导读:本文包含了亚细胞定位论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,基因,酵母,因子,家蚕,核型,沧江。
亚细胞定位论文文献综述
齐彤辉,高萌,袁阳阳,李明军,马锋旺[1](2019)在《苹果酸度相关基因MdPH1的克隆、表达及亚细胞定位分析》一文中研究指出以苹果属(Malus)植物沧江海棠(M. ombrophila Hand.-Mazz)的果实为材料,对其发育过程中苹果酸的含量进行测定,并结合转录组测序的方法筛选控制果实酸度的候选基因。结果显示:MdPH1候选基因的编码区包含2829 bp,编码942个氨基酸;基因组序列全长为4269 bp,包含8个外显子和7个内含子。对10份苹果种质资源中PH1基因序列的分析结果表明,该基因序列中存在22个单核苷酸多态性(SNP),其中13个位于内含子区,9个位于外显子区;位于最后一个外显子上SNP(G/A)的变异导致了编码氨基酸从缬氨酸变为异亮氨酸。MdPH1蛋白包含8个跨膜结构域,其中蛋白N端包含3个跨膜结构域,C端包含5个跨膜结构域。系统进化分析结果显示,苹果中的PH家族成员与梨(Pyrus communis L.)中的PH家族成员聚集成一簇。组织特异性表达结果发现,MdPH1基因在苹果果实中的表达量最高,其次是叶、花和根,茎中表达量最低。亚细胞定位分析表明MdPH1蛋白定位于液泡膜上。(本文来源于《植物科学学报》期刊2019年06期)
邹杰,李生强,刘显军,陈刚[2](2019)在《水稻OsERF103基因生物信息学分析、亚细胞定位及表达分析》一文中研究指出乙烯应答因子(ethylene responsive factors, ERFs)是一类植物特有的转录因子,在植物的生长发育和逆境胁迫响应中起重要调控作用。为了研究水稻(Oryza sativa) OsERF103基因(Gen Bank No. XM_015768788)的功能,本研究利用生物信息学方法对其序列特征进行分析;构建了p BWA(V)HS-OsERF103-Glosgfp融合表达载体并转化水稻原生质体,通过激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在水稻原生质体的亚细胞定位;利用q RT-PCR技术对该基因在水稻不同组织及不同逆境胁迫下的表达模式进行分析。结果表明OsERF103含有1个AP2 (APETALA2)结构域,为亲水性蛋白,不含信号肽和跨膜结构,在进化关系上与短舌野生稻(Oryza brachyantha)类脱落酸阻遏因子1 (abscisic acid repressor 1-like, ABR1-like)蛋白的亲缘关系最近;亚细胞定位结果显示OsERF103定位于细胞核;q RT-PCR分析结果显示,OsERF103在孕穗期的根、茎、叶、叶鞘、叶枕和幼穗中均有表达,其在根中表达最强,在叶和幼穗中表达较弱;OsERF103被高温、低温、PEG6000、高盐和脱落酸(abscisic acid, ABA)诱导表达,但在不同的胁迫条件下该基因表达模式不尽相同。本研究为进一步研究水稻OsERF103基因的功能提供了基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年12期)
欧阳梦真,朱磊,孙治强,李胜利,吴帼秀[3](2019)在《西瓜ClWRKY54基因的克隆、亚细胞定位及表达分析》一文中研究指出WRKY转录因子是植物中所特有的一类转录因子,以基因家族形式存在,并在植物的生长发育和逆境响应等过程中发挥重要的作用。采用RT-PCR的方法从西瓜中分离得到一条西瓜CIRKY54基因。序列分析表明,该基因开放阅读框全长1 428 bp,编码475个氨基酸。其编码蛋白分子量约为51.82 KD,等电点为6.17。该基因蛋白序列中包含2个WRKY保守结构域,锌指结构为C2H2型,属于典型的1类WRKY基因。