牛支原体和牛病毒性腹泻病毒二重二温式PCR检测方法的建立

论文摘要

为建立一种牛支原体（Mycoplasma bovis,MB）和牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）的快速鉴别诊断方法,针对MB的uvr C基因和BVDV的5’端非编码区（5’-UTR）保守基因序列,分别设计两对特异引物,并将三温式PCR扩增程序简化为二个温度梯度,建立了鉴别MB和BVDV的二重二温式PCR方法。该方法能同时扩增MB和BVDV,扩增产物大小分别为412和170 bp。特异性试验结果显示,该方法对参试的所有毒株只扩增MB和BVDV基因组,对其它牛病原体无扩增;敏感性试验结果显示,该方法最低能同时检测到104拷贝的两种目的核酸;干扰性试验结果显示,该方法能同时检测两个模板不同浓度的组合,试验结果不受模板影响。综上,本研究所建立的二重二温式PCR方法特异、敏感、快速、简便,可应用于MB和BVDV临床鉴别诊断和流行病学调查。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 谢志勤,范晴,谢芝勋,张民秀,谢丽基,黄娇玲,张艳芳,曾婷婷,王盛,罗思思,邓显文,李孟,李丹,刘加波

关键词: 二重二温式,牛支原体,牛病毒性腹泻病毒,检测

来源: 中国动物检疫 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室

基金: 广西科技重大专项(桂科AA17204057),广西科技重点研发计划(桂科AB16380003)

分类号: S852.65;S852.62

页码: 70-75

总页数: 6

文件大小: 2629K

下载量: 125

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