导读:本文包含了体细胞融合论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:体细胞,质体,牛乳,特征,形态,细胞,图像。
体细胞融合论文文献综述
刘芳君[1]（2019）在《甘蔗体细胞融合的分子基础研究》一文中研究指出甘蔗是喜温作物,甘蔗新台糖22号(ROC22)具有高产高糖等优良特性但耐寒性差,桂糖28号(GT28)是耐寒品种,用ROC22和GT28进行体细胞融合,可望获得耐寒性更强且农艺性状优良的杂交后代。但甘蔗杂合体细胞再生植株目前仍存在很大的困难,原生质体是基因功能分析检测的优质材料,可为研究体细胞融合过程中的分子机理以及解决杂合体细胞再生植株困难提供新的途径。本研究以ROC22和GT28甘蔗品种为材料,探究了甘蔗原生质体RNA提取困难的原因及影响甘蔗原生质体RNA的提取条件,筛选了最适宜甘蔗RNA提取的方法,以甘蔗幼叶和酶解后的原生质体为材料,运用转录组测序技术筛选了甘蔗体细胞融合过程中幼叶酶解前后的差异表达基因,分析了甘蔗杂合体细胞在不同激素浓度下再生相关关键基因的表达情况。研究结果表明:(1)影响甘蔗原生质体RNA提取的两大因素是原生质体RNase活性和渗透压。原生质体RNase活性与原生质体的活力呈极显着负相关,渗透压与原生质体RNase活性呈显着正相关。提取高质量的甘蔗原生质体总RNA需要保证原生质体的活力至少在70%以上,用改良Trizol法提取的甘蔗原生质体总RNA纯度好且产量高。(2)通过对甘蔗幼叶酶解前后的材料进行转录组测序,分析了甘蔗体细胞融合过程中酶解前后的基因表达差异。共得到117411个Unigene,43460个差异表达基因,其中有21123个基因上调表达,22337个基因下调表达。其中与甘蔗体细胞融合密切相关的GO term有发育过程(developmental process)、生长(growth)、细胞增殖(cell proliferation)、转录调控因子活性(transcription regulator activity)、信号转导因子活性(signal transducer activity)、抗氧化活性(antioxidant activity)、氧化胁迫(oxidative stress)、激酶活性(kinase activity)、细胞周期(cell cycle)、细胞分化(cell differentiation)、植物激素信号转导(plant hormone signal transdution)等。杂合体细胞再生相关的关键基因(细胞壁合成、细胞周期调控、细胞增殖、激素信号转导途径)在甘蔗体细胞杂合体细胞融合的不同阶段表达量差异显着,以上结果表明体细胞融合的处理过程可能在分子水平上对杂合体细胞再生植株造成一定程度的影响。(3)将甘蔗杂合体细胞在不同激素浓度下培养,研究了甘蔗杂合体细胞分别在最优和最差激素组合下的生长情况和再生关键基因的差异表达。结果表明,最优激素组合显着提高甘蔗杂合体细胞细胞壁再生速度,且有利于甘蔗杂合体细胞的增殖分裂,在培养30天时,最优激素组合培养条件下的植板率更高;选取了细胞壁合成(GAUT、CESA)、细胞周期调控(Cvclin B、Cyclin A)、细胞增殖(PSK)、生长素和细胞分裂素信号转导途径(Aux/IAA、Cyclin D3、CDC2)8个关键基因,分析了甘蔗杂合体细胞在最优和最差激素组合培养下的8个关键基因的差异表达,结果表明,荧光定量结果与杂合体细胞再生过程的生理指标一致,可见激素是通过调控杂合体细胞再生相关关键基因从而在杂合体细胞再生中起至关重要的作用。(本文来源于《广西大学》期刊2019-06-01）