进化树分析显示,该基因蛋白序列同葫芦科作物中的甜瓜、黄瓜、西葫芦等的WRKY26具有较高的同源性,处于同一分支上。亚细胞定位分析显示,该基因编码蛋白定位于细胞核中。对该基因进行荧光定量PCR分析研究其表达特性,结果显示该基因在西瓜根、茎、叶中均有表达,但是在叶片中表达量最高;H_2O_2可以诱导该基因的表达,而乙烯处理可以抑制该基因的表达,这说明该基因可能参与逆境下H_2O_2和乙烯所介导的信号途径。在模拟干旱下,该基因表达无变化,说明该基因同干旱胁迫抗性不相关。本研究的结果将为进一步的解析ClWRKY54的功能奠定基础。(本文来源于《中国瓜菜》期刊2019年12期)
刘涵,孟成真,刘玉青,李秀红,石晓玲[4](2019)在《禾谷炭疽菌CgRab5A的亚细胞定位研究》一文中研究指出为明确禾谷炭疽菌(Colletotrichum graminicola)中CgRab5A(GLRG_00019)蛋白在细胞内的定位特点,利用多片段一步克隆法将CgRab5A自身启动子、GFP片段和CgRab5A开放阅读框(ORF)片段克隆到pKNT载体上,转化野生型禾谷炭疽菌的原生质体后,通过新霉素抗性筛选获得阳性候选转化子,利用共聚焦显微镜观察GFP-CgRab5A在菌丝和孢子内的定位情况。结果表明,一步克隆法获得的pKNT-GFP-CgRab5A重组载体经测序后序列完全正确,亚细胞定位观察发现GFP-CgRab5A在菌丝和孢子细胞内均呈点状分布,定位于早期内涵体上,暗示其可能参与早期内涵体的相关调控过程。(本文来源于《安徽农学通报》期刊2019年22期)
金雪,宋敬臻,谢志平[5](2019)在《酿酒酵母GPCR蛋白Ste2亚细胞定位信号探索》一文中研究指出G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)家族蛋白在细胞感受各种胞外信号过程中发挥重要作用。Ste2是酵母细胞中GPCR蛋白之一。大量文献报道了Ste2蛋白突变体对其功能和表达的影响,但关于Ste2亚细胞定位的研究相对较少。这项工作的目的在于确定Ste2亚细胞定位,探究Ste2不同跨膜域、胞内外环状结构域和N端、C端对其亚细胞定位的影响。构建了一系列结构域删除或替换突变体,通过荧光显微镜观察判断不同结构区域对Ste2亚细胞定位的影响,并通过与已知的细胞器标记蛋白共定位观察验证亚细胞定位判读结果。结果显示:野生型Ste2荧光信号出现在质膜和液泡内腔; C端缺失突变体荧光信号出现在质膜和内质网。在N端、C端、各环状结构域序列采用动物GPCR蛋白ORI7、OR17-40相应结构域替换的突变体中,C端替换导致液泡内腔信号消失,质膜信号强于野生型; N端和部分环状结构域替换不同程度减弱或消除了质膜定位,液泡腔内信号类似于野生型;部分突变体在胞内出现点状分布的荧光信号。由此推断:Ste2 N端,第一、第二胞外环状结构域和第叁胞内环状结构域可能具有影响Ste2运输定位到质膜的功能;而C端则可能在Ste2离开细胞膜进入液泡的过程中发挥作用。初步确定了Ste2的不同结构区域对其定位的影响,为深入研究GPCR蛋白的亚细胞定位机制奠定基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2019年11期)
李惠华,曾碧玉,王伟,常强,苏明华[6](2019)在《枇杷悬浮细胞AS基因的瞬时表达载体构建与亚细胞定位》一文中研究指出枇杷(Eriobotrya japonica)细胞悬浮培养可以产生丰富的五环叁萜类化合物。香树素合成酶(amyrine synthase, AS)是叁萜合成途径中的关键酶,决定主要代谢和次生代谢的分支点。枇杷AS基因的功能未见报道。本研究以AS基因过表达质粒(p DONR207-AS)为模板,经PCR扩增获得AS基因的正向开放阅读框,经酶切及与载体的连接,成功构建表达载体p BWA(V)HS-AS-GFP-Tnos。