（暨南大学附属顺德医院<顺德区第二人民医院>检验科广东佛山528300）
【摘要】目的：检测慢性丙肝患者血清IL-35和IL-17A水平,研究IL-35在慢性HCV感染患者体内的免疫调节作用。方法：用ELISA法检测30例健康体检者和60例慢性丙肝患者的血清IL-35水平,并对慢性丙肝患者有肝硬化组和无肝硬化组的IL-35水平进行对比分析,同时观察IL-35与IL-17A有无相关性。结果：慢性丙型肝炎患者血清IL-35水平36.77（24.46～85.32）pg/ml，高于健康对照组21.74（17.98～37.75）pg/ml，其中有肝硬化组血清IL-35水平41.05（29.69～85.32）pg/ml高于无肝硬化组32.5（24.46～68.05）pg/ml。结论：慢性丙型肝炎患者血清中IL-35水平升高,而有肝硬化患者又高于无肝硬化患者，提示IL-35可能对慢性丙型肝炎患者存在免疫调节作用，且与疾病进展呈正相关，而与IL-17A则呈负相关。
【关键词】慢性丙型肝炎；白细胞介素-35；免疫调节
【中图分类号】R512.63【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）34-0090-02
丙型病毒性肝炎是丙型肝炎病毒（HCV）感染所引起的疾病，常呈慢性化，甚至进展为肝硬化和肝细胞癌。目前对能够生产HCV中和抗体的抗原决定簇尚不十分清楚，迄今为止还没有有效疫苗可以预防HCV感染。因此，对丙型肝炎病毒感染及其免疫机制的研究是学术界的重点课题之一。
IL-35是一种具有重要价值的新型免疫调节和抗炎因子，在T细胞增殖活化方面发挥重要的调节作用，它是Treg细胞发挥免疫负调节作用的主要细胞因子之一，具有诱导Treg细胞增殖的功能[1]。IL-17是由Th17细胞产生的促炎症因子，它可以放大炎症反应，其中最具有代表性的是IL-17A。IL-35能够抑制T细胞增殖效应，又能抑制Th17细胞产生IL-17，明显降低炎症反应，是诱导感染性免疫耐受的关键细胞因子。总之，IL-35被认为广泛参与了体内的免疫应答过程，它的发现为免疫学在急慢性感染研究方面带来新的方向。
本研究拟观察慢性丙型肝炎无肝硬化患者、合并肝硬化患者、健康人群血清中细胞因子IL-35和IL-17A表达水平的变化，探讨IL-35在慢性HCV感染者疾病进程中的免疫调节作用，为慢性丙型肝炎的免疫干预提供新的靶点。
1.对象与方法
1.1一般资料
随机选择中南大学湘雅医院感染病科和顺德区第二人民医院2015年7月至11月确诊的60例慢性丙型肝炎患者作为实验组，选择同期在体检中心进行体检的30例健康志愿者作为对照组。又根据有无肝硬化，将实验组分为肝硬化组30例和肝炎组30例。诊断符合我国《丙型肝炎防治指南》的标准，并排除合并其它类型肝病的患者。实验组及对照组的基本临床资料经查阅门诊或住院病历以及电话随访询问获得。
1.2方法
所有入组人员均在清晨空腹用分离胶管无菌抽取静脉血约5ml，然后用全自动脱帽离心机离心5min（3000～4000r/min），提取上层血清分装到EP管中，置于-20℃冰箱中保存，备用。对两组研究对象的肝功能、血清HCV-RNA载量和血清细胞因子水平进行检测。检测血清IL-35和IL-17A用ELISA法。
经统计学处理，实验组与对照组、肝炎组与肝硬化组在性别组成比例、年龄方面无显著性差异（P＞0.05）。
1.3统计学处理
选择SPSS20.0统计学软件，测定结果用均值表示。采用独立样本t检验、卡方检验和相关性分析进行比较不同组间的年龄组成、性别比例、血清IL-35和IL-17A水平等。以P＜0.05为两者差异显著，有统计学意义。利用EXCEL、SPSS软件制作图表。
2.结果
2.1不同组间血清IL-35和IL-17A水平的对比
血清IL-35实验组比对照组显著升高，IL-17A实验组比对照组显著降低，差异有统计学意义（P＜0.01），结果见表1。
图2肝炎组IL-17A与IL-35的相关性分析
3.讨论
慢性丙型肝炎的发病机制非常复杂，Treg/Th17细胞平衡在HCV感染中的免疫调节在发展及预后中起着非常重要的作用，IL-35的免疫抑制作用使Th17细胞亚群的分化受到影响，但IL-35可以促进Treg细胞的分化而在感染过程中发挥重要作用[1]，而IL-17A会激活多种可以导致肝损伤的免疫细胞释放炎症介质，加速疾病的发展进程[2-3]。
本研究发现，慢性丙肝患者IL-35水平明显高于健康对照组（P＜0.01），而丙肝肝硬化患者IL-35水平明显高于无肝硬化患者（P＜0.01），可能是由于在慢性HCV感染中，免疫系统通过提高IL-35水平来诱导产生更多的免疫调节因子，从而加强免疫抑制效果，使肝脏免疫细胞与HCV之间保持平衡。
分别比较肝硬化组的IL-17A与IL-35，发现两者呈负相关关系，肝炎组也类似。可能是因为在慢性HCV感染中，IL-17A通过激活多种可以导致肝损伤的免疫细胞释放出炎症介质而加重炎症，而IL-35可通过抑制Th17的分化，减少IL-17A的生成，导致IL-17A水平降低，与IL-35呈负相关关系。
以上结果说明，IL-35及IL-17A在慢性丙型肝炎的发病机制及病情发展过程中可能起着重要作用，而慢性HCV感染者IL-17A与IL-35呈明显负相关关系，IL-35可能对HCV感染患者的Th17细胞调节起着一定作用。
【参考文献】
[1]NiedbalaW,WeiX.Q,CaiB,etal.IL-35isanovelcytokinewiththerapeuticeffectsagainstcollagen-inducedarthritisthroughtheexpansionofregulatoryTcellsandsuppressionofTh17cells[J].EurJImmunol,2007,37(11):3021-9.
[2]ZhangJY,ZhangZ,LinF,etal.Interleukin-17-producingCD4+TcellsincreasewithseverityofliverdamageinpatientswithchronichepatitisB[J].Hepatology,2010,51(1):81-91.
[3]陈曦,朱波,陈正堂.IL17/IL-17R与恶性肿瘤[J],免疫学杂志,2010,26(4):366-369.