郜晓晶,薛河儒,潘新,周艳青[2]（2019）在《基于NMFSNMB与GB(2D)~2PCA融合的牛乳体细胞分类》一文中研究指出牛乳体细胞中包含了多种细胞,对评价牛乳质量和诊断奶牛乳腺炎至关重要。本文以彩色显微图像为对象,研究牛乳体细胞中中性粒细胞、上皮细胞、巨噬细胞和淋巴细胞分类识别方法。为了降低高维的Gabor特征空间对分类效率的影响,提出一种基于改进的非负矩阵分解(NMFSNMB)与GB(2D)~2PCA融合的特征提取算法。第1步,利用Gabor-based(2D)~2PCA算法求得细胞图像的频域整体特征。第2步,利用NMFSNMB算法提取细胞的空域局部特征,将细胞图像分解成基矩阵和系数矩阵2部分,从中获取重要的局部信息。第3步,利用决策层融合策略完成整体与局部特征的融合,计算融合的匹配距离。最后1步,使用最近邻分类器识别细胞图像。该算法同时考虑到细胞图像的频域整体信息和空域局部信息,二者具有一定的互补性,且识别精度和识别稳定性都有所提高。实验结果表明,本文所提算法的总体精度为98. 50%,Kappa系数为0. 985,分类结果具有较高的可信度。本文算法有效地结合了两种算法的优点,提高了识别系统的准确率和稳定性,同时识别速度也没有受到影响。(本文来源于《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
章潇俪,薛河儒,郜晓晶,周艳青[3]（2018）在《基于多特征融合与RF的牛乳体细胞分类与识别》一文中研究指出牛乳体细胞是牛乳质量评价和乳腺炎诊断的一项重要指标。利用图像处理技术对牛乳体细胞进行精准快速的识别,能够为诊断乳腺炎提供更加有效的途径。提出了基于多特征融合与随机森林的牛乳体细胞识别算法,首先从细胞核中提取8种不同的形态特征,然后与细胞的9个颜色特征、16个纹理特征进行特征融合,最后将结果输入到随机森林(Random Forest)分类器中进行特征匹配,识别率达到了95. 75%。(本文来源于《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》期刊2018年06期）
郜晓晶[4]（2018）在《基于特征融合的多形态牛乳体细胞分类识别的研究》一文中研究指出牛乳体细胞数目的检测方法有很多,现在商业上常用的3种检测方法是加利福尼亚细胞数测定法、pH值检测法和电子计数法。这些方法存在操作步骤繁琐、设备昂贵或需经常校正等问题,只适合大批量样本集中测定。当检测结果异常时,则需要使用直接镜检法重新测定。因为直接镜检法是体细胞计数的标准方法,最为精确和严格。进一步按体细胞的种类分别计数能够检测乳腺炎的致病菌类型、感染程度以及对产奶量的影响,便于及时采取相应的治疗方案,防止疾病扩散。与血液细胞图像相比,虽然牛乳体细胞中不包含红细胞,但是牛乳中含有大量的乳脂、乳蛋白和碎片,会对图像产生噪声干扰,增加了图像处理过程中的不确定性因素。本文针对上述问题,以荷斯坦奶牛为研究对象,重点解决细胞分割、多形态特征融合等问题,实现中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和上皮细胞的分类识别,完成的主要工作如下:(1)利用不确定理论的云模型获取目标的最佳阈值。根据体细胞图像中细胞核和背景的灰度分布特点,分别生成细胞核和背景的云模型,利用云模型的数字特征超熵提出新的阈值判断准则,实现细胞核的提取以及体细胞图像二值化。判断准则最大化的目的是更精确、更全面地挖掘目标集,适当降低符合正态分布的要求,增大灰度值的容忍度。实验证明该方法二值化效果好、计算复杂度低、性能稳定,具有色差不变性,作为后续体细胞图像分割的首选阈值化方法,可获得精确的分割结果。(2)利用改进的分水岭算法完成图像分割。第一步采用两次倒角模板扫描二值图完成距离变化,根据距离图得到初始种子点,以种子点的空间信息为判断准则,合并冗余种子点实现优选;第二步根据优选后的种子点重构距离图,采用快速侵入分水岭算法实现图像的初分割;第叁步根据相邻区域边缘的灰度相似性准则实现区域合并,有效地抑制初分割阶段带来的过分割现象。实验表明二次分割的结果与病理专家的鉴定结果很接近。本文算法鲁棒性强,不受细胞形状的影响,对强粘连细胞的分割处理能力也强。(3)利用Gabor-based(2D)~2PCA算法求得细胞的频域整体特征。不同尺度和方向的Gabor滤波器将图像分解为较全面的频域特征,组成高维Gabor空间。但是Gabor空间中特征维数太高,采用(2D)~2PCA在行和列两个方向上同时降维,减少特征维数、降低计算复杂度。