以枇杷悬浮细胞(AS分离的同源系统)为受体材料,在农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101的介导下进行瞬时表达,通过共转化的GFP在激光共聚焦显微镜下成像,分析AS蛋白的亚细胞定位;采用气相色谱-质谱联合分析AS催化产物。研究结果显示,AS在枇杷悬浮细胞中定位于内质网;枇杷悬浮细胞中AS的催化产物含α-香树素和β-香树素,AS属于多功能酶。本研究可为明确五环叁萜类化合物合成途径以及枇杷悬浮细胞的转基因应用提供参考依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年11期)
黄金山,程晨[7](2019)在《家蚕核型多角体病毒经口感染因子1编码基因的转录及亚细胞定位分析》一文中研究指出杆状病毒在感染循环中产生的包涵体衍生病毒(occlusion-derived virus,ODV)介导病毒经口感染。由至少9种经口感染因子(per os infectivity factor,PIF)形成的复合体介导ODV感染昆虫中肠上皮细胞。为深入研究经口感染因子1(PIF1)的作用机制,克隆了家蚕核型多角体病毒(BmNPV)陕西分离株的pif1基因,序列分析显示其编码蛋白与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的PIF1氨基酸序列一致性为85%,含有2个RGD基序;5′RACE分析发现pif1转录起始位点位于起始密码子上游53 bp处,含有病毒晚期启动子的保守序列ATAAG;定量PCR分析显示pif1在感染晚期开始大量转录,一直持续到感染极晚期;利用瞬时表达系统将PIF1与EGFP融合表达,通过激光共聚焦显微镜观察荧光分布位置,结果发现荧光均匀分布于细胞质中,而在病毒感染后荧光进入细胞核中,表明PIF1在其他病毒因子参与下,被运输至细胞核中。研究结果为今后深入研究BmNPV PIF1在ODV经口感染中的作用奠定了基础。(本文来源于《蚕业科学》期刊2019年04期)
邵盈,张艳芳,赵令敏,敖兰吉亚,霍秀文[8](2019)在《山药V-ATPase B2亚基基因的克隆、表达分析及亚细胞定位》一文中研究指出ATP合成酶(V-ATPase)催化能源物质ATP的合成,从而保证细胞各项生命活动的能量供应。目前对山药(Dioscoreaopposita)生长发育相关差异表达基因的研究鲜有报道。本研究中通过分析ATP酶、V-ATPaseB2亚基基因对山药块茎膨大的影响,为进一步解析山药生长发育的分子调节机制提供试验依据与线索,并为山药块茎膨大提供候选基因。试验材料为毕克齐山药和大和长芋山药。在呼和浩特地区山药块茎在播后90 d左右开始膨大。在块茎膨大期间,每隔15d取1次样,即播后的105、120、135、150和165d进行取样,分别采集叶、茎和块茎。两个品种各选取3株作为生物学重复。使用RACE技术克隆了V-ATPase B2亚基基因的cDNA全长;对其开放阅读框进行了生物信息学分析;克隆其gDNA;使用农杆菌介导法注射烟草叶片进行V-ATPase B2蛋白的亚细胞定位;对ATPase活性和V-ATPase B2亚基基因进行表达模式分析。通过全长克隆得到山药V-ATPase B2亚基基因的cDNA全长为1 874 bp,编码488个氨基酸,基因登录号为MK858181。该基因编码蛋白的理论分子量为54289.76,等电点为5.08;分子式为C2404H3824N654O741S17,总原子数为7640,亲水性的平均值为–0.268。通过gDNA的克隆,得到V-ATPase B2的编码区分为14个外显子,15个内含子。同源序列进化分析表明,山药与凤梨的亲缘关系最近。亚细胞定位表明山药V-ATPase B2蛋白定位于细胞质。通过ATP酶活性的测定与实时荧光定量PCR分析,得到两品种山药的ATPase活性和V-ATPaseB2相对表达量同时达到最高值。在山药块茎膨大中前期二者极显着正相关,而在成熟收获时则为极显着负相关,相关系数为–0.963(P<0.01)。说明V-ATPaseB2的表达水平影响着ATPase的活性。ATPase活性在叶中最高,而V-ATPase B2在块茎中表达量最高。从广义上讲,V-ATPase B2在山药块茎膨大过程中发挥着一定的作用,可进一步为山药生长发育提供候选基因。(本文来源于《中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集》期刊2019-10-21)
