随机诱变和基因组重排选育阿维拉霉素高产菌

随机诱变和基因组重排选育阿维拉霉素高产菌

论文摘要

以绿色产色链霉菌(Streptomyces viridoehrongenes 2-21)为原始出发菌株,依次进行常压等离子(atmospheric and room temperature, ARTP)和2轮137Csγ诱变,从中筛选出高产阿维拉霉素的突变株,作为基因组重排的亲本菌株,以利福平为筛选剂,经过4轮原生质体递归融合,最终得到1株遗传稳定的高产阿维拉霉素重组菌株H4-15。摇瓶发酵结果表明,阿维拉霉素产量可达到(2 155.48±7.81) mg/L,中试发酵结果表明,阿维拉霉素产量达到(2 356.44±6.34)mg/L,是原始出发菌株的3.47倍。高产菌株H4-15发酵产物的LC-MS结果显示,其主要组分是阿维拉霉素A和阿维拉霉素B。综合表明,以利福平为筛选剂,结合传统随机诱变和基因组重排技术选育阿维拉霉素高产菌株,能大幅提升其生产能力,具有工业化生产的潜在价值。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要材料
  •     1.1.1 菌株
  •     1.1.2 培养基配制
  •     1.1.3 溶液配制
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 菌种活化及培养
  •     1.2.2 单孢子菌悬液的制备
  •     1.2.3 摇瓶发酵培养
  •     1.2.4 等离子诱变 (ARTP) 育种
  •     1.2.5 137Csγ诱变育种
  •     1.2.6 抗性突变株的筛选
  •     1.2.7 原生质体融合
  •     1.2.8 菌株稳定性验证
  •     1.2.9 菌株扩大化培养
  •   1.3 分析方法
  •     1.3.1 阿维拉霉素含量的测定
  •     1.3.2 其他指标及测定方法
  •     1.3.3 数据处理与统计分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 随机诱变育种结果
  •     2.1.1 ARTP最佳照射剂量的确定
  •     2.1.2 137Csγ射线照射剂量的确定
  •     2.1.3 ARTP诱变及第1轮137Csγ诱变育种结果
  •     2.1.4 第2次137Csγ诱变育种结果
  •   2.2 基因组重排育种结果
  •     2.2.1 利福平最小抑菌浓度确定
  •     2.2.2 第1轮原生质体融合结果
  •     2.2.3 第2轮原生质体融合结果
  •     2.2.4 第3轮原生质体融合结果
  •     2.2.5 第4轮原生质体融合结果
  •   2.3 稳定性遗传试验
  •   2.4 高产突变菌株H4-15的扩大化培养
  •   2.5 菌株H4-15发酵产物阿维拉霉素组分验证
  • 3 结论与讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 胡向东,冯云会,叶茂,梁新乐

    关键词: 绿色产色链霉菌,阿维拉霉素,随机诱变,基因组重排

    来源: 食品与发酵工业 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,一般化学工业

    单位: 浙江工商大学食品与生物工程学院

    基金: 浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02025)

    分类号: TQ920.1;Q78

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019154

    页码: 1-7

    总页数: 7

    文件大小: 1905K

    下载量: 144

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