导读:本文包含了脂肪细胞增殖论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肌肉生长抑制素(MSTN),猪前体脂肪细胞,增殖,成脂分化
脂肪细胞增殖论文文献综述
张琳,伏智亮,邢华,王珏,潘士锋[1]（2019）在《肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响》一文中研究指出为探讨肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,本研究以原代培养的断奶猪前体脂肪细胞为研究对象,分别以0 ng/mL(对照组)、25、50和100 ng/mL的MSTN重组蛋白处理细胞,采用油红O染色和提取法定量分析细胞内脂肪生成和成脂分化程度,使用荧光定量PCR和Western blot分析脂肪细胞分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、脂肪合成关键酶脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的表达,探讨MSTN调控猪前体脂肪细胞成脂分化可能的分子机制。结果显示,处理48 h后,与对照组细胞相比,25和50 ng/mL MSTN处理对细胞增殖活力无显着影响,而100 ng/mL MSTN可显着提高猪前体脂肪细胞增殖活力。油红O染色及提取结果表明,MSTN呈剂量依赖性抑制猪前体脂肪细胞的成脂分化。进一步研究表明,与0 ng/mL MSTN组细胞相比,100 ng/mL MSTN处理组细胞中MSTN表达量显着升高,而PPAR-γ、FAS和ACC的mRNA和蛋白表达均显着降低。研究表明,MSTN抑制猪前体脂肪细胞的成脂分化,效果呈剂量依赖性,此抑制作用可能是通过抑制PPAR-γ的表达,进而抑制脂肪的合成来实现的。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2019年11期）
王丹丹,程佩,孙文星,徐广飞[2]（2019）在《白藜芦醇抑制人内脏前脂肪细胞增殖和分化》一文中研究指出目的本试验研究白藜芦醇对人内脏前脂肪细胞细胞活力和细胞周期的影响;白藜芦醇对人内脏前脂肪细胞分化和脂质沉积的影响,以及对脂肪分化关键基因表达的影响。方法用白藜芦醇(0,5,10,20,50 mM)干预人内脏前脂肪细胞(HPA-v),在0、24、48、72 h通过MTT试验检测白藜芦醇对细胞活力的影响;用白藜芦醇(0,5,10,20,50mM)干预HPA-v细胞24 h,通过流式细胞技术分析白藜芦醇对HPA-v细胞周期的影响;用地塞米松、胰岛素、3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤诱导HPA-v向脂肪细胞分化,在分化过程中用不同浓度的白藜芦醇(0,5,10,20,50 mM)进行干预,通过油红O染色检测白藜芦醇对脂肪分化和脂质沉积的影响,通过RT-PCR检测白藜芦醇对脂肪分化关键基因PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3表达的影响。结果 (1)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制HPA-v的细胞活力,10、20、50 mM的白藜芦醇干预72 h可显着抑制HPA-v的细胞活力;(2)20、50 mM的白藜芦醇干预24 h,可显着增加S期HPA-v的细胞比例,显着降低G0-G1和G2-M期的细胞比例;(3)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制HPA-v的成脂分化,20、50 mM的白藜芦醇可以显着减少脂肪细胞中脂质的沉积;(4)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的mRNA表达,10、20、50 mM的白藜芦醇可以显着抑制PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的mRNA表达。结论白藜芦醇抑制HPA-v的细胞活力,增加S期HPA-v的细胞比例,抑制细胞增殖;白藜芦醇抑制HPA-v成脂分化,减少脂质沉积;白藜芦醇抑制脂肪分化与PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的表达下调相关。(本文来源于《营养研究与临床实践——第十四届全国营养科学大会暨第十一届亚太临床营养大会、第二届全球华人营养科学家大会论文摘要汇编》期刊2019-09-20）
