抗氧化基因过表达提高运动发酵单胞菌糠醛耐受性

抗氧化基因过表达提高运动发酵单胞菌糠醛耐受性

论文摘要

糠醛是木质纤维素水解液的主要抑制物,能诱发活性氧自由基(Reactive oxygen species,ROS)产生。探索抗氧化基因对于糠醛耐受性的影响有助于改善菌株表型。过表达运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis自身的NADH氧化酶(ZMO1885)、NADP+还原酶(ZMO1753)和谷胱甘肽还原酶(ZMO1211)基因,检测胞内ROS、NADH/NAD+以及其耐受性能。结果表明,在2g/L糠醛条件下,相比对照菌株,ZM4/ZMO1885的胞内ROS降低了52.1%,生物量提高了38.9%,且未引起胞内辅因子扰动。过表达ZMO1753和ZMO1211没有显著提高菌株耐受性。在模拟木质纤维素水解液中,ZM4/ZMO1885的生物量较对照菌株提高了46.9%,糖耗速率提高了110.3%,乙醇生产力提高了195.2%。综上,过表达抗氧化酶基因能够影响糠醛胁迫耐受性,其中过表达ZMO1885不仅不影响细胞正常生长,还能降低ROS水平,提高糠醛去除率,改善了细胞的糠醛耐受性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 培养方法
  •     1.2.2 菌株构建与活化
  •     1.2.3 重组菌株生长及耐受性能的测定
  •     1.2.4 RT-qPCR验证
  •     1.2.5 NADH氧化酶酶活测定
  •     1.2.6 胞内活性氧检测
  •     1.2.7 NAD+及NADH测定
  •     1.2.8 模拟木质纤维素水解液发酵性能检测
  • 2 结果
  •   2.1 重组菌株生长性能评价
  •   2.2 重组菌株耐受性能评价
  •   2.3 胞内活性氧自由基检测
  •   2.4 ZMO1885过表达菌株基因表达效果分析
  •   2.5 NADH氧化酶过表达菌株在模拟木质纤维素水解液中发酵效果
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 闻远,夏娟,戚良华,刘小伟,刘晨光,白凤武

    关键词: 糠醛,活性氧自由基,氧化酶,谷胱甘肽还原酶,还原酶,耐受性

    来源: 生物技术通报 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工,一般化学工业

    单位: 微生物代谢国家重点实验室上海交通大学生命科学技术学院,上海保兴生物设备工程有限公司

    基金: 国家自然科学基金项目(21536006),上海市自然科学基金项目(18ZR1420700),上海市闵行区科技项目(2017MH294)

    分类号: TQ920.6;TQ251.11

    DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0040

    页码: 85-94

    总页数: 10

    文件大小: 1908K

    下载量: 152

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