潘学军[1]2005年在《无核抗病葡萄胚挽救技术体系优化及新品系培育》文中指出无核葡萄是当今世界葡萄消费和育种的重要方向之一。无核葡萄的合子胚在发育过程中败育而不能发育成正常的种子,因而常规育种只能以无核品种作父本杂交选育无核葡萄品种,但后代中无核几率低(0～15.9%),育种效率低下。胚挽救技术可用于无核葡萄作母本的品种间杂交,后代无核性状比率高(45%～82%),育种效率高,但选育的欧洲葡萄无核品种的突出缺点是缺乏抗病性。国外已将该技术应用于无核葡萄与圆叶葡萄育种中,但又存在杂交障碍,成苗率极低的问题。中国葡萄属野生种抗病性强,与欧亚种无核品种杂交亲合性强。因此,利用胚挽救技术获得欧洲葡萄无核品种与中国葡萄属野生种杂交后代,以培育无核抗病葡萄新品种(系)是完全可行的。 本研究田间人工杂交38 个葡萄种间杂交组合和13 个种内杂交组合。在前期胚挽救初步研究的基础上,本试验用19 个以无核葡萄为母本的杂交组合为试材,进行了无核抗病葡萄胚挽救的进一步研究,主要取得了如下研究结果:1. 通过田间杂交和胚挽救获得了51 个杂交组合的葡萄新种质2998 份。利用胚挽救技术获得19 个杂交组合幼苗814 株,其中13 个无核品种×中国葡萄属野生种(杂种)组合成苗257 株;常规田间杂交组合32 个,成苗2184 株,其中20 个中国葡萄属野生种(杂种)×无核品种组合成苗1606 株; 2. 获得了适宜无核抗病葡萄即将败育的幼胚继续发育的最佳培养基:MM3+10mmol/L 甘氨酸;建立了其最优培养方式:固液双层培养;筛选到了适宜作胚挽救母本的欧洲葡萄无核品种是爱莫无核(Olmo Seedless)、底来特(Delight)和火焰无核(Flame Seedless)。适宜培养基、培养方式和胚挽救母本的最佳搭配使无核抗病葡萄胚发育率高达66.67%,成苗率达64.58%。获得了一种适宜诱导合子胚胚状体再生的培养基配方:ER 固体+1.0umol/L BA。利用该培养基对底来特×北醇的合子胚诱导率达82.61%。 3. 建立了葡萄胚挽救苗移栽技术体系:春季选择壮苗→强光锻炼1 周→无菌条件
唐冬梅[2]2005年在《无核葡萄胚挽救育种技术及种质创建》文中提出2002 年5 月～2003 年5 月,实施无核葡萄作母本、抗病的中国野生葡萄作父本的杂交组合7 个,无核×无核组合6 个,同时对影响胚挽救效果的取样时期、培养基、培养条件等因素进行了研究,并对胚挽救获得的幼苗进行了移栽定植,2004年以森田尼无核、无核白、克瑞森无核为材料,用不同浓度的植物生长调节物质矮壮素、BA、腐胺和乙烯利并添加矿物元素,在不同时期处理果穗,以促进无核葡萄胚珠的发育,提高胚挽救成苗率。主要取得的研究成果如下: 1.获得一批无核抗病葡萄杂交胚挽救幼苗 运用胚挽救技术,以无核葡萄作母本,中国野生葡萄和欧洲无核葡萄作父本,共进行了13 个组合,获得322 株杂交苗。其中无核葡萄×中国野生葡萄组合7 个,成苗257 株;无核葡萄×无核葡萄组合6 个,成苗65 株。无核抗病杂交后代包括:底来特×江西-3 17 株、底来特×江西-2 18 株、底来特×双优114 株、爱莫无核×泰山-2 32 株、爱莫无核×甘肃-91 26 株、火焰无核×平利-5 15 株、火焰无核×黑龙江实生35 株。不同的杂交结合胚挽救成苗结果差异较大,以底来特、爱莫无核和赫什无核作母本的组合成苗率较高。其中底来特×双优的胚发育率最高,达24.48%,成苗率10.86%。