陈涛,马立霞,李志鑫,耿进红,曾勇庆[3]（2019）在《miR-331-3p对猪前体脂肪细胞增殖、分化与脂肪酸积累的调控》一文中研究指出引言动物脂肪的沉积量实际上是其体内脂质合成和分解代谢相互作用的结果。哺乳动物脂肪组织主要沉积于皮下、内脏、肌肉组织间和肌肉组织内。肌内脂肪前体细胞的增殖分化可以影响细胞数量和体积,直接影响肌内脂肪含量,从而影响肉质,比如,肌内脂肪的含量与肉的风味、嫩度、多汁性和大理石纹等优良肉质性状正相关。本研究以莱芜猪和大白猪为研究对象,通过前期转录组测序分析发现了调控脂肪沉积的miRNA~([1])。材料与方法1日龄仔猪3头,将其解剖后取莱芜猪背最长肌(longissimus dorsi,LD)分离肌内脂肪前体细胞;(本文来源于《第叁届中国猪业科技大会暨中国畜牧兽医学会2019年学术年会论文集》期刊2019-09-19）
胡婷婷,巩雪俐,高佳乐,徐尤宗盛,孟轩羽[4]（2019）在《双链RNA结合蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡作用》一文中研究指出目的探究双链RNA结果蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡的影响。方法以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,将pCMV6-Entry STAU1真核表达质粒,通过脂质体转染3T3-L1前脂肪细胞(实验组),对照组转染pCMV6-Entry空载体。分别利用RTq-PCR和Western blot检测stau1、caspase3、caspase9、cyclinD1、cyclinE1 mRNA及蛋白质的表达水平;对照组和实验组采用CCK-8细胞计数法及Annexin V-FITC/PI双染法检测STAU1对细胞数量及凋亡情况的影响。结果 (1)与对照组比较,实验组stau1、caspase3、caspase9 mRNA和蛋白质的表达水平均显着上升(P<0.05),cyclinE1 mRNA和蛋白质的表达水平显着下降,差异具有统计学意义(P<0.05),cyclinD1 mRNA表达水平降低而蛋白质表达水平无明显变化。(2)与对照组相比,实验组细胞数量显着减少,凋亡率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 STAU1可能通过下调cyclinE1的表达抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖;通过上调caspase3、caspase9的表达水平促进细胞凋亡。(本文来源于《新疆医科大学学报》期刊2019年09期）
李德鹏,耿晓晖,高月锋,王尚尚,富俊才[5]（2019）在《葡萄籽原花青素对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响》一文中研究指出试验旨在研究葡萄籽原花青素(Grape Seed Proanthocyanidin Extract,GSPE)对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响。选择1月龄健康小尾寒羊公羔羊,屠宰后取腹股沟白色脂肪组织。分离绵羊前脂肪细胞,并进行原代体外培养。诱导分化后,进行油红O的染色鉴定。将传代培养后的绵羊前脂肪细胞随机分成6个处理组,每个处理组3个重复,培养基内添加不同浓度GSPE(0、6.25×10~1、1.25×10~2、2.5×10~2、5×10~2、1×10~3ng/mL)。培养结束后,用CCK-8法测定GSPE对绵羊前脂肪细胞增殖的影响。绵羊前脂肪细胞由诱导分化培养基和分化培养基处理后,再用含不同浓度GSPE(0、6.25×10~1、1.25×10~2、2.5×10~2、5×10~2、1×10~3ng/mL)的培养基培养。培养结束后,测定甘油叁磷酸脱氢酶(G3PDH)、脂肪酸合成酶(FAS)以及FASmRNA、激素敏感脂肪酶mRNA(HSLmRNA)。结果表明:不同浓度的GSPE具有促前脂肪细胞增殖的作用,且有明显的时间和浓度效应;在分化试验中,与对照组相比,不同浓度的GSPE能明显抑制TG合成,但在诱导分化第8天,仅6.25×10~1、1.25×10~2 ng/mL的GSPE对TG的合成有抑制作用;在诱导分化后期,GSPE降低了脂肪沉积过程中关键酶G3PDH、FAS的活性,对FAS mRNA的表达无明显影响(P>0.05),显着降低HSL mRNA的表达(P<0.01),并且GSPE是通过同时作用脂类生成与脂解来抑制脂肪沉积。(本文来源于《现代畜牧兽医》期刊2019年08期）
