导读:本文包含了激发素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:霉菌,大豆,系统,烟草,抗病性,引物,抗性。
激发素论文文献综述
李唐,曾洪梅,邱德文[1]（2010）在《激发素结构研究进展》一文中研究指出激发素(elicitins)是一类能诱导植物产生防卫反应的蛋白质类激发子。综述概述了有关激发素的结构,特别是激发素-固醇复合体结构的研究进展,并对激发素与配体固醇结合的分子机制,以及激发素的结构与生理功能之间的关系进行了探讨。(本文来源于《中国农业科技导报》期刊2010年03期）
王元琮[2]（2009）在《烟草表皮毛发育相关基因NtTTG的克隆分析及NtTTG1蛋白与激发素ParA1相互作用的研究》一文中研究指出植物的叶片表皮毛在植物抗病防卫反应中起着重要作用。目前,在拟南芥中已经克隆到了多个与表皮毛发育相关的基因,其表皮毛发育的分子遗传控制机制也已经有很多研究。但是,在烟草中表皮毛相对研究的较少,而且以往对于表皮毛防御功能的研究主要集中在表皮毛的物理结构防御作用以及其分泌物的作用方面(Severson et al, 1985;Lauel et al,2000),而对于表皮毛在外源信号识别方面的作用还知之甚少。本文依据同源性原理根据拟南芥的控制表皮毛发育的基因AtTTG1(Arabidopsis thaliana Transparent Testa Glabra 1)克隆筛选得到了烟草表皮毛发育相关基因NtTTG1 (Nicotiana tabacum Transparent Testa Glabra 1),证明了由它编码的蛋白与由卵菌分泌的蛋白类激发子ParA1的互作,另外,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)结合cDNA末端快速克隆(RACE)技术克隆到了另一个新的烟草基因NtTTG1-like,产生了该基因的沉默植株,为深入研究烟草表皮毛发育和相关功能奠定了基础。首先根据拟南芥中参与叶片表皮毛发育的几个关键基因序列分别设计引物,在烟草中筛选可以受ParA1诱导表达的同源物。发现只有AtTTG1的同源物的表达受诱导表达,AtTTGl是拟南芥中控制表皮毛发育的重要基因,该基因发生功能缺失的突变体,表现为叶片表皮毛发育起始的几乎完全丧失(Larkin et al,1999),依此克隆到NtTTGl基因。酵母双杂交显示,NtTTG1与ParA1发生互作,而不与ParA1的突变蛋白C51S发生互作。说明这个位置很可能在与其他蛋白的互作中起作用。同样,NtTTG1由苯丙氨酸替换了NtTTG1中靠近WD40结构域的丝氨酸而得到的突变蛋白S94F也不能与ParA1发生互作。说明丝氨酸的位置也在分子互作中起重要作用。Pull-down assay结果也证明ParA1与NtTTG1之间的物理互作。NtTTG1与ParA1之间的互作经两个蛋白在植物表皮毛中的亚细胞定位而进一步验证。融合有荧光蛋白RFP的NtTTG1在植物中的瞬时表达,这个融合基因在瞬时表达后主要在表皮毛中有大量的转录。荧光观察表明,NtTTG1-RFP明显的定位于表皮毛细胞的细胞膜上。荧光迭加结果表明,NtTTG1-RFP与ParAl-eGFP相结合,双分子荧光互补实验结果也验证了荧光迭加的结果,而且,这种互作发生在细胞膜附近。烟草表皮毛发育机制与拟南芥有类似之处,同时也有其特异性,为更深入的了解烟草表皮毛发育调控机制,本研究以AtTTG1与烟草中的NtTTGl序列为基础设计引物,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)结合cDNA末端快速克隆(RACE)技术,从烟草(Nicotiana tabacum) NC89品种中克隆了烟草表皮毛相关基因NtTTGl-like (Nicotiana tabacum Transparent Testa Glabra 1-like), GENBANK登录号：FJ795022,并对该基因进行了生物信息学分析。