杨冲,王利虎,刘志国,罗智,刘孟军[9](2019)在《枣SUC家族的全基因组鉴定、表达分析及亚细胞定位》一文中研究指出蔗糖转运蛋白(sucrose transporters,SUC)基因在蔗糖运输过程中具有关键作用。在全基因组范围内对枣SUC家族基因进行鉴定,并对这些基因的进化、分类及组织表达情况进行系统分析,对ZjSUC1编码蛋白进行亚细胞定位,可为枣SUC基因功能研究和利用奠定理论基础,同时也为进一步分析和揭示枣果蔗糖高积累的分子机制提供参考。利用本课题组2014年公布的冬枣全基因组数据,通过生物信息学手段,鉴定并获得枣SUC基因家族成员;采用DNAMAN6.0、ProtParam等软件对其蛋白序列进行生物信息学分析;利用MEGA5.1构建系统进化树进行进化和分类分析;利用qRT-PCR技术检测枣SUC家族基因的组织特异性表达情况。利用高效液相色谱法和qRT-PCR技术,测定5个枣品种和2个酸枣基因型在果实发育过程中的果实果糖、蔗糖、葡萄糖及可溶性糖含量和SUC家族基因表达变化;利用SPSS21.0软件分析SUC家族成员的基因表达量与可溶性糖含量的相关性。以冬枣果实cDNA为模板,克隆SUC基因全长,构建含GFP蛋白的共表达载体,在烟草中瞬时表达,分析其亚细胞定位情况。本研究中鉴定得到3个枣SUC基因,分别是ZjSUC1(LOC107421563)、ZjSUC3(LOC107434904)和ZjSUC4(LOC107421393);3个基因编码的氨基酸分别为524、346和501个,外显子分别为4、10和6个,其蛋白质等电点分别是9.01、8.98和9.71。分组鉴定和系统进化树分析结果显示,ZjSUC1、ZjSUC3、ZjSUC4分别属于SUT1、SUT2/SUT3、SUT4亚族。组织特异性表达分析显示:ZjSUC1、ZjSUC3和ZjSUC4均在茎、叶、花和果实中表达,且呈现不同表达模式,ZjSUC1在根中基本不表达。在枣果实的发育过程中,ZjSUC1与ZjSUC3和ZjSUC4的表达量表现出不同的变化趋势,ZjSUC1的表达量逐渐提高,全红期达到最高,而ZjSUC3和ZjSUC4在白熟期最高。相关性分析结果表明,ZjSUC1的表达与蔗糖的含量极显着相关(P<0.01),ZjSUC3表达与果糖的含量极显着相关(P<0.01),ZjSUC4表达与蔗糖的含量显着相关(P <0.05),这说明ZjSUC在枣果可溶性糖积累,尤其是蔗糖积累过程中发挥了重要的作用。烟草瞬时表达结果说明,ZjSUC1和ZjSUC4的信号位于细胞膜,这表明其可能在细胞间隙糖的运输及分配中发挥重要作用。(本文来源于《中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集》期刊2019-10-21)
张正坦,朱婧,谢志平[10](2019)在《酿酒酵母全基因组SNARE蛋白的亚细胞定位研究》一文中研究指出在真核细胞中,内质网、高尔基体、质膜等膜结构间的蛋白质运输主要通过囊泡出芽和融合实现。SNARE蛋白家族在介导囊泡与目的膜结构融合过程中发挥关键作用。在模式生物酿酒酵母中,对全基因组SNARE蛋白的系统研究仍有不足。此研究构建了一套用于标记酿酒酵母基因组全部24种SNARE的工具质粒。该系列质粒既能呈现出良好的定位特征,又避免了过度表达造成的定位异常。通过与细胞器标记共定位验证了SNARE蛋白的亚细胞定位。结果发现3种SNARE的定位与之前报道不符:Bos1定位于早高尔基体,Snc1和Bet1定位于晚高尔基体/早内体。另外,Sec9定位于芽尖和芽颈,这是首次观察到Sec9在活酵母细胞中的定位。这项工作首次全面的检验了酵母SNARE家族蛋白的亚细胞定位,为后续SNARE蛋白功能研究提供了新线索,并为相关研究提供了一套工具质粒。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2019年10期)