崔忆馨[6]（2019）在《姜黄素对猪和小鼠前体脂肪细胞增殖和成脂分化的作用研究》一文中研究指出近年来,随着人们对食品安全及生态环境的关注度不断提高,抗生素残留和细菌耐药性等问题也逐渐暴露出来,抗生素的禁用将会是畜牧兽医行业发展的必然趋势。因此,寻求开发绿色、安全的替代抗生素的饲料添加剂刻不容缓。姜黄素(Curcumin,Cur)是从中药姜黄中提取的一种酚类物质,作为一种多效的天然活性成分,姜黄素有希望取代抗生素,在畜禽“无抗养殖”中发挥重要作用。虽然长期以来姜黄素作为一种常用的天然色素,已被广泛地应用在食品工业中,但其在畜牧兽医生产中的应用性研究相对较少,尤其是在减少畜禽脂肪沉积效果方面的研究更少。本研究以原代培养的猪前体脂肪细胞和小鼠3T3-L1前体脂肪细胞系为体外模型,探讨姜黄素对脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,并以高脂日粮诱导的C57BL/6J肥胖小鼠为体内模型,深入探讨姜黄素对小鼠脂肪沉积的调控作用及对高脂饮食诱导小鼠肥胖的抑制效果。研究结果将为姜黄素作为安全、有效的饲料添加剂在畜牧兽医生产上的应用提供科学依据。实验一、姜黄素对小鼠3T3-L1前体脂肪细胞增殖和成脂分化的作用研究将小鼠3T3-L1前体脂肪细胞进行增殖培养,待细胞达到80%-90%融合时,利用含终浓度为 0.1 mmol/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX),2.5 μμmol/L地塞米松(DEX),1 μg/mL胰岛素(Insulin)和2 μmol/L罗格列酮的诱导分化液I对细胞进行诱导分化,同时添加不同浓度姜黄素处理,共分为6组:①未诱导分化组(None,完全培养基);②诱导分化对照组(DM,诱导分化液+姜黄素溶解试剂DMSO);③诱导分化液+2.5 μμmol/L姜黄素组(DM+2.5μmol/LCur);④诱导分化液+5μmol/L 姜黄素组(DM+5μmol/LCur);⑤诱导分化液+10 μmol/L姜黄素组(DM+10 μmol/L Cur);⑥诱导分化液+15 μmol/L姜黄素组(DM+15 μmol/L Cur);3天后,更换只含有1 μg/mL Insulin的诱导分化液II进行处理,2天换液一次,6天后(共处理9天)在显微镜下观察细胞成脂分化情况,采用CCK法检测细胞增殖活力,通过油红O染色和甘油叁酯(TG)定量试剂盒检测细胞内TG含量,通过甘油含量测定试剂盒和小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA检测试剂盒测定细胞上清中甘油和FFA的含量,通过以上指标综合评价姜黄素对小鼠3T3-L1前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响。此外,通过荧光定量PCR(q-PCR)法进一步检测姜黄素对3T3-L1细胞成脂分化相关基因表达的影响,初步阐明姜黄素影响3T3-L1细胞成脂分化的可能机制。研究结果显示,与DM组相比,2.5、5、10、15 μmol/L姜黄素处理对细胞活力无显着影响,而20 μmol/L姜黄素处理能显着抑制细胞增殖活力。显微镜下观察发现,与DM组相比,2.5、5、10、15μmol/L姜黄素处理组细胞脂滴沉积量显着降低,油红O染色结果表明,与DM组相比,姜黄素处理组红染阳性细胞明显减少,TG沉积量显着下降,并且呈剂量依赖性抑制作用;此外,姜黄素处理组细胞上清中甘油和FFA释放量也呈剂量依赖性抑制作用。以上结果表明,姜黄素处理能在一定程度上抑制3T3-L1前体脂肪细胞的增殖和成脂分化,呈剂量依赖性。