MtTTGl-like全长共1379 bp,共含6个开放阅读框(ORF),其中最长的为1029 bp,预测其编码的蛋白质序列存在4个WD40重复(WD40-repeat)的结构域,表明NtTTGl-like有与其它蛋白质结合的能力。蛋白序列同源性比对结果显示,MtTTG1-like与其他的表皮毛相关蛋白以及矮牵牛中调控花冠色素合成的蛋白AN11有较高的同源性,由此推测NtTTG1-like与烟草表皮毛的生物学功能或花冠色素的合成有关。通过RT-PCR检测到NtTTG1-like在烟草根、茎、叶、花中都有表达。为进一步研究MtTTG1-like在烟草中的作用,我们选用了NtTTG1-like 3'UTR部分,分别正反向连在载体PBSSK中的内含子两端,成功构建了NtTTG1-like的发夹沉默载体,并通过叶盘法将载体转入烟草NC89中,产生了沉默植株NtTTGl-like然后检测转基因植物中MtTTG1-like基因的表达情况,发现11号植株沉默效果较好,可以为以后的表型分析,生理生化鉴定以及深入研究该基因在烟草信号转导过程中的作用提供了材料与依据。(本文来源于《南京农业大学》期刊2009-06-01）
高保利,孙果忠,马青,朱振东,王晓鸣[3]（2009）在《非寄主植物烟草中与大豆疫霉菌激发素互作蛋白质的筛选》一文中研究指出【目的】采用酵母双杂交技术,从非寄主植物烟草中筛选与大豆疫霉菌类激发素PSE7和激发素SO-JB互作的蛋白。【方法】以PGBKT7-PSE7和PGBKT7-SOJB为诱饵质粒筛选烟草cDNA文库,得到的阳性克隆经测序后,在NCBI上进行Blast分析。【结果】PSE7和SOJB在烟草中存在几个相似的结合蛋白,表明二者具有共享的生物学功能;SOJB能与肽酶和泛素结合蛋白(与蛋白质降解有密切关系)互作,而PSE7没有筛选到类似蛋白;SOJB和PSE7均能与跨膜运输蛋白结合,PSE7与水通道蛋白结合,SOJB与铜离子转运蛋白结合,表明二者在胞质内均存在作用靶标。【结论】PSE7和SOJB最终分别从烟草中筛选出9和13个阳性互作蛋白。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2009年04期）
徐静静,王晓鸣,武小菲,朱振东[4]（2008）在《基于细胞色素氧化酶基因和激发素基因的大豆疫霉菌特异性PCR引物》一文中研究指出引起大豆疫霉根腐病的大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)是危害大豆的破坏性病原菌之一,也是我国重要的检疫性植物病原菌。简单、快速、准确的鉴定和检测技术是阻止大豆疫霉菌传入和病害早期诊断的有效工具。本研究从大豆疫霉菌细胞色素氧化酶基因Ⅱ(coxⅡ)序列和两个激发素(elicitin)家族基因EST序列中开发了3对大豆疫霉菌特异引物:Cox3-F/Cox3-R、PSEL1-F/PSEL1-R和PSEL2-F/PSEL2-R。这3对引物在大豆疫霉菌中分别扩增出450、289bp和370bp的特异性片段,其检测大豆疫霉菌基因组DNA的灵敏度分别为20、2pg/μL和2pg/μL。3对引物能够有效检测大豆疫霉菌侵染的大豆病株,可以用于病害诊断和鉴别。(本文来源于《植物保护》期刊2008年05期）