共移栽杂交株系255 个1471 株,出圃211 个株系601 株,温室移栽成活率和苗圃成活率分别为67.0%和83.9%,出圃杂交苗已于2005年春定植大田。 2.优化了胚挽救技术体系 比较了不同杂交组合胚挽救取材时间对成苗的影响。底来特×江西-3 58 天取材的胚发育率高于50 天;赫什无核×火焰无核54 天和58 天取材差异不显着;无核紫×森田尼无核54 天取材的效果优于52 天,底来特×双优51 天取材的优于47天,火焰无核×黑龙江实生50 天取材的优于46 天。研究表明在一定范围内,较晚时期取材接种胚珠,能得到较高的成苗率。对胚挽救的培养基和培养环境条件进行对比,结果表明:在胚珠发育阶段,胚发育宜使用ER 液体培养基,用培养皿作培养容器,进行暗培养,添加2～5 m mol/L 的腐胺有助于底来特胚的发育;在胚萌发阶段宜使用1/2MS 附加IBA 或IAA 0.1～0.2 mg/L 的固体培养基,使用试管作培养容器,光照培养。胚接种在上述萌发培养基中,萌发后能直接成苗,省去转接成苗培养基的步骤,简化培养程序。
刘海琳[3]2003年在《葡萄的胚珠培养与叁倍体葡萄育种技术的研究》文中提出选用巨峰、里扎马特、无核白为试材，在花后35~60天，将胚珠接种在不同激素水平的MS培养基上，进行胚珠培养，以研究葡萄的胚珠培养和叁倍体葡萄育种技术。结果表明，花后60天的巨峰、里扎马特胚珠培养效果最好。巨峰在Ⅶ号培养基上得到了96%的发育率(p<0.01)和37.5%的成苗率(p<0.01)；里扎马特在Ⅴ号培养基上得到了76%的发育率(p<0.05)和63.5%的成苗率(p<0.01)。然而，无核白却在花后50天胚培养效果最好，在Ⅶ号培养基上得到了44.0%的发育率(p<0.05)和31.9%的成苗率(p<0.01)。通过四倍体品种巨峰与二倍体品种里扎马特、无核白进行正反交，以获得大粒无核的叁倍体葡萄新品种。在杂交果实的早期（授粉后45~60天），通过胚珠培养技术挽救未败育的杂交胚，得到了叁个杂交组合的杂交苗42棵。其中扩繁了32棵，获得32个株系300多棵杂交苗。鉴定其根尖细胞染色体，染色体数为57条。试验证明，不同的杂交组合的胚败育时期和对激素水平的敏感程度差异很大。授粉后45~55天的巨×里在Ⅸ号培养基上得到了20%的成苗率；授粉后55天的里×巨的幼胚在Ⅴ号培养基上得到了20%的成苗率(p<0.01)；而授粉后55天的巨×无的幼胚在Ⅶ号培养基上得到了38.9%的成苗率(p<0.01)。本研究发现：90%以上的褐色胚为活胚，95%的鲜绿色的胚已败育。同时本试验研究证明在葡萄的叁倍体育种中，用四倍体品种作母本更容易获得杂种后代。低温和横切处理可有效地促进里扎马特和巨峰的幼胚的萌发，使它们的成苗率分别提高45和30个百分点(p<0.01)。
侯涛易[4]2012年在《父本对‘金田皇家无核’胚培养的影响及试管苗移栽技术探讨》文中指出本研究以晚熟葡萄品种‘金田皇家无核’为母本，早熟品种‘白鸡心无核’、中熟品种‘奇妙无核’、晚熟品种‘克瑞森无核’葡萄为父本进行了杂交试验。发育过程中调查了果实单果重、种子数及种子平均重。在授粉后40d~85d期间采用胚培养技术，进行了无核葡萄杂种培育和培养方法的研究。结果表明：1金田皇家无核自交胚初花期后85d取样发育最好。胚发育率、萌发率和成苗率分别达到55.78%、23.08%和11.54%。‘金田皇家无核’ב白鸡心无核’、‘金田皇家无核’ב奇妙无核’和‘金田皇家无核’ב克瑞森无核’胚挽救最适取样时期分别为授粉后70d、65d和80d，胚成苗率分别达到7.50%、7.69%和11.76%。