q-PCR的结果显示,姜黄素处理能显着抑制脂肪细胞分化关键转录因子C/EBP-α、PPAR-γ和C/EBP-β,脂肪合成标志基因FAS、SCD和aP2的mRNA表达,并显着增加脂肪分解标志基因ATGL mRNA表达。以上结果说明姜黄素抑制3T3-L1细胞脂质沉积,一方面与抑制成脂分化、减少脂肪合成有关外,另一方面还可能与脂肪分解的增强有关。实验二、姜黄素对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的作用研究分离断奶仔猪颈、背部皮下脂肪组织,采用Ⅰ型胶原酶分离前体脂肪细胞,细胞达到80%-90%融合时,使用含终浓度为 0.1 mmol/LIBMX,2.5μμmol/LDEX,1μg/mLInsulin 和2 μmol/L罗格列酮的诱导分化液进行成脂分化诱导,并同时添加姜黄素处理,根据姜黄素浓度的不同,共分为5组:①诱导分化对照组(DM,诱导分化液+DMSO);②诱导分化液+2.5μmol/L姜黄素组(DM+2.5μmol/LCur);③诱导分化液+5 μmol/L姜黄素组(DM+5 μmol/L Cur);④诱导分化液+10 μmol/L姜黄素组(DM+10 μmol/L Cur);⑤诱导分化液+15 μmol/L姜黄素组(DM-+15 μmol/LCur);利用CCK法检测细胞增殖活力,通过油红O染色法检测细胞内TG含量,采用q-PCR方法检测脂肪细胞分化关键基因PPAR-γ和C/EBP-β、脂肪合成关键酶FAS和ACC以及脂肪分解限速酶HSL,ATGL和LPL的mRNA表达。应用酶化学法测定细胞内脂肪分解酶的酶活。CCK检测结果显示,与DM对照组细胞相比,2.5、5、10 μmol/L姜黄素处理48 h和72 h对原代培养的猪前体脂肪细胞增殖活力无显着影响,但20 μmol/L姜黄素处理48 h和72 h均显着抑制了细胞的增殖活力。油红O染色结果表明,与DM组细胞相比,10μmol/L姜黄素处理48 h和72 h极显着降低了细胞内TG含量。显微镜下观察也发现,与DM对照组细胞相比,10 μmol/L姜黄素处理组细胞脂滴沉积量明显减少,表明姜黄素对猪前体脂肪细胞的增殖和成脂分化也有一定的抑制作用,并且呈剂量、时间依赖性。q-PCR的结果表明,与DM组细胞相比,10μmol/L姜黄素处理能显着降低脂肪分化成脂过程中两个重要转录因子PPAR-γ和C/EBP-β的mRNA表达,此外,脂肪合成过程中两个重要的合成酶ACC和FAS的mRNA表达也显着下降;另外,姜黄素处理能显着升高脂肪分解限速酶HSL和ATGL的mRNA表达量和酶活。此外,10 μmol/L姜黄素处理能显着增加自噬标志基因LC3和溶酶体酸性脂肪酶LIPA的mRNA表达,并能显着增加LC3蛋白的表达及LC3II/LC3I的比值。以上结果表明,姜黄素抑制猪前体脂肪细胞的成脂分化可能与脂肪合成的抑制及脂肪分解的增强有关,还可能跟自噬激活机制有关。实验叁、日粮中添加姜黄素对高脂日粮诱导的C57BL/6J肥胖小鼠模型脂肪沉积的影响选取60只饲养环境、遗传背景等相似的C57BL/6J雄性小鼠(4周龄,15-17 g),随机均分成5组,分别饲喂标准日粮(Normaldiet,ND)、高脂日粮(Highfatdiet,HFD)、高脂日粮和0.1%姜黄素(HFD+0.1%Cur)、高脂日粮和0.5%姜黄素(HFD+0.5%Cur)及高脂日粮和1%姜黄素(HFD+1%Cur),饲喂12周。记录每周体重(Body weight,BW)与采食量;在第4、8、12周分别进行口服葡萄糖耐受试验(Oral glucose tolerance test,OGTT)并计算曲线下面积(AUC)。试验结束时,记录小鼠体重、附睾脂肪重量,并计算体重增长量及附睾脂肪重量/体重比值,记录肝脏、心脏、脾脏、肾脏、睾丸、腓肠肌及比目鱼肌的重量并计算器官和体重比。检测血浆中脂代谢相关生化指标含量,并通过HE染色法检测附睾脂肪和肝脏组织中脂滴沉积量,并对心脏、脾脏和肾脏组织样等进行病理学分析。研究结果显示,与HFD组小鼠相比,HFD+Cur处理能显着降低小鼠体重、小鼠体重增长值、并能显着抑制小鼠附睾脂肪组织重及附睾脂肪与体重比,并且呈剂量依赖性抑制作用。此外,HFD与HFD+Cur组小鼠的采食量和饲料利用率无显着差异。相对器官重量统计结果显示,与HFD组小鼠相比,HFD+Cur处理对肝脏、心脏、脾脏、肾脏、睾丸、腓肠肌、睾丸的重量并无显着影响,但能显着增加比目鱼肌重量以及肝脏/体重和比目鱼肌重/体重。