詹海燕[5]（2006）在《疫霉激发子的分离纯化和激发素基因的克隆与表达》一文中研究指出能与植物原生质膜上高度特异的蛋白受体结合从而诱导植物产生防卫反应的分子统称激发子,其中从一些真菌菌丝细胞壁或培养滤液中提取的激发子尤其受关注。真菌激发子可被用于研究植物过敏反应的机理,其编码基因有可能被用于转基因操作从而获得具有抗病性能的植物材料。本论文以一分离自长春花叶片的疫霉为材料,开展了激发子的蛋白纯化,基因分离和原核表达等研究,主要研究结果如下: 1.从疫霉培养液中通过沸水浴、硫酸铵沉淀、非变性电泳、割胶电洗脱等纯化步骤,分离得到一种分子量约为31kD的耐高温的胞外分泌型蛋白。此蛋白在低浓度下能引起烟草叶片发生过敏反应;处理烟草悬浮细胞12hr后有44.6%的细胞死亡,24hr后有96.1%的细胞死亡,表明此蛋白具有激发子活性。此蛋白的N-端氨基酸序列与一些已报道的疫霉激发子高度同源,但其分子量与已报道的疫霉激发子有明显差异,有可能是一种新的疫霉激发子。 2.真菌核糖体RNA编码基因的ITS(internal transcribed spacer)序列在种内保守性强,但在种间变异丰富,被广泛用于亲缘关系较近的分类群的系统发育研究。本实验利用rDNA-ITS序列对所用疫霉进行分子鉴定,序列同源性比对结果显示其rDNA-ITS序列与烟草疫霉的同源性高达99%以上,据此推测所用疫霉可能属于烟草疫霉。 3.以已知的Phytophthora nicotiana激发素编码基因序列设计引物,以本文所用疫霉的RNA为模板,通过RT-PCR获得了激发素编码基因,同时获得了一个第63和223碱基发生了突变的序列,此突变体的第63碱基G突变为A,但编码的第21位氨基酸未变,仍是丝氨酸:然而第223碱基由A突变成G则导致第75位氨基酸由苏氨酸变成了丙氨酸。第75位氨基酸在激发素诱导烟草过敏反应中的作用还未见报道。将此激发素基因及其突变体分别转入pGEX-4T-1原核表达载体,转化大肠杆菌,经IPTG诱导都能产生特异产物,表达产物的分子量均为36kD,恰好是激发素与GST分子量之和,表明两种表达产物是融合蛋白。这两种融合蛋白在低浓度下接种烟草叶片和处理烟草悬浮细胞,均能诱导烟草细胞死亡,处理悬浮细胞12hr后细胞死亡率均达到31%以上,处理24hr后死亡率均达到56%以上,远高于对照处理,且突变序列表达产物的作用略高于未突变序列表达产物的作用。(本文来源于《浙江大学》期刊2006-05-01）
陈广勇[6]（2005）在《烟草叶表皮毛引导激发素ParA1诱导的过敏性细胞死亡》一文中研究指出寄生疫霉产生的ParA1是一种蛋白激发子,可诱导烟草叶片细胞发生过敏性坏死反应。表皮毛是叶片上最外面的结构,起着第一道防御屏障的作用。ParA1能否引起表皮毛细胞的过敏反应?表皮毛对ParA1的反应与叶片其它组织的反应有何关系?本文着重对这两方面进行了深入研究。 本研究证实,ParA1喷施处理烟草叶片后可引起表皮毛发生微敏反应。ParA1喷施处理烟草叶片后,研究发现,表皮毛细胞细胞膜通透性增强、活性氧发生爆发和染色质浓缩。分离获得表皮毛细胞,提取RNA,RT-PCR分析表明,ParA1可诱导烟草叶片表皮毛中过敏反应标志基因hin1的表达。提取表皮毛基因组DNA,琼脂糖电泳分析表明,ParA1可诱导烟草叶片表皮毛细胞中基因组DNA的断裂。这些现象都说明ParA1诱导了表皮毛细胞的Micro-HR。 进一步研究了表皮毛与叶片其它细胞对ParA1发生微敏反应的时间顺序。结果表明,表皮毛发生微敏反应明显快于叶片其它细胞。ParA1处理烟草后,表皮毛在3个小时发生明显的细胞膜通透性增强、氧爆发和染色质凝集,而叶片其它细胞在6个小时才发生以上现象。ParA1处理后3小时可诱导表皮毛细胞内微敏反应标志基因hin1的表达,而叶片其它细胞在6小时诱导表达。表皮毛细胞在处理后15小时发生DNA断裂,而叶片其它细胞在18小时发生。 以上结果表明,表皮毛和叶片其它细胞在ParA1处理后都发生了微敏反应,且表皮毛细胞发生微敏反应的时间要早于叶片其它细胞。那么是否是叶片最外层结构——表皮毛,先接收激发子ParA1的信号,发生微敏反应,再经信号传导,引起叶片表皮细胞及叶肉细胞发生微敏反应的呢?如果这种情况存在,那么又是如何进行信号传导的呢?哪些因子在该过程中起作用?这些疑问都有待于开展进一步的研究解答。(本文来源于《南京农业大学》期刊2005-06-01）