2金田皇家无核自交、‘金田皇家无核’ב白鸡心无核’、‘金田皇家无核’ב奇妙无核’和‘金田皇家无核’ב克瑞森无核’较适合的胚挽救培养基分别为：改N+6-BA2.5mg·L~(-1)+IAA1.5mg·L~(-1)+AC0.5g·L~(-1)+Pro2.0mmol·L~(-1)，改N+6-BA2.5mg·L~(-1)+IAA1.5mg·L~(-1)+CH500mg· L~(-1)，改N+IBA2.0mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)+GA30.5mg·L~(-1)+AC1.5g·L~(-1)和改N+6-BA0.5mg·L~(-1)+IAA1.0mg·L~(-1)+AC0.5g·L~(-1)+CH500mg·L~(-1)。pH值为5.0的蔗糖固体培养基较适合金田皇家无核为母本的杂交材料进行胚挽救，培养环境应为25±1℃的光照培养（2000Lx）。3适合胚挽救苗继代的培养基是：添加蔗糖20g·L~(-1)或25g·L~(-1)的1/2MS+NAA0.1mg·L~(-1)。培养的幼苗株高适中、节间短、根数短而多，适宜移栽。4适合胚挽救壮苗的培养基是：MS+IBA0.02mg·L~(-1)+PP3331.0mg·L~(-1)或CCC1.5mg·L~(-1)。苗高分别达到3.43cm和1.72cm，茎粗分别达到1.25mm和0.92mm，十分适合用作试管苗嫁接使用。5.选用50d苗龄的健壮幼苗，并在移栽前进行适宜的温度、湿度锻炼，使其逐渐适应自然环境。在移栽时修剪根，将其移栽在2/5蛭石+3/5园土的基质中，可以获得较高的移栽成活率。
郝燕[5]2007年在《无核葡萄胚挽救育种及新种质创新研究》文中指出本研究以无核葡萄为试材,进行了14个无核葡萄的田间杂交,对无核葡萄胚发育动态和败育程度进行了观察研究,对无核葡萄杂交及实生幼果进行了胚挽救,研究了提高无核葡萄杂交座果率的方法及提高无核葡萄胚挽救效率的关键技术因素,完善了无核葡萄胚挽救技术体系,通过试验研究,结果如下:1无核葡萄田间杂交座果率研究改进完善了葡萄田间常规杂交育种技术,提出了提高葡萄田间杂交座果率的叁次授粉方法,在几年的葡萄新品种选育工作中进行了几种不同授粉方法的试验,结果表明,最佳的授粉方法为:去雄后第2d,第4d,第6d连续授叁次粉最好,红宝石无核×黑爱莫,金星无核×希姆劳特这两个组合授粉座果率增加至27.6%和35.7%,座果率平均增加了26%;不同无核葡萄品种间杂交座果率有明显的不同,其中以安艺无核为母本的组合杂交座果率较高,达到了56.1%。2无核葡萄胚发育动态及败育程度的研究对无核葡萄品种1124无核、火焰无核、百乐无核、京早晶、红宝石无核、金星无核进行胚珠发育动态研究。浆果内发育胚珠数随果实生育期的延长而减少,即胚珠的败育逐渐增强,不同无核葡萄品种胚珠败育势态有明显差异,从观察的品种来看,成熟早的品种胚珠产生败育的时间早、速度快,1124和京早晶胚珠败育最早,败育速度最快,且败育程度高,在果实成熟时,几乎无胚珠残留,火焰无核和百乐无核次之,而无核红宝石败育最晚,败育速度最慢,且败育程度低。早熟无核葡萄1124胚败育时期在后授粉后35d,火焰无核、百乐无核和京早晶胚败育时期在授粉后40d,晚熟品种红宝石无核胚败育时期在授粉后45d。3进行了无核葡萄胚挽救影响因素的研究通过试验研究了无核葡萄胚挽救技术过程中的影响因素,包括不同基因型无核葡萄品种的最佳的取种时间;胚挽救过程中胚发育阶段的最佳培养基及激素的筛选;不同添加物对胚珠发育的影响;胚萌发过程中的最佳培养基及激素的筛选;不同处理方式对胚萌发的影响等。