粪肠球菌胶原黏附素ace基因对生物被膜形成的影响

粪肠球菌胶原黏附素ace基因对生物被膜形成的影响

论文摘要

目的探讨粪肠球菌ace基因在细菌生物被膜形成中的作用。方法将粪肠球菌野生株U8-ace-、空质粒对照株EU8-ace-、转化株ZU8-ace+接种至96孔细胞板,分别于37℃及46℃培养6 h,测定OD595,比较粪肠球菌ace基因阳性、阴性菌株在不同温度下的早期黏附能力;将U8-ace-,EU8-ace-,ZU8-ace+接种到96孔板,46℃培养3,6,12,24,36及48 h,结晶紫染色,测定OD570微量滴定板法比较粪肠球菌ace基因野生株、空质粒对照株、转化株的生物被膜形成能力;将U8-ace-,EU8-ace-,ZU8-ace+在含盖玻片的细胞培养皿内4 6℃培养6~72 h,激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察比较ace+,ace-肠球菌生物被膜的平均厚度、密度、活菌比例。结果转化株ZU8-ace+于46℃培养的早期黏附OD595值高于37℃培养的OD595值,差别有统计学意义(P<0.01)。粪肠球菌U8-ace-,EU8-ace-37℃培养的早期黏附OD595与46℃培养的值比较,差别无统计学意义(P>0.05);微量滴定板法显示不同时间点ace基因转化株的OD570值均大于野生株的OD570值;转化株与野生株生物被膜形成能力OD570比较,差别有统计学意义(P<0.01);空质粒对照株与野生株比较,差别无统计学意义(P>0.05);CLSM观察不同培养时间点生物被膜的平均厚度、细菌的密度以及活菌比例,ace+粪肠球菌的值均高于ace-粪肠球菌,ZU8-ace+与U8-ace-比较,差别有统计学意义(P<0.01);EU8-ace-与U8~ace-比较,差别无统计学意义(P>0.05)。结论粪肠球菌胶原黏附素ace基因或有利于肠球菌生物被膜的形成。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 菌株及质粒
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 粪肠球菌ace基因转化株构建
  •     1.2.2 粪肠球菌ace基因阳性、阴性菌株不同温度下早期黏附能力比较
  •     1.2.3 微量滴定板法比较粪肠球菌ace基因阳性、阴性菌株生物被膜形成能力[9-10]
  •     1.2.4 CLSM观测比较粪肠球菌ace基因阳性、阴性菌株生物被膜
  •   1.3 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 粪肠球菌ace基因阳性、阴性菌株不同温度下早期黏附能力比较
  •   2.2 粪肠球菌ace基因阳性、阴性菌株生物被膜形成能力比较
  •   2.3 CLSM观测比较粪肠球菌ace基因阳性、阴性菌株生物被膜情况
  •     2.3.1 ace+,ace-粪肠球菌生物被膜平均厚度比较
  •     2.3.2 ace+,ace-粪肠球菌生物被膜中层内细菌密度比较
  •     2.3.3 ace+,ace-粪肠球菌生物被膜内活菌比例比较
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 强华,宋立罡,林任玺,刘光英

    关键词: 肠球菌,基因,显微镜检查,电子,扫描,仪器和设备

    来源: 福建医科大学学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 基础医学

    单位: 福建医科大学基础医学院病原生物学系,宁夏医科大学临床医学院

    基金: 福建省自然科学基金(2016J01362)

    分类号: R378

    页码: 382-385+396

    总页数: 5

    文件大小: 254K

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