卵细胞体外成熟(IVM)在小鼠生物净化中的应用

论文摘要

目的在小鼠生物净化中,从超排后未排卵的卵巢,取卵泡内未成熟卵采用卵母细胞体外成熟（in vitro maturation,IVM）使之在体外成熟并具备受精能力,以提高卵子利用率和作为常规促超排失败的一种补救措施。方法在小鼠生物净化中,取注射PMSG和HCG后未排卵卵巢,在实体显微镜下划破卵泡挑选卵丘卵母细胞复合物（COCs）,置于成熟液滴中在体外发育成熟。同时以注射PMSG和HCG后正常超排卵、只注射PMSG后取未成熟卵体外成熟和注射PMSG和HCG后取疑似成熟卵和裸卵体外成熟作为对照。经体外受精、体外胚胎发育后,将2-细胞胚移植到受体输卵管,使其在受体内发育成为成熟的个体。结果注射PMSG和HCG后未排卵组（A组）,卵细胞体外成熟率为87.0%±3.2%,二胞率为55.1%±12.3%,囊胚率为23.1%,移植41枚二细胞胚至2只受体鼠,出生5只幼崽,产仔率12.2%。只注射PMSG,48 h后取未成熟卵组（B组）,体外成熟率为83.9%±3.9%,二胞率为51.8%±9.3%,囊胚率为38.5%±13.9%。注射PMSG和HCG正常超排组（C组）,其二胞率为78.9%±0.6%,囊胚率为78.0%±3.8%。注射PMSG和HCG未排卵卵巢,取裸卵和疑似成熟卵（D组）,体外成熟培养0 h,6 h和16～18 h,其成熟率、二胞率和囊胚率与其它三组相比均较低且有极显著性差异。A组和B组与正常对照C组相比,二胞率均有显著性差异,囊胚率均有极显著性差异。结论卵母细胞体外成熟（IVM）可以作为小鼠生物净化中促超排失败的一种补救措施,并且可以提高珍稀品系小鼠的卵子利用率。

论文目录

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂

1.2 实验动物

1.3 结扎公鼠的制备

1.4 小鼠超排

1.5 培养基准备

1.6 精子获能、体外受精与未成熟卵IVM

1.6.1 精子获能:

1.6.2 体外受精:

1.6.3 未成熟卵IVM:

1.7 受体小鼠的挑选、合笼与胚胎移植

2 结果

2.1 A组和B组与C组卵细胞体外成熟率、二胞率、囊胚率及出生率

2.2 D组不同成熟培养时间卵细胞体外成熟率、二胞率及囊胚率

3 讨论

3.1 超数排卵

3.2 卵母细胞体外成熟

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杜江涛,武晓静,戴方伟,卢领群,周莎桑,应华忠,郭红刚

关键词: 小鼠,卵母细胞,体外成熟,生物净化

来源: 实验动物科学 2019年03期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 浙江省医学科学院浙江省实验动物中心,杭州市中医院

基金: 浙江省医药卫生科技计划项目(No.2015KYB093,No.2017KY037),浙江省公益技术应用研究(实验动物)项目(No.2016C37134)

分类号: Q95-33;R-332

页码: 53-57

总页数: 5

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