经过研究结果表明:不同无核葡萄品种取种时期不同,其中早熟品种取种时期相对早些,晚熟品种取种时期相对晚些,大多数品种取种时期都在授粉后40d以后;胚发育阶段的最佳培养基是ER培养基,胚萌发阶段的最佳培养基是WP或MS/2培养基,继代培养基为改良MS/2、B5/2加适量的生长素;胚珠培养一段时间后,剥胚处理胚萌发率高且整齐,而胚珠直接培养出苗率低,且时间长,畸形苗较多;不同基因型无核葡萄品种胚挽救成功率不同,做胚挽救要选择假单性结实的葡萄品种做为母本;添加适量的物质对胚珠发育有一定的促进作用。4完善无核葡萄胚挽救操作程序无核葡萄胚挽救的技术操作流程为田间杂交,采用叁次授粉方法,授粉40d→从果实中取出胚珠,在ER培养基中培养60d→从发育的胚珠中剥取完整胚,接种到WP或MS/2胚萌发培养基中,进行胚萌发培养→将萌发且生长正常的杂种胚挽救苗在MS/2,B5/2加适量的生长素的继代基中培养,进行继代培养→将根叶正常的胚挽救苗进行温室移栽。
武书哲, 张娜, 田淑芬[6]2014年在《无核葡萄胚挽救技术研究进展》文中进行了进一步梳理本文介绍了国内外无核葡萄胚挽救育种进展。从亲本基因型、取样时期、培养基、处理方式等影响无核葡萄胚挽救技术的因素进行了综述,并对以后的无核葡萄胚挽救育种进行了展望。
苏家乐[7]2006年在《江南地区无核葡萄引种适应性、胚培养及优质栽培技术研究》文中研究指明葡萄属葡萄科(vitaceae)葡萄属(Vitis)植物，约有70个种，而用于栽培的则有20多种。葡萄鲜果具有味道鲜美、外观漂亮、营养丰富等特点，因而在水果市场中一直受到人们的青睐。无核葡萄具有食用方便、品质优良的特点，在发展无公害栽培的基础上，可连皮食用，无需去皮吐核，这样不仅能避免葡萄核的苦涩味对葡萄风味的影响，而且可将果皮中含有的预防心血管疾病和具有抗癌特性的白芦醇等物质充分吸收。本研究以无核葡萄为试材，研究了不同品种的适应性、无核葡萄胚珠培养成苗技术、GA_(4+7)、CPPU处理对无核葡萄果实生长发育的影响以及环剥、套袋对无核葡萄品质的影响。主要结果如下：1．江南地区无核葡萄引种评价研究通过对夏黑等15个无核葡萄品种物候期、生长结果习性、果实经济性状以及抗病性的观察比较，目前适宜南方种植的葡萄品种有夏黑，该品种抗病性较好、早中熟、着色易、均匀，只是果粒相对较小，需要结合激素的使用和环剥(割)等增大果粒技术。无核白鸡心、莫里莎无核、红脸无核等可在南方葡萄产区适当发展，但应加强田间肥水管理和枝蔓管理，增加通风透光，另外还需加强对病害的防治。2．无核葡萄胚珠培养成苗技术研究红宝石无核葡萄是一个假单性结实型品种，其胚珠相对较大，纵径可达3.48mm，为挽救其活力提供了先决条件。红宝石无核后代培养技术及程序应为：落花后35天(约授粉后42天左右)，取胚珠在培养基Nitsch+IAA2.0mg／L+GA0.4mg／L+水解酪蛋白100mg／L+蔗糖20g／L+活性炭2g／L上进行发育培养，120天后将胚珠切开，转移到培养基1／2MS+6-BA 0.5mg／L上萌发，待其萌发15天后转移到1／2MS+IBA0.2mg／L的培养基上成苗生长，约30天后长成3～5茎节，4～5条根幼蔓后进行驯化移栽，1个月后移栽大田，按常规进行管理。3．GA_(4+7)、CPPU处理对无核葡萄果实生长发育的影响GA_(4+7)、CPPU均能促进森田尼无核葡萄果实增大，同时增加了葡萄的果柄直径、穗柄粗度，减轻落果率、裂果率。