/CHN/2017在Vero细胞中的适应性,及其连续传代的遗传稳定性。方法对R6-19/XY/CHN/2017毒株在Vero细胞上进行连续适应传代培养后,对适应前病毒及适应后的第1、5、10、15代次毒株的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、病毒感染性滴度、全基因组核苷酸序列及氨基酸序列等进行比较分析。结果该毒株能较好地在Vero细胞上适应,不同代次的感染性滴度在7.85 lgCCID50/ml~8.17 lgCCID50/ml。与适应前毒株比较,其5′UTR及编码区共有7个碱基发生改变,VP4和VP1编码区分别有1、3个氨基酸发生改变;而适应后病毒各代次在CPE、病毒感染力特点等无明显区别,且各代次全基因核酸序列中,只有第15代的VP1蛋白编码区发生一个碱基突变。结论 CV-A10株R6-19/XY/CHN/2017能在Vero细胞较好地适应,并具有良好的遗传稳定性,这将为后续CV-A10疫苗的研发和相关机制研究提供参考。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 病毒与细胞
  •   1.2 毒株在Vero细胞中的适应性传代
  •   1.3 Vero细胞适应株在Vero细胞上的克隆纯化
  •   1.4 病毒VP1序列测定及血清型鉴别
  •   1.5 病毒感染性滴度测定
  •   1.6 Vero细胞适应株连续传代培养
  •   1.7 病毒全基因序列测定及分析
  • 2 结 果
  •   2.1 病毒在Vero细胞适应
  •   2.2 细胞病变
  •   2.3 感染性滴度检测
  •   2.4 R6-19/XY/CHN/2017株及各代次V6-19/XY/CHN/2017株基因序列比较
  •   2.5 V6-19/XY/CHN/2017株适应前、后核酸及氨基酸序列比较
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张捷,刘红波,丛山日,张名,张海浩,孙浩,杨昭庆,马绍辉

    关键词: 柯萨奇病毒组型,细胞适应病毒株,连续传代,遗传稳定性

    来源: 中国病毒病杂志 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

    基金: 云南省科技计划项目(2017FA006)

    分类号: R373.23

    DOI: 10.16505/j.2095-0136.2019.0027

    页码: 202-208

    总页数: 7

    文件大小: 1874K

    下载量: 111

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