红曲霉LovD基因的克隆及转基因高产洛伐他汀菌株筛选

红曲霉LovD基因的克隆及转基因高产洛伐他汀菌株筛选

论文摘要

通过紫外诱变筛选出的高产洛伐他汀红曲霉菌株M120-1为出发菌株,提取红曲霉菌株总RNA,通过RT-PCR技术克隆Lov D基因,构建表达载体,对红曲霉进行遗传转化;通过高效液相色谱法筛选高产洛伐他汀转化菌株。结果表明:提取红曲霉总RNA并建立表达载体,随机挑选出12个转化子,经PCR鉴定,有10株成功得到转化。对其进行培养并通过HPLC法测定洛伐他汀产量,其中一株转化菌株的洛伐他汀产量为0. 55 mg/m L,比出发菌株产量高63%。对该菌株进行传代培养,具有良好的遗传稳定性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 菌种
  •     1.1.2 主要试剂
  •     1.1.3 培养基
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 红曲霉总RNA提取及c DNA第一链合成
  •     1.2.2 表达载体构建
  •     1.2.3 红曲霉遗传转化
  •     1.2.4 高产洛伐他汀菌株筛选
  •     1.2.5 遗传稳定性分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 红曲霉总RNA提取
  •   2.2 红曲霉转化子的PCR鉴定
  •   2.3 红曲霉洛伐他汀的产量测定
  •   2.4 转化菌株遗传稳定性
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 沈小瑞,王钰,陈达伟

    关键词: 红曲霉,洛伐他汀,根癌农杆菌,遗传转化

    来源: 生物学杂志 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 安徽大学资源与环境工程学院

    基金: 中药材产业技术创新平台(Y01001575)

    分类号: Q78

    页码: 23-25

    总页数: 3

    文件大小: 126K

    下载量: 158

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