GA_(4+7)能提早无核葡萄成熟、而CPPU处理则延迟果实成熟，GA_(4+7)+CPPU则与原来的成熟期接近，据此在生产上可根据市场需要确定处理方式。4．环剥对无核葡萄品质的影响森田尼无核葡萄花后20d主蔓环剥和花后30d结果枝环剥，能明显增大果粒、促进着色和可溶性固形物含量。5．套袋对无核葡萄果实商品品质的影响对葡萄实行果穗套袋，不但没有减少穗重、粒重，还可显着减少因黑痘病、白腐病、炭疽病等引起的烂果。对于果实着色程度和可溶性固形物受到影响，可试着采用成熟前进行补光的技术来处理。套袋时间以谢花后10～15天为好。
田莉莉[8]2007年在《抗病无核葡萄胚挽救育种及种质创新》文中研究说明无核葡萄无论用于鲜食和制干,深受全世界消费者的青睐,由于无核葡萄的胚受精后通常在发育过程中败育,传统的育种方法通常只能采用“有核×无核”方式进行杂交,选育一个品种至少需要10年时间。目前借助胚挽救技术,可以直接采用无核葡萄作母本,可缩短育种周期1个世代并能有效提高后代无核百分率。由于欧洲葡萄多数不抗真菌病害,为了培育抗病、优质的无核葡萄新品种,国外借助胚挽救技术将圆叶葡萄的抗病基因渗入感病的无核品种的研究已有报道,但亚属间染色体组的差异(圆叶葡萄2n=40;欧洲葡萄2n=38)导致的杂交不亲和极大地限制了育种效率的提高。我国是葡萄属植物的重要原产地之一,拥有丰富的抗病种质资源,与欧亚种葡萄进行杂交容易亲和。因此,开发和利用这些材料中优异的抗病基因,借助胚挽救技术结合欧洲葡萄中的无核与优良品质基因,是进行抗病无核葡萄育种和种质创新的一条有效途径。本研究主要以种子败育型无核葡萄和抗病性强的中国野生葡萄及其杂种进行杂交,对14个人工杂交、4个自交和2个自然授粉(共计20个组合)的材料胚挽救育种全过程及其影响因子进行了比较系统地研究,获得了比较适宜的培养基类型和育种效率的极大提高。在此基础上,进一步优化了集田间杂交、胚挽救技术和分子标记辅助选择于一体的抗病无核葡萄高效育种技术体系中各项技术参数,目前该技术体系应用于在“无核×抗病”杂交组合中,胚挽救成苗率最高可达65%以上。取得的主要研究结果如下:1.通过研究不同亲本杂交组合对胚挽救的影响,认为母本品种的可挽救性对胚挽救成败起着决定作用,无核品种中“底来特”、“爱莫无核”、“红宝石无核”是非常优良的母本材料;而“无核紫”、“无核白”、“杨格尔”成苗率较低,不宜用作母本;父本品种对胚挽救效率也有一定影响,在以“红宝石无核”作母本时,“紫霞”作父本明显优于“新郁”;“火焰无核”自交成苗率出现下降,可能与母本基因型有关。2.通过研究胚珠内胚培养阶段基本培养基类型、培养基形态、pH值、碳源、半胱氨酸、水解酪蛋白以及活性炭对胚挽救的影响,初步认为胚珠培养阶段以ER固-液双相培养基胚挽救效果最佳,显着优于NN和MS培养基;培养基pH值在5.0-7.0之间对胚的发育和成苗并无显着影响;培养基碳源以蔗糖效果最好,显着优于葡萄糖和果糖;半胱氨酸浓度不宜过高,以1.0 mmol l-1培养效果最佳;水解酪蛋白以500 mg l-1为宜;添加活性炭的用量则以1.5 g l-1为宜。在此基础上,结合矿质元素用量和配比的调整,提出了一种适于抗病无核葡萄育种的新型改良培养基配方(MM4,专利申请号200610043024.0)。3.通过研究改良培养基(MM4)中微量元素、氨基酸、植物生长调节物质和抗氧化物质等不同添加物对胚挽救的影响,认为胚珠内胚培养阶段培养基添加物的作用在不同组合间存在差异。