亚细胞定位论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
乙烯应答因子(ethylene responsive factors, ERFs)是一类植物特有的转录因子,在植物的生长发育和逆境胁迫响应中起重要调控作用。为了研究水稻(Oryza sativa) OsERF103基因(Gen Bank No. XM_015768788)的功能,本研究利用生物信息学方法对其序列特征进行分析;构建了p BWA(V)HS-OsERF103-Glosgfp融合表达载体并转化水稻原生质体,通过激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在水稻原生质体的亚细胞定位;利用q RT-PCR技术对该基因在水稻不同组织及不同逆境胁迫下的表达模式进行分析。结果表明OsERF103含有1个AP2 (APETALA2)结构域,为亲水性蛋白,不含信号肽和跨膜结构,在进化关系上与短舌野生稻(Oryza brachyantha)类脱落酸阻遏因子1 (abscisic acid repressor 1-like, ABR1-like)蛋白的亲缘关系最近;亚细胞定位结果显示OsERF103定位于细胞核;q RT-PCR分析结果显示,OsERF103在孕穗期的根、茎、叶、叶鞘、叶枕和幼穗中均有表达,其在根中表达最强,在叶和幼穗中表达较弱;OsERF103被高温、低温、PEG6000、高盐和脱落酸(abscisic acid, ABA)诱导表达,但在不同的胁迫条件下该基因表达模式不尽相同。本研究为进一步研究水稻OsERF103基因的功能提供了基础资料。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
亚细胞定位论文参考文献
[1].齐彤辉,高萌,袁阳阳,李明军,马锋旺.苹果酸度相关基因MdPH1的克隆、表达及亚细胞定位分析[J].植物科学学报.2019
[2].邹杰,李生强,刘显军,陈刚.水稻OsERF103基因生物信息学分析、亚细胞定位及表达分析[J].农业生物技术学报.2019
[3].欧阳梦真,朱磊,孙治强,李胜利,吴帼秀.西瓜ClWRKY54基因的克隆、亚细胞定位及表达分析[J].中国瓜菜.2019
[4].刘涵,孟成真,刘玉青,李秀红,石晓玲.禾谷炭疽菌CgRab5A的亚细胞定位研究[J].安徽农学通报.2019
[5].金雪,宋敬臻,谢志平.酿酒酵母GPCR蛋白Ste2亚细胞定位信号探索[J].中国生物工程杂志.2019
[6].李惠华,曾碧玉,王伟,常强,苏明华.枇杷悬浮细胞AS基因的瞬时表达载体构建与亚细胞定位[J].农业生物技术学报.2019
[7].黄金山,程晨.家蚕核型多角体病毒经口感染因子1编码基因的转录及亚细胞定位分析[J].蚕业科学.2019
[8].邵盈,张艳芳,赵令敏,敖兰吉亚,霍秀文.山药V-ATPaseB2亚基基因的克隆、表达分析及亚细胞定位[C].中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集.2019
[9].杨冲,王利虎,刘志国,罗智,刘孟军.枣SUC家族的全基因组鉴定、表达分析及亚细胞定位[C].中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集.2019
[10].张正坦,朱婧,谢志平.酿酒酵母全基因组SNARE蛋白的亚细胞定位研究[J].中国生物工程杂志.2019