图像在采集过程中无法避免噪声的干扰,而Gabor滤波器抗噪能力强,(2D)~2PCA可提取最大涵盖信息量的特征。实验证明Gabor-based(2D)~2PCA算法运行速度快、计算量小及抗干扰能力强,显着地提高细胞图像识别效率。利用非负矩阵分解算法提取细胞的空域局部特征,该算法将细胞图像分解成基矩阵和系数矩阵两部分,从中获取重要的局部信息。(4)利用决策层融合策略完成整体与局部特征的融合。首先分别计算整体和局部特征的匹配距离,融合策略为加权和法和零均值归一化法,然后计算融合的匹配距离,最后使用最近邻分类器识别细胞图像。该算法同时考虑到细胞图像的频域整体信息和空域局部信息,二者具有一定的互补性,且识别精度和识别稳定性都有所提高。实验结果验证算法的有效性和稳定性。(5)利用本文提出的基于RKSGA-SVM算法实现体细胞图像识别。首先单独提取4类细胞的颜色特征、形态特征和纹理特征,其中形态特征包括几何特征和不变矩特征。采用ReliefF算法计算所有特征的权重,根据预设阈值得到初选特征集,然后利用K-S检验剔除冗余特征,得到高级优选特征集。最后在高级优选特征集上,每类特征值乘以相关系数,得到加权优选特征集。根据各个特征在训练集上的表现确定相关系数。本文所提算法得到的加权优选特征集具有均衡分类精度、剔除冗余特征及降低特征维数等优点。该特征集在保证高分类精度的前提下,最大程度降低特征维数,减少数据计算量,提高运算效率,节约存储空间。实验证明本文所提特征选择方法可行,更适用于体细胞分类过程中特征集的提取。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2018-06-01）
张亚莎[5]（2016）在《柑橘体细胞融合创制叁倍体无核新种质及融合再生植株的遗传鉴定》一文中研究指出柑橘在我国农业经济上具有重要地位,柑橘的优质丰产是其在国际柑橘市场上的核心竞争力。无核一直是柑橘育种追求的目标性状。细胞融合技术,为柑橘无核育种提供了一条快捷的途径,即通过融合单倍体(n)原生质体与二倍体(2n)原生质体获得叁倍体。基于这一思路,本研究利用‘早金’甜橙单倍体愈伤系与其它6个二倍体有核柑橘品种的叶肉或愈伤亲本融合,旨在获得综合双亲优点的叁倍体新种质。另外,本研究采用SSR分子标记对实验室前期获得的一批融合再生植株进行了倍性和遗传分析。主要研究结果如下:1.单倍体愈伤原生质体+二倍体叶肉原生质体融合创制叁倍体。以‘早金’甜橙单倍体愈伤系Fa为亲本,分别与6个二倍体种间良种的叶肉原生质体融合。各组合融合产物在后期培养过程中均逐渐死亡,经多次(每个组合至少3次)尝试都未再生成功,表明单倍体愈伤原生质体与二倍体叶肉原生质体融合较难再生。2.单倍体愈伤原生质体+二倍体愈伤原生质体融合创制叁倍体。分别以‘早金’甜橙单倍体愈伤系Fa、Ec为亲本,与‘默科特’橘橙(MCK)愈伤组织原生质体融合,得到Fa+MCK组合的再生愈伤组织,倍性测定为二倍体与四倍体的混倍体,得到Ec+MCK组合的再生愈伤组织、胚状体,倍性测定为五倍体。3.3个组合融合产物的再生与倍性分析。本研究对实验室前期留下的G1+‘卡特’夏橙、G1+‘Itabori’甜橙、G1+‘默科特’橘橙叁个组合的融合产物进行后续培养,最终分别成功获得G1+‘卡特’夏橙、G1+‘Itabori’甜橙、G1+‘默科特’橘橙再生植株31株、14株、4株。经流式细胞仪倍性检测,3个组合的所有再生植株均为四倍体。4.3个组合再生植株的遗传鉴定。采用SSR分子标记,分别对G1+‘卡特’夏橙、G1+‘Itabori’甜橙、G1+‘默科特’橘橙3个组合的再生植株进行胞质基因组、核基因组的遗传来源鉴定,结果表明:3个组合的再生植株都为四倍体体细胞杂种,其核基因组来源于两方亲本,同时可能发生了一定程度的重组交换,G1+‘卡特’夏橙、G1+‘Itabori’甜橙两个组合的线粒体和叶绿体基因组都来自于G1。(本文来源于《华中农业大学》期刊2016-06-01）