OGTT实验结果显示,与HFD组小鼠相比,HFD+0.1%Cur、HFD+0.5%Cur和HFD+1%Cur处理能不同程度抑制血糖浓度,并显着抑制AUC值,且呈剂量依赖性抑制作用。血液生化指标显示,低浓度Cur就能显着抑制LDL-C含量、高浓度Cur能显着抑制血浆中TG、Glucose、TCH和NEFA含量,而对AST、ALT和AST/ALT无显着影响。HE切片结果发现,HFD+0.1%Cur、HFD-+0.5%Cur和HFD+1%Cur处理能显着降低附睾脂肪组织和肝脏组织中脂滴的数目及附睾脂肪组织中脂肪细胞的体积,而对心脏、脾脏以及肾脏并无显着病理变化。以上结果显示,日粮中添加姜黄素能显着抑制小鼠附睾脂肪沉积并降低血脂含量,对高脂日粮诱导的肥胖有较好的扭转效果,此外,姜黄素可以显着降低血糖含量,改善葡萄糖耐受。揭示姜黄素可以作为一种潜在调节剂,有效降低体脂沉积、血脂含量和血糖水平,增强葡萄糖耐受,从而为把姜黄素作为一种安全、有效的降脂、降糖饲料添加剂应用于畜牧兽医生产实践提供有力的理论保障。(本文来源于《扬州大学》期刊2019-06-01）
郭冰冰,付锦艳,裴晶晶,蒋新液[7]（2019）在《miR-1908对人内脏前体脂肪细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响》一文中研究指出目的研究miR-1908对人内脏前体脂肪细胞(HPA-v)增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响。方法体外培养HPA-v脂肪细胞,并根据实验分为抑制剂组(转染经化学修饰的miR-1908-5p抑制剂)、空载体组(转染空载体)、对照组(未进行任何处理),CCK8(Cell Counting Kit-8)法用于检测细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期、Tunnel法检测细胞凋亡情况。结果 CCK8结果显示miR-1908抑制剂组的吸光度(OD)值(0.61±0.07)明显低于对照组(1.01±0.05)(P<0.05),抑制miR-1908具有抑制HPA-v脂肪细胞增殖的作用;Tunel结果表示miR1908抑制剂组凋亡率(0.27±0.03)%明显大于对照组(0.13±0.05)%(P<0.05);流式细胞测定的结果为G0/G1期细胞增加(与对照组相比,P<0.05),表明抑制miR-1908表达可能通过诱导HPA-v脂肪细胞G0/G1期阻滞抑制HPA-v脂肪细胞增殖。结论下调miR-1908表达能明显抑制人内脏前体脂肪细胞增殖,诱导细胞凋亡及改变细胞周期分布。(本文来源于《中华肥胖与代谢病电子杂志》期刊2019年02期）
张慧芳[8]（2019）在《miR-10a-5p在前体脂肪细胞增殖分化中的作用及机制研究》一文中研究指出Micro-RNAs作为一类非编码RNA,通过诱导信使RNA(mRNA)的切割或蛋白质翻译的抑制来调节基因的表达,从而参与机体的各个生物学过程。近年来,越来越多的文献也显示了肥胖个体中microRNA表达相对于正常个体的改变,这些变化似乎有助于帮助我们了解该患者群体中代谢紊乱表现的内在因素。家畜养殖过程中,同样也经常出现过度肥育的表现,一方面对家畜繁育有影响,降低遗传育种的速度;另一方面也影响了肉用家畜的屠宰价值,进而降低其经济价值。研究发现,miRNA作为基因转录后水平调控者,在脂肪细胞分化过程中起着重要的调控作用。研究发现miR-10a-5p在各组织中均有表达,但是在脂肪组织中表达量最低,并且miR-10a-5p在人、小鼠、大鼠和猪等不同物种间序列有着高度的保守性。根据测序结果,在猪的背最长肌和半键肌肌内脂肪测序中筛选到差异表达的miR-10a-5p,其表达量在背最长肌肌内脂肪中极显着高于半键肌(P<0.01),并且已有研究报道,背最长肌中前体脂肪细胞含量要明显高于半键肌,本研究预测miR-10a-5p与前体脂肪细胞成脂分化之间存在调控关系。基于此,以C57小鼠作为实验动物模型来探索miR-10a-5p在前体脂肪细胞增殖和分化过程中发挥的生物学功能以及其中潜在的作用机制。通过分离前体脂肪细胞进行体外培养,分别在增殖期和分化期对体外培养的前体脂肪细胞进行转染miR-10a-5p agomir等多种方法探索miR-10a-5p对前体脂肪细胞增殖和分化的影响。