蒋冬花,郭泽建[7]（2004）在《激发素(elicitins)研究进展》一文中研究指出激发素(elicitins)是一类能诱导植物产生防卫反应的信号分子。综述概述了elicitins的结构、理化特性、对烟草(Nicotianatabacum)的生物学活性和在抗病基因工程中的作用等。用elicitins处理茄科、十字花科等植物可诱导过敏性反应(hypersensitiveresponse,HR)和系统获得抗病性(systemicacquiredresistance,SAR)。大部分植物对elicitins无反应。elicitins基因的烟草转化可增强抗病性,为作物广谱抗病育种提供一种有效途径。通过农杆菌(Agrobacterium)介导的叶盘转化法本实验室已获得了一批广谱抗病的转elicitins基因烟草植株。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2004年03期）
蒋冬花,郭泽建[8]（2004）在《激发素与植物互作及抗病防卫信号传导》一文中研究指出激发素是一类由疫霉属 Phytophthora 等真菌分泌的,可诱导茄科、十字花科等植物过敏性反应和系统获得抗病性的蛋白类激发子。激发素与植物的互作系统为研究植物抗病防卫信号传导途径提供了一个极好的模式。最近发现:激发素具有转移甾醇的活性,而形成甾醇和激发素复合物又是激发素与受体蛋白互作和激活抗病防卫信号传导途径的前提条件,也是对最近提出的病原激发子与受体互作“保卫假说”的支持。用~(125)I 标记法,找到了激发素的受体蛋白,由分子量约为160kD 和50kD 的2个亚基构成,被认为是 Ca~(2+)通道。在激发素激活的烟草抗病防卫信号传导途径中,蛋白质的磷酸化起着至关重要的作用,抑制蛋白激酶的活性,可阻止离子交换、活性氧进发、植保素合成等多种防卫反应;Ca~(2+)参与诱导活性氧进发和植保素合成,活性氧进发与细胞死亡相关连,而植保素的合成与活性氧进发无关,过敏性反应对抗病防卫反应的建立不是必需的。激发素抗病基因工程在广谱抗病育种中具有广泛的应用前景。(本文来源于《植物保护学报》期刊2004年02期）
激发素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
植物的叶片表皮毛在植物抗病防卫反应中起着重要作用。目前,在拟南芥中已经克隆到了多个与表皮毛发育相关的基因,其表皮毛发育的分子遗传控制机制也已经有很多研究。但是,在烟草中表皮毛相对研究的较少,而且以往对于表皮毛防御功能的研究主要集中在表皮毛的物理结构防御作用以及其分泌物的作用方面(Severson et al, 1985;Lauel et al,2000),而对于表皮毛在外源信号识别方面的作用还知之甚少。本文依据同源性原理根据拟南芥的控制表皮毛发育的基因AtTTG1(Arabidopsis thaliana Transparent Testa Glabra 1)克隆筛选得到了烟草表皮毛发育相关基因NtTTG1 (Nicotiana tabacum Transparent Testa Glabra 1),证明了由它编码的蛋白与由卵菌分泌的蛋白类激发子ParA1的互作,另外,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)结合cDNA末端快速克隆(RACE)技术克隆到了另一个新的烟草基因NtTTG1-like,产生了该基因的沉默植株,为深入研究烟草表皮毛发育和相关功能奠定了基础。首先根据拟南芥中参与叶片表皮毛发育的几个关键基因序列分别设计引物,在烟草中筛选可以受ParA1诱导表达的同源物。发现只有AtTTG1的同源物的表达受诱导表达,AtTTGl是拟南芥中控制表皮毛发育的重要基因,该基因发生功能缺失的突变体,表现为叶片表皮毛发育起始的几乎完全丧失(Larkin et al,1999),依此克隆到NtTTGl基因。酵母双杂交显示,NtTTG1与ParA1发生互作,而不与ParA1的突变蛋白C51S发生互作。