论文摘要
光照是高等真菌子实体发育必不可少的环境因子之一,真菌通过光受体感受光信号,WC-1蛋白既有对光信号应答能力,又可以作为转录因子,激活下游基因表达。为了对真菌光感应系统作进一步研究,本研究利用杏鲍菇Ple-tm菌株转录组数据,采用RT-PCR方法克隆获得了杏鲍菇wc-1基因,构建原核表达载体p ET-28a（+）-wc-1并转化大肠杆菌BL21,诱导表达。结果显示:wc-1基因（GenBank登录号:MG705181）长为2 614 bp,含有一个2 205 bp的开放阅读框（open reading frame, OFR）,编码734个氨基酸,理论分子量（molecular weight, Mw）为81 k D,等电点（isoelectric point, PI）为6.29。同源性比对发现,与平菇中蓝光受体在氨基酸水平上相似性达82%以上,显示其较高的保守;成功构建含有wc-1基因的原核表达载体p ET-28a（+）-wc-1,体外诱导表达出融合蛋白,该重组蛋白在18℃、0.1 mmol/L IPTG、12 h时表达量最大,且以包涵体的形式存在。本研究结果为深入研究杏鲍菇子实体形成机理及蓝光受体蛋白的结构奠定了基础。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 闫苗,刘云超,李帆,辛思洁,陈利丁,艾柳英,孙淑静
关键词: 杏鲍菇,蓝光受体,基因克隆,原核表达
来源: 基因组学与应用生物学 2019年12期
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技
专业: 生物学,园艺
单位: 福建农林大学生命科学学院,福建农林大学(古田)菌业研究院
基金: 福建省自然科学基金杰出青年项目(2014J06010),校科技创新专项基金(CXZX2017505),福建省科技厅区域发展项目(2019N3018)共同资助
分类号: S646;Q943.2
DOI: 10.13417/j.gab.038.005444
页码: 5444-5449
总页数: 6
文件大小: 1440K
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