接着,分别构建增殖期靶基因Map2k6 3’UTR和分化期靶基因Fasn 3’UTR双荧光素酶报告载体,来验证它们与miR-10a-5p的直接靶定关系。上述研究获得以下主要结果:1.miR-10a-5p促进小鼠前体脂肪细胞的增殖在前体脂肪细胞中过表达miR-10a-5p促进前体脂肪细胞增殖,促增殖相关基因Cyclin D(P<0.01)、PCNA(P<0.05)mRNA水平显着上升,Cyclin E、Cyclin B也有一定程度的上升;而抑增殖相关基因p27、p21的mRNA表达水平均显着性下降(P<0.05)。在蛋白质水平,促增殖相关基因Cyclin D、Cyclin B及PCNA的蛋白表达量均显着升高,而抑增殖相关基因p27、p21的蛋白表达量均显着性下降(P<0.05);流式细胞检测分析显示细胞更多的向分裂间期S期转化,进行DNA分子复制的能力增强,同时EdU染色及CCK8结果也进一步证明了miR-10a-5p在前体脂肪细胞增殖期发挥的促进作用。2.miR-10a-5p在增殖期靶定Map2k6多个靶基因在线软件预测Map2k6作为miR-10a-5p的候选靶基因,并且Map2k6在增殖期的时序表达情况与miR-10a-5p呈相反的趋势,构建Map2k6 3’UTR双荧光素酶报告载体,通过酶活测定,确定Map2k6是miR-10a-5p的靶基因。3.miR-10a-5p抑制小鼠前体脂肪细胞的分化过表达miR-10a-5p后,前体脂肪细胞中成脂分化的标志基因PPARγ、aP2的mRNA的表达水平都显着下调(P<0.05),在蛋白质水平,PPARγ、aP2和adipoQ蛋白的表达量显着下降,成脂关键信号通路p-AKT也显着下降,并且油红O染色及其定量显示转染miR-10a-5p显着的降低了分化期脂滴的积累。说明过表达miR-10a-5p能够抑制前体脂肪细胞的分化。4.miR-10a-5p在分化期靶定Fasn根据软件预测并结合抑分化的表型,将Fasn作为miR-10a-5p调控脂肪分化期的候选靶基因,发现Fasn在分化的时序表达情况与miR-10a-5p呈相反的趋势。接着,构建Fasn 3’UTR双荧光素酶报告载体,通过酶活测定,确定Fasn是miR-10a-5p的靶基因。综合以上,本研究发现miR-10a-5p在脂肪中低表达,体外培养中,过表达miR-10a-5p后显着促进了前体脂肪细胞的增殖,并显着抑制了前体脂肪细胞的分化。表明miR-10a-5p参与调控脂肪生成,不仅丰富了miRNA的研究网络,也为进一步研究家畜脂肪沉积性状形成的分子机理提供了理论依据。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01）
秦晋[9]（2019）在《lncIMF4对猪肌内前体脂肪细胞增殖、分化与自噬的作用研究》一文中研究指出肌肉和脂肪是决定猪肉品质的两个主要因素,而肌内脂肪是影响肌肉组织中脂肪含量的重要方面,因此探究肌内脂肪沉积的调控机制对改善猪肉品质具有重要意义。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是机体产生的一类非编码RNA,参与许多生命活动,包括细胞的增殖与分化等;目前的研究表明lncRNAs通过多种方式参与脂肪细胞的分化聚脂,但对猪肌内脂肪沉积的研究较少。本研究从脂肪型八眉猪与瘦肉型大白猪的背最长肌中分离肌内脂肪细胞,体外诱导分化0、2、4和8d后进行测序,筛选到随肌内脂肪细胞分化程度差异表达的lncIMF4,研究了其对肌内脂肪沉积的影响。首先,本研究对两种不同类型猪种及不同分化时期的肌内脂肪细胞进行测序,筛选到部分差异表达的lncRNAs;其次,通过生物信息学分析筛选到lncIMF4作为实验的研究对象;然后,合成并转染了lncIMF4 siRNA,利用EDU、CCK-8及流式细胞术等检测了lncIMF4对猪肌内脂肪细胞增殖的作用;接着利用油红O与Bodipy染色等探究了lncIMF4对细胞分化的影响;最后,本研究构建了猪肌内脂肪细胞自噬模型,研究了lncIMF4对猪肌内脂肪细胞自噬的作用,并发现lncIMF4通过自噬参与调控肌内脂肪细胞脂解。得到的主要研究结果如下:1.八眉猪与大白猪的肌内脂肪存在许多差异表达的lncRNAs;lncIMF4在肌内脂肪细胞分化过程中,表达量先增加后减少,在分化第2d表达量最高;lncIMF4在猪各组织中均有一定表达量,在脂肪组织中表达量较高;lncIMF4在猪肌内脂肪细胞核和细胞质中均有分布,主要定位于细胞核中;2.