孙宇涵,王欢,李云[6]（2016）在《浅谈林木体细胞融合技术》一文中研究指出为了研究利用体细胞融合技术培育新型林木品种,综述了国内外近10多年的林木原生质体培养、体细胞融合技术以及其在林木育种工作中的应用研究,发现前人在原生质体的材料选择、解离和培养技术方法上获得了较大的进展,并在体细胞融合方法、方式和后期杂种细胞筛选方面取得了丰硕的成果,但相关研究还存在不足,今后还需在林木体细胞融合技术的可融合物种范围、影响因素和生理生化机制等方面开展更加深入的系统研究。(本文来源于《中国农学通报》期刊2016年04期）
Kiflemariam,S,Mignardi,M,Ali,M,A,魏建国,许春伟[7]（2015）在《在前列腺癌中通过原位测序识别TMPRSS2-ERG融合基因转录体、体细胞点突变和基因表达水平》一文中研究指出易位导致上皮性肿瘤的发生、发展,特别在前列腺癌的发展过程中有着十分重要的作用。为了更好的理解融合基因转录体的作用和阐明多灶性肿瘤的克隆组成,作者发明了一种多通道原位检测和识别融合基因转录体表达的技术。与免疫组化相比分为TMPRSS2-ERG融合阴性和融合阳性的前列腺肿瘤。在人类前列腺癌组织中,作者对最普遍存在的TMPRSS2-ERG融合变异体进行了识别和量化,第一次通过原位测序法直接测定了不同基因融合转录体的比例。此(本文来源于《临床与实验病理学杂志》期刊2015年01期）
涂艺声,吉枝单,何紫嫣,周惠乔[8]（2013）在《百合原生质体制备与体细胞电融合参数的优化》一文中研究指出体细胞电融合(cell electrofusion)是一种迅速发展的细胞工程技术,在体细胞杂交研究领域得到了广泛的应用。细胞电融合利用细胞在相对电极之间的介电电泳,诱导细胞串珠样排列,通过电极间附加较高电场强度的电脉冲使相互接触的细胞发生电穿孔,进而细胞膜发生重新融合。融合后的细胞增加了新的遗传物质,可能产生新的生物特性。本报告以抗逆性好、抗病强的庐山野生卷丹百合和易感病的江西特有食用百合品种龙芽百合两种试管(本文来源于《第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会论文汇编》期刊2013-08-19）
张凌云[9]（2013）在《苜蓿原生质体分离与体细胞融合条件的研究》一文中研究指出苜蓿是世界上栽培历史最悠久,应用分布广,最经济的牧草饲料,但为了满足生产发展的需要,改良牧草遗传特性,创造符合需求的优良品种成为长久不衰的课题。植物原生质体融合技术是克服远缘杂交困难、有性杂交不亲和扩大遗传变异的一种有效手段,为改良苜蓿抗性、产量和品质提供新途径。本试验以具有抗寒耐旱的俄罗斯杂花苜蓿(Medicago sativa subsp. Varia)和抗逆性不足的甘农4号紫花苜蓿(Medicago sativa L. cv. Gannong No.4)为试验材料,研究不同激素配比对愈伤组织诱导、分化及再生体系的影响；同时在此基础上研究酶液组合、渗透压调节物、酶解时间、激素及培养密度等因素对其愈伤组织原生质体分离、培养的影响；并对二种苜蓿的原生质体非对称融合的细胞失活处理、电场条件、融合密度等影响因素进行研,为进一步对苜蓿及其他牧草种间体细胞融合的研究奠定基础,也是本研究的主要目的之一。试验结果表明：1.俄罗斯杂花苜蓿子叶愈伤组织诱导最佳培养基为：MS+1.0mg·L-12,4-D+1.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-1NAA,出愈率达91.1%；下胚轴愈伤组织诱导最佳培养基为：MS+1.0mg·L-12,4-D+0.5mg·L-16-BA+0.5mg·L-1KT,出愈率达93.3%；甘农4号紫花苜蓿子叶和下胚轴愈伤组织诱导最佳培养基均为MS+2.0mg·L-12,4-D+1.5mg·L-16-BA++1.5mg·L-1NAA,出愈率分别为88.9%和92.2%。2.俄罗斯杂花苜蓿愈伤组织的最佳分化培养基为：MS+0.5mg· L-1KT+0.3mg·L-1NAA,子叶、下胚轴愈伤组织的分化率分别达91.1%,83.3%；甘农4号紫花苜蓿愈伤组织的最佳分化培养基为MS+0.5mg·L-1KT+0.5mg·L-1NAA,子叶、下胚轴愈伤组织的分化率分别达88.9%,82.2%；3.