论文摘要
目的在研究辛伐他汀（SIM）诱导骨髓间充质干细胞（BMSC）成骨分化作用的基础上,结合应用Hedgehog信号通路阻断剂环巴胺cyclopamine（Cpn）,探讨Hedgehog通路是否参与辛伐他汀刺激BMSC成骨分化的过程。方法采用全骨髓贴壁培养法提取大鼠BMSC,在诱导培养基（CM）、含SIM或SIM+Cpn的诱导培养基中培养。采用碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色法,检测细胞中ALP的表达;通过免疫荧光染色观察细胞中Gli1及骨钙素（osteocalcin,OCN）的表达;采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）法,检测细胞中Gli1、ALP、Ⅰ型胶原（collagen typeⅠ,COLΙ）及OCN mRNA的表达;采用蛋白质印迹技术,分析细胞中Gli1、Runx2、COLΙ及OCN的表达,通过茜素红染色检测细胞钙结节形成及基质矿化能力。结果 SIM组ALP表达水平显著高于CM组（P<0.05）,而SIM+Cpn组ALP表达水平则显著低于SIM组（P<0.05）,但仍高于CM组。免疫荧光检测显示,SIM在有（无）Cpn存在的情况下均可促进Gli1及OCN的表达;给药第10和18天SIM组Gli1、ALP、OCN及COLΙmRNA表达水平均显著高于CM组（P<0.05）,且这种改变不能被Cpn完全阻断;给药第10和18天SIM组Gli1、Runx2、COLΙ及OCN蛋白表达显著高于CM组（P<0.05）,SIM+Cpn组显著低于SIM组（P<0.05）。茜素红染色结果提示,SIM组基质矿化能力显著高于CM组、SIM+Cpn组（P<0.05）。结论 SIM可通过上调Gli1及ALP、Runx2、COLΙ及OCN等成骨标志物表达,诱导BMSC成骨分化,且Cpn无法完全阻断该作用。相关机制有待进一步研究阐明。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 郭志斌,迟博婧,张钰英,吴春芳,刘子洪,邢磊,张国彬
关键词: 信号通路,骨髓间充质干细胞,辛伐他汀,成骨分化
来源: 国际药学研究杂志 2019年11期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 药学
单位: 开滦总医院林西医院,华北理工大学,开滦总医院
基金: 河北省医学科学研究重点课题资助项目(20190152,20160722),河北省自然科学基金资助项目(H2013209255)
分类号: R96
DOI: 10.13220/j.cnki.jipr.2019.11.005
页码: 832-839
总页数: 8
文件大小: 2754K
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标签：信号通路论文; 骨髓间充质干细胞论文; 辛伐他汀论文; 成骨分化论文;