干扰lncIMF4促进猪肌内前体脂肪细胞增殖期相关周期基因CyclinD与CyclinE的mRNA与蛋白的表达(P<0.05),表明干扰lncIMF4促进肌内脂肪细胞的增殖;3.干扰lncIMF4促进猪肌内脂肪细胞分化相关基因PPARγ与CEBPα等的mRNA与蛋白的表达(P<0.05),且油红O染色显示出脂滴增多,表明干扰lncIMF4促进肌内脂肪细胞的分化;4.干扰lncIMF4下调猪肌内前体脂肪细胞自噬相关基因mRNA与蛋白的表达(P<0.05),并发现干扰lncIMF4通过自噬抑制脂解。综上,lncIMF4在猪肌内脂肪细胞成脂过程中差异表达,干扰lncIMF4促进猪肌内前体脂肪细胞增殖与分化,抑制肌内脂肪细胞自噬。本研究筛选到lncIMF4参与调控猪肌内前体脂肪细胞增殖、分化与自噬,研究结果为lncRNAs调控猪肌内脂肪沉积提供了借鉴与参考。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01）
陈涛[10]（2019）在《miR-331-3p对猪前体脂肪细胞增殖、分化与脂肪酸积累的调控》一文中研究指出miRNAs是在真核生物中被发现的一类内源性的单链非编码小RNA,其长度18-25nt左右,miRNA在不同物种间具有严格的保守性,具有调控基因转录后翻译的作用,能够参与多种生命活动,包括有机体的发育过程,机体的免疫过程,甚至能够参与到肿瘤癌症的发生和成熟脂肪细胞的形成等过程。成熟脂肪细胞的形成是一个极其复杂的生物过程,涉及到诸多因素的调控作用。成熟脂肪细胞的形成过程主要包括叁个主要的阶段,包括间充质干细胞形成前体脂肪细胞,前体脂肪细胞生长增殖以及前体脂肪细胞分化成为成熟脂肪细胞,这其中后两个阶段是成熟脂肪细胞形成的重要部分。本研究通过转录组测序的结果以及阅读相关的文献,选取了差异表达的miR-331-3p进行更深入研究。并通过相关实验证明了miR-331-3p参与到猪的前体脂肪细胞增殖、分化与脂肪酸代谢过程中。主要研究结果如下:1、过表达miR-331-3p后,通过CCK8试剂分析细胞生长状况检测,发现细胞生长速度减慢,并且流式细胞术分析的结果处于G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降也与CCK8实验结果相符合。过表达miR-331-3p后,利用qRT-PCR检测了细胞周期相关基因,发现促进细胞增殖相关的基因mRNA水平均显着降低,而抑制细胞增殖的相关基因的mRNA水平显着升高。结果表明miR-331-3p具有抑制猪前体脂肪细胞增殖的调控作用。2、过表达miR-331-3p后,将前体脂肪细胞诱导分化并通过qRT-PCR的方法检测miR-331-3p在前体脂肪细胞分化过程中的表达趋势以及检测其分化过程中前体脂肪细胞分化标志基因PPARγ的表达变化,发现miR-331-3p具有促进前体脂肪细胞分化的作用。3、利用生物信息学的方法预测到了和脂肪酸代谢相关的基因DLST和SLC25A1基因,通过双荧光素酶报告系统荧光素酶表达量的变化验证了DLST为miR-331-3p的靶基因,并且过表达miR-331-3p能够显着降低DLST mRNA水平和蛋白水平的表达。DLST基因编码的酶存在于柠檬酸丙酮酸循环通路中,这条通路能够将细胞合成脂肪酸的所必需的乙酰-COA从线粒体中转运到细胞质中。根据DLST、SLC25A1基因以及其通路上下游基因特别是其中ACLY和FAS基因的荧光定量结果,过表达miR-331-3p后脂肪酸合成增加。油红O染色以及脂滴的定量均表明过表达miR-331-3p后脂肪酸合成增加,转染inhibitor效果均相反,也证明了miR-331-3p可以通过柠檬酸丙酮酸循环通路促进脂肪酸的合成。综上所述,本研究系统的分析了miR-331-3p对于前体脂肪细胞增殖分化与脂肪酸累积的调控,最终证明了miR-331-3p能够抑制前体脂肪细胞增殖,促进其分化成为成熟脂肪细胞以及能够促进脂肪酸积累。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-03-27）
