小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达条件的优化及反应活性

论文摘要

目的探讨小反刍兽疫病毒（Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV）N蛋白原核表达、条件优化及反应活性。方法参照GenBank中PPRV （Nigeria/75/1）N基因序列,人工合成该基因,构建重组表达质粒pET-30a （+）-N,转化至BL21 （DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳、Western-blot分析。在不同温度、时间、IPTG浓度条件下诱导表达N蛋白,确定最佳表达条件。结果 PPRV N蛋白（64.4kD）成功表达,能被羊PPRV免疫血清所识别。N蛋白主要以包涵体存在,其最佳诱导条件:诱导温度28℃、IPTG终浓度2.0mmol/L、诱导时间16h。结论原核表达的PPRV N蛋白具有良好的特异性和反应活性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了技术资料。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 苗书魁,汪萍,魏玉荣,陆桂丽,米晓云,夏俊,沙依兰·卡依扎,魏婕,王延,李金娜,马文戈,黄炯

关键词: 小反刍兽疫病毒,蛋白,原核表达,反应活性

来源: 中国微生态学杂志 2019年01期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心),新疆农业大学动物医学学院

基金: 国家重点研发计划项目“边境地区外来动物疫病阻断及防控体系研究”项目(2017YFD0501800)“边境地区家养动物外来动物疫病监测溯源技术研究”课题(2017YFD0501801),新疆维吾尔自治区创新环境建设专项科技创新基地建设项目“新疆兽医微生物资源共享平台建设”(PT1809),新疆维吾尔自治区自然基金“小反刍兽疫病毒主要保护性抗原基因的优化及免疫协同关系研究”(2018D01A41)

分类号: S852.65

DOI: 10.13381/j.cnki.cjm.201901007

页码: 30-34

总页数: 5

文件大小: 942K

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