说明这个位置很可能在与其他蛋白的互作中起作用。同样,NtTTG1由苯丙氨酸替换了NtTTG1中靠近WD40结构域的丝氨酸而得到的突变蛋白S94F也不能与ParA1发生互作。说明丝氨酸的位置也在分子互作中起重要作用。Pull-down assay结果也证明ParA1与NtTTG1之间的物理互作。NtTTG1与ParA1之间的互作经两个蛋白在植物表皮毛中的亚细胞定位而进一步验证。融合有荧光蛋白RFP的NtTTG1在植物中的瞬时表达,这个融合基因在瞬时表达后主要在表皮毛中有大量的转录。荧光观察表明,NtTTG1-RFP明显的定位于表皮毛细胞的细胞膜上。荧光迭加结果表明,NtTTG1-RFP与ParAl-eGFP相结合,双分子荧光互补实验结果也验证了荧光迭加的结果,而且,这种互作发生在细胞膜附近。烟草表皮毛发育机制与拟南芥有类似之处,同时也有其特异性,为更深入的了解烟草表皮毛发育调控机制,本研究以AtTTG1与烟草中的NtTTGl序列为基础设计引物,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)结合cDNA末端快速克隆(RACE)技术,从烟草(Nicotiana tabacum) NC89品种中克隆了烟草表皮毛相关基因NtTTGl-like (Nicotiana tabacum Transparent Testa Glabra 1-like), GENBANK登录号：FJ795022,并对该基因进行了生物信息学分析。MtTTGl-like全长共1379 bp,共含6个开放阅读框(ORF),其中最长的为1029 bp,预测其编码的蛋白质序列存在4个WD40重复(WD40-repeat)的结构域,表明NtTTGl-like有与其它蛋白质结合的能力。蛋白序列同源性比对结果显示,MtTTG1-like与其他的表皮毛相关蛋白以及矮牵牛中调控花冠色素合成的蛋白AN11有较高的同源性,由此推测NtTTG1-like与烟草表皮毛的生物学功能或花冠色素的合成有关。通过RT-PCR检测到NtTTG1-like在烟草根、茎、叶、花中都有表达。为进一步研究MtTTG1-like在烟草中的作用,我们选用了NtTTG1-like 3'UTR部分,分别正反向连在载体PBSSK中的内含子两端,成功构建了NtTTG1-like的发夹沉默载体,并通过叶盘法将载体转入烟草NC89中,产生了沉默植株NtTTGl-like然后检测转基因植物中MtTTG1-like基因的表达情况,发现11号植株沉默效果较好,可以为以后的表型分析,生理生化鉴定以及深入研究该基因在烟草信号转导过程中的作用提供了材料与依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
激发素论文参考文献
[1].李唐,曾洪梅,邱德文.激发素结构研究进展[J].中国农业科技导报.2010
[2].王元琮.烟草表皮毛发育相关基因NtTTG的克隆分析及NtTTG1蛋白与激发素ParA1相互作用的研究[D].南京农业大学.2009
[3].高保利,孙果忠,马青,朱振东,王晓鸣.非寄主植物烟草中与大豆疫霉菌激发素互作蛋白质的筛选[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2009
[4].徐静静,王晓鸣,武小菲,朱振东.基于细胞色素氧化酶基因和激发素基因的大豆疫霉菌特异性PCR引物[J].植物保护.2008
[5].詹海燕.疫霉激发子的分离纯化和激发素基因的克隆与表达[D].浙江大学.2006
[6].陈广勇.烟草叶表皮毛引导激发素ParA1诱导的过敏性细胞死亡[D].南京农业大学.2005
[7].蒋冬花,郭泽建.激发素(elicitins)研究进展[J].农业生物技术学报.2004
[8].蒋冬花,郭泽建.激发素与植物互作及抗病防卫信号传导[J].植物保护学报.2004
论文知识图