俄罗斯杂花苜蓿和甘农4号紫花苜蓿分化苗的最佳生根培养基均为：1/2MS+1.0mg·L-1IBA,生根率分别为96.7%和86.7%。4.俄罗斯杂花苜蓿下胚轴愈伤组织继代培养至14d时的游离性最佳,最适酶液组合为2%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.3%离析酶,最佳渗透压为0.55mol—L-1甘露醇,最佳酶解时间为12h,最适预处理措施为CPW-11溶液质壁分离1h,在此最佳酶解条件下,俄罗斯杂花苜蓿下胚轴愈伤组织的原生质体产量和活力可达3.40×106个·g-1和73.1%；5.甘农4号紫花苜蓿下胚轴愈伤组织继代培养至12d时的游离性最佳,最适酶液组合为2%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.3%半纤维素酶,最佳渗透压为0.6mol—L-1甘露醇,最佳酶解时间为10h～12h,最适预处理措施为CPW-11溶液质壁分离1h,在此最佳酶解条件下,甘农4号紫花苜蓿下胚轴愈伤组织的原生质体产量和活力可达3.34×106个·g-1和82.8%;6.俄罗斯杂花苜蓿下胚轴愈伤组织分离所得原生质体在固-液综合培养时,最适激素组合为1.5mg·L-2,4-D+1.0mg·L-16-BA,最适原生质体培养密度为3×105个·ml-1,此时细胞分裂频率可达36.3%,褐化程度轻,易形成结构致密、可持续分裂的细胞团。7.甘农4号紫花苜蓿下胚轴愈伤组织分离所得原生质体在固-液综合培养时,最适激素组合为2.0mg·L-12,4-D+1.0mg·L-16-BA,最适原生质体培养密度为3×105个·ml-1,此时细胞分裂频率可达37.9%,褐化程度轻,易形成结构致密、可持续分裂的细胞团。8,在融合前失活预处理中,俄罗斯杂花苜蓿原生质体在紫外灯下辐射5min是使其细胞核失活的最适条件；甘农4号紫花苜蓿原生质体经6mmol·L-IOA钝化处理是使其细胞质失活的最适条件；9.俄罗斯杂花苜蓿原生质体与甘农4号紫花苜蓿原生质体电融合的最适条件为：双亲原生质体密度范围均为3×105个·ml-1-5×105个·ml-1,交流电场强度为15V·cm-1～20V·cm-1,交流电场频率为2000kHz～2500kHz,直流脉冲场强为200V·cm-1～250V·cm-1,脉冲宽幅为40μs,直流脉冲3次,此时有效融合率可达13.8%。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2013-06-01）
吴畏[10]（2013）在《基于微流控芯片的细胞电融合诱导小鼠体细胞重编程的去甲基化机制研究》一文中研究指出背景：已分化的体细胞可以通过体细胞核移植、干细胞提取物共培养、特定因子诱导和细胞融合等方法重编程为多能干细胞，在再生医学领域有巨大的应用前景。其中体细胞核移植技术难度大、成功率低，干细胞提取物共培养和特定因子诱导的方法也都存在耗时长、效率低下等缺点。相比之下，细胞融合诱导体细胞重编程耗时最短，重编程效率也最高，但融合细胞为四倍体，限制了其临床应用，而更适合于用作体细胞重编程机制研究。细胞融合主要有化学方法(如聚乙二醇诱导融合法)、生物方法(如病毒诱导融合法)和物理方法(如电场诱导融合法)叁种，这叁种方法均已应用于诱导体细胞重编程的研究。其中聚乙二醇在诱导细胞融合过程中，对细胞损伤较大、残留细胞毒性且融合率较低，而病毒诱导细胞融合则存在病毒制备困难、操作复杂、灭活病毒的效价差异大、实验重复性差等缺点。电融合操作简单、无化学毒性、对细胞损伤小、融合率也更高，已成为研究体细胞重编程的重要手段。在重编程过程中，体细胞多能性基因的表观遗传学修饰是体细胞重编程的关键所在。这些表观遗传学的修饰包括：染色质重塑、组蛋白修饰和DNA的去甲基化，其中DNA去甲基化在体细胞重编程中尤为重要。