对于“无核×抗病”的杂交组合而言,选择10.0μmol l-1的微量元素锌胚挽救效果优于0.5μmol l-1的硒;氨基酸类物质以添加2.0mmol l-1甘氨酸或谷氨酰胺为宜;植物生长调节物质以选择较低浓度的ABA(0.01μmol l-1)为宜;培养基中添加100 mmol l-1甘露醇,对胚的发育和成苗具有促进作用。其中,胚珠培养最适宜的培养基组分为MM4+0.01μmol l-1 ABA,在组合“底来特×北醇”上胚挽救成苗率最高可达65.3%。4.通过对离体幼胚萌发成苗过程的观察,发现并非所有的胚萌发后都能成苗,畸形苗的形成数量主要受到杂交组合中母本品种基因型和培养基的影响,“红宝石无核”和“爱莫无核”比“底来特”和“00-3-1”容易形成畸形苗,畸形苗比例最高占萌发胚的22.3%;胚发育培养基中添加赤霉素、吲哚乙酸、腐胺等外源生长调节物质显着增加畸形苗数量,而添加一定比例的微量元素锌或硒可以减少畸形苗的发生;接种前进行一定时间的低温处理(4℃-20d)或在培养基中添加一定比例的微量元素锌,在促进胚发育的同时可以有效减少畸形苗的发生,提高成苗效率;不同胚萌发培养基对畸形苗比例也有影响,WPM+1.0μM 6-BA比1/2MS+0.5μmol l-1 IBA胚萌发率高,同时也容易发生畸形苗;胚珠内培养时间在8～12周之间对畸形苗百分率无显着影响。5.通过使用化学物质体外处理,并结合胚挽救培养基和采样时期等技术参数的优化设置,提高了无核葡萄育种效率。使用10.0 mmol l-1的腐胺授粉后6周进行果面喷布,可有效延迟胚败育的发生。在组合“爱莫无核×北醇”上,结合采用MM4+10.0μmol l-1ZnSO4培养基进行胚珠内胚培养,成苗率最高可达44.7%。在此基础上,提出了“田间杂交—化学物质处理—胚挽救”相结合的育种思路。试验过程中还发现,多胚发生频率同时受到基因型和化学物质处理的影响,“底来特”比“00-3-1”容易形成多胚,使用1.0×104μmmol l-1的腐胺处理后,在ER培养基上组合“底来特×北醇”多胚胚珠百分率最高可达22.0%。6.通过对胚挽救幼苗移栽技术的研究,提出了配套的温室移栽技术措施:用于移栽的适宜基质配比为珍珠岩:草炭:园土=4:1:1,用普通方法移栽成活率可达90%;移栽之前需要对基质进行高压灭菌(121℃,30min);用于移栽的试管苗以离体培养40天效果最佳;移栽后采用1/16MS营养液连续浇灌盆栽效果较好;同时发现,有抗病亲本介入的组合杂种幼苗容易移栽成活。幼苗在温室内锻炼2-3个月,即可顺利进入大田。7.通过对胚挽救获得的部分杂种后代的抗病无核性状进行了田间和分子生物学早期鉴定,认为中国野生葡萄中存在抗病的主效基因,与感病的欧洲无核葡萄杂交后可以遗传给后代,借助胚挽救技术可以创建无核抗病新材料;不同杂交组合F1代无核百分率表现为13.3~33.3%;组合“红无籽露×1-9-6”中抗病植株占检测后代总数的46.7%。从而有效地提高了抗病无核葡萄胚挽救育种效率,实现了无核葡萄的种质创新与遗传改良。