脂肪细胞增殖论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的本试验研究白藜芦醇对人内脏前脂肪细胞细胞活力和细胞周期的影响;白藜芦醇对人内脏前脂肪细胞分化和脂质沉积的影响,以及对脂肪分化关键基因表达的影响。方法用白藜芦醇(0,5,10,20,50 mM)干预人内脏前脂肪细胞(HPA-v),在0、24、48、72 h通过MTT试验检测白藜芦醇对细胞活力的影响;用白藜芦醇(0,5,10,20,50mM)干预HPA-v细胞24 h,通过流式细胞技术分析白藜芦醇对HPA-v细胞周期的影响;用地塞米松、胰岛素、3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤诱导HPA-v向脂肪细胞分化,在分化过程中用不同浓度的白藜芦醇(0,5,10,20,50 mM)进行干预,通过油红O染色检测白藜芦醇对脂肪分化和脂质沉积的影响,通过RT-PCR检测白藜芦醇对脂肪分化关键基因PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3表达的影响。结果 (1)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制HPA-v的细胞活力,10、20、50 mM的白藜芦醇干预72 h可显着抑制HPA-v的细胞活力;(2)20、50 mM的白藜芦醇干预24 h,可显着增加S期HPA-v的细胞比例,显着降低G0-G1和G2-M期的细胞比例;(3)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制HPA-v的成脂分化,20、50 mM的白藜芦醇可以显着减少脂肪细胞中脂质的沉积;(4)白藜芦醇以浓度依赖的方式抑制PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的mRNA表达,10、20、50 mM的白藜芦醇可以显着抑制PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的mRNA表达。结论白藜芦醇抑制HPA-v的细胞活力,增加S期HPA-v的细胞比例,抑制细胞增殖;白藜芦醇抑制HPA-v成脂分化,减少脂质沉积;白藜芦醇抑制脂肪分化与PPARG、CEBPA、FABP4和LMO3的表达下调相关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脂肪细胞增殖论文参考文献
[1].张琳,伏智亮,邢华,王珏,潘士锋.肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响[J].畜牧与兽医.2019
[2].王丹丹,程佩,孙文星,徐广飞.白藜芦醇抑制人内脏前脂肪细胞增殖和分化[C].营养研究与临床实践——第十四届全国营养科学大会暨第十一届亚太临床营养大会、第二届全球华人营养科学家大会论文摘要汇编.2019
[3].陈涛,马立霞,李志鑫,耿进红,曾勇庆.miR-331-3p对猪前体脂肪细胞增殖、分化与脂肪酸积累的调控[C].第叁届中国猪业科技大会暨中国畜牧兽医学会2019年学术年会论文集.2019
[4].胡婷婷,巩雪俐,高佳乐,徐尤宗盛,孟轩羽.双链RNA结合蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡作用[J].新疆医科大学学报.2019
[5].李德鹏,耿晓晖,高月锋,王尚尚,富俊才.葡萄籽原花青素对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响[J].现代畜牧兽医.2019
[6].崔忆馨.姜黄素对猪和小鼠前体脂肪细胞增殖和成脂分化的作用研究[D].扬州大学.2019
[7].郭冰冰,付锦艳,裴晶晶,蒋新液.miR-1908对人内脏前体脂肪细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响[J].中华肥胖与代谢病电子杂志.2019
[8].张慧芳.miR-10a-5p在前体脂肪细胞增殖分化中的作用及机制研究[D].西北农林科技大学.2019
[9].秦晋.lncIMF4对猪肌内前体脂肪细胞增殖、分化与自噬的作用研究[D].西北农林科技大学.2019
[10].陈涛.miR-331-3p对猪前体脂肪细胞增殖、分化与脂肪酸积累的调控[D].山东农业大学.2019
标签：肌肉生长抑制素(MSTN); 猪前体脂肪细胞; 增殖; 成脂分化;