苹果MdWRKY53基因克隆和功能鉴定

苹果MdWRKY53基因克隆和功能鉴定

论文摘要

利用拟南芥WRKY53蛋白序列在苹果基因组中进行比对得到一个得分最高、同源性最高的序列,将其命名为MdWRKY53 (MDP0000299114)。根据MdWRKY53基因序列设计引物,从‘皇家嘎啦’(Malus×domestica)苹果苗上克隆得到一个约1000 bp的基因条带,测序发现该基因包含长为1056 bp的完整开放阅读框,编码351个氨基酸,和苹果基因组预测序列相符。进化树分析表明苹果WRKY53与白梨WRKY53亲缘关系最近,且发现MdWRKY53含有一个保守的WRKY结构域。荧光定量PCR分析表明, MdWRKY53在苹果的不同组织中均有表达,并且在果实中表达量最高,茎中表达量最低,并且MdWRKY53能够响应低温、盐胁迫、脱落酸、水杨酸、赤霉素和生长素信号。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 植物材料
  •   1.2 MdWRKY53基因克隆
  •   1.3 MdWRKY53生物信息学分析
  •   1.4 MdWRKY53表达载体的构建及农杆菌介导苹果愈伤组织遗传转化
  •   1.5 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)
  •   1.6 植物生长调节物质处理苹果愈伤组织及鲜重测定
  •   1.7 数据分析
  • 2 实验结果
  •   2.1 MdWRKY53基因克隆和进化树分析
  •   2.2 MdWRKY53蛋白保守结构域及三级结构分析
  •   2.3 MdWRKY53启动子顺式作用元件分析
  •   2.4 MdWRKY53组织表达模式及对生物和非生物胁迫的响应
  •   2.5 MdWRKY53转基因苹果愈伤组织与植物生长调节物质的关系
  •     2.5.1 MdWRKY53转基因苹果愈伤组织的获得
  •     2.5.2 ABA处理下MdWRKY53转基因苹果愈伤组织的生长情况
  •     2.5.3 GA处理下MdWRKY53转基因苹果愈伤组织的生长情况
  •     2.5.4 IAA处理下MdWRKY53转基因苹果愈伤组织的生长情况
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 齐晨辉,赵先炎,姜翰,郑朋飞,刘海涛,李媛媛,郝玉金

    关键词: 苹果,生物胁迫,非生物胁迫

    来源: 植物生理学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,园艺

    单位: 山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,西北农林科技大学园艺学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室/陕西苹果重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(31772275),山东省自然科学基金优青项目(ZR2018JL014)~~

    分类号: S661.1;Q943.2

    DOI: 10.13592/j.cnki.ppj.2018.0281

    页码: 511-520

    总页数: 10

    文件大小: 2214K

    下载量: 461

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