石艳[9]2008年在《胚挽救技术创制无核及多倍体葡萄新种质》文中认为无核葡萄是当前国际葡萄生产和消费的重要发展方向和趋势,而获得大粒优质并具有抗病性的品种一直以来是育种专家的目标。但无核葡萄的胚受精后常常在发育过程中败育,而传统的育种方法通常只能采用“有核×无核”方式进行杂交,育种周期长。目前借助胚挽救技术,直接采用无核葡萄作母本,可缩短育种周期并能有效提高杂种后代无核百分率。由于欧洲葡萄多数不抗真菌病害,而我国拥有丰富的野生葡萄抗病种质资源,并且比圆叶葡萄与欧亚种葡萄进行杂交具有更大的亲和性,因此,借助胚挽救技术结合欧洲葡萄中的无核等优良品质基因与我国野生葡萄特有的抗病基因,进行无核抗病葡萄育种和种质创新是一条有效的途径。此外,叁倍体葡萄除具有多倍体植株的诸多优越性外,其果实无核或少核,因此利用叁倍体的高度不育性可以开拓培育大粒无核葡萄新品种的途径。本研究采用胚挽救技术,主要进行了以欧洲种子败育型无核葡萄品种和抗病种质中国野生葡萄及其杂种为亲本的无核葡萄育种,以欧洲种子败育型无核葡萄品种、欧美杂种四倍体品种和我国特有的抗病种质山欧杂种北醇为亲本的多倍体葡萄育种,以及对胚挽救育种过程中影响因素的研究。在已有的工作基础上,进一步优化无核抗病葡萄育种体系,并获得了融常规杂交技术、胚挽救育种技术、流式细胞术和去壁低渗法染色体计数于一体的多倍体葡萄聚合育种技术体系。取得的主要研究结果如下:1.通过对胚挽救过程中激素添加、低温处理、抗氧化效果及不同倍性亲本的亲和性等影响因素的研究,初步认为胚珠培养阶段添加生长素IAA能明显提高胚萌发率,影响效果优于IBA,且IAA浓度1.5mg/L优于0.75mg/L;胚珠接种前对果穗5-8℃低温处理30天能够提高胚萌发率,并且明显优于接种后对胚珠5-8℃低温处理30天的效果;维生素C的抗氧化效果明显不及活性炭;不同倍性亲本的亲和性大小顺序为:四倍体有核×二倍体有核>二倍体无核×二倍体有核>二倍体无核×四倍体有核。2.以欧洲无核葡萄品种为母本,中国野生葡萄为父本,采用胚挽救技术进行了无核葡萄共9个杂交组合和3个自交组合的培养,获得无核葡萄胚挽救幼苗106株。利用无核基因特异SCAR标记对无核白×北醇及其11株杂交后代,底来特×雪峰及其10株杂交后代、红宝石×双优及其21株杂交后代共42株杂种幼苗的无核性进行早期检测,结果23株拥有该无核标记,无核率达54.8%,显着高于传统的育种方法。3.以欧洲葡萄无核品种红宝石无核、爱莫无核、黎明无核、底莱特、大粒红无核,山欧杂种北醇及欧美杂种四倍体品种藤稔、黑奥林为亲本,进行了7个组合的杂交,通过胚挽救技术培养获得杂种幼苗42株。采用流式细胞术和染色体计数对所得杂种后代进行了早期的倍性鉴定,有11株幼苗为叁倍体,6株为四倍体,4株为非整倍体,为无核葡萄育种提供了新的种质,并获得了一种多倍体葡萄聚合育种技术体系。4.结合本课题组关于胚挽救幼苗移栽技术体系的研究,对7个组合的176株胚挽救幼苗进行移栽,共成活154株,平均成活率可达到87.5%。
张剑侠, 牛茹萱[10]2013年在《无核葡萄胚挽救技术的研究现状与展望》文中研究表明综合分析国内外相关文献及作者以往的研究经验,阐述了无核葡萄胚挽救技术的研究现状,讨论了影响无核葡萄胚挽救成功的主要因素,包括亲本选择、取样时期、花期喷施生长调节剂、培养基、外源激素种类与浓度等,并对胚挽救技术在无核葡萄育种上的发展进行了展望。
参考文献：
[1]. 无核抗病葡萄胚挽救技术体系优化及新品系培育[D]. 潘学军. 西北农林科技大学. 2005
[2]. 无核葡萄胚挽救育种技术及种质创建[D]. 唐冬梅. 西北农林科技大学. 2005
[3]. 葡萄的胚珠培养与叁倍体葡萄育种技术的研究[D]. 刘海琳. 新疆农业大学. 2003
[4]. 父本对‘金田皇家无核’胚培养的影响及试管苗移栽技术探讨[D]. 侯涛易. 河北科技师范学院. 2012
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