虽然在哺乳动物体内尚未发现明确的去甲基化酶，但已有研究证实AID(Activation-induced cytidine deaminase)和Tet(ten-eleven translocation)酶可能分别通过对核酸的脱氨酶作用和羟基化实现DNA的去甲基化。目的：采用本实验室自主研发并经过改良的微流控电融合芯片，进行小鼠成纤维细胞和小鼠胚胎干细胞电融合实验，通过流式细胞术筛选出融合细胞，研究融合细胞的细胞生物学特性，证实融合细胞发生了体细胞重编程，并探讨体细胞重编程的去甲基化机制。方法及结果：本研究分为两个部分第一部分：细胞电融合及融合细胞的细胞生物学特性研究1、通过将非融合区用绝缘材料封闭，使电场集中在融合区，改良了微流控电融合芯片，构建了高通量的细胞电融合平台，通过此平台将转染了绿色荧光的mESCs与转染了红色荧光的NIH3T3细胞进行电融合，其平均排队率为44.35%，平均融合率为59.88%，实现了NIH3T3/RFP和mESCs/GFP的高效融合。2、通过流式细胞仪筛选出同时表达绿色荧光和红色荧光的融合细胞，在小鼠胚胎干细胞培养基中进行培养，发现其能够形成类似于mESCs的克隆。qPCR实验发现，NIH3T3细胞不表达多能性基因OCT4和Nanog，mESCs和融合细胞OCT4和Nanog基因mRNA水平较高，且两者统计学无差异。而融合细胞体细胞标记性基因CKAP2和LaminA/C表达下调，与NIH3T3相比分别下降了89%和95%，且融合细胞和mESCs的CKAP2和LaminA/C基因mRNA水平无统计学差异，说明NIH3T3/RFP和mESCs/GFP融合后，融合细胞的多能性基因和体细胞标记性基因表达水平均达到了与mESCs类似的水平，证实了融合细胞发生了体细胞重编程。第二部分：基于微流控芯片的体细胞重编程去甲基化机制的研究1、利用斑点杂交方法检测细胞融合前后甲基化水平的变化，发现NIH3T3的5mC水平较高，几乎不表达5hmC，而mESCs和融合细胞则5hmC水平较高，几乎不表达5mC。通过BSP检测，发现NIH3T3的OCT4和Nanog基因启动子区的甲基化比例分别为64.38%和80%，mESCs的OCT4和Nanog基因启动子区的甲基化比例则为0%和4%，细胞融合后融合细胞OCT4和Nanog基因启动子区甲基化水平也分别降至16.88%和20%。再通过glucMS-qPCR方法检测发现融合细胞在融合后24h、48h、72h和96h的OCT4基因启动子区的甲基化比例分别为85.51%、64.06%、54%和28.04%，各时间点之间甲基化比例有统计学差异，说明融合细胞逐步发生了去甲基化。2、qPCR检测发现，细胞融合后融合细胞的AID,Tet1,Tet2表达上调，分别是NIH3T3的2.9倍，10.5倍和14.4倍，是mESCs的2.1倍，2.2倍和2.3倍，叁者之间均有统计学差异。Tet3表达下调，与NIH3T3相比下降了94%，与mESCs水平相似，融合细胞与mESCs两者之间无统计学差异。而NIH3T3,mESCs和融合细胞的TDG和MBD4基因表达水平相似，叁者之间无统计学差异。免疫荧光检测也发现了AID在融合细胞和mESCs表达较高，而在NIH3T3中几乎不表达，提示Tet1,Tet2，AID,TDG和MBD4可能参与了融合细胞的去甲基化过程。结论：1、通过改良的微流控电融合芯片，构建了高通量的细胞电融合平台，可实现mESCs与NIH3T3的高效融合，使体细胞重编程为多能性干细胞。2、细胞电融合能够使体细胞多能性基因OCT4和Nanog启动子区去甲基化，从而实现了体细胞重编程过程中关键的表观遗传学修饰。3、细胞融合后AID、Tet1、Tet2基因表达上调，Tet3基因表达明显下降，TDG和MBD4基因表达水平无明显变化，提示AID、Tet1、Tet2、TDG和MBD4可能参与了细胞电融合过程中的DNA去甲基化过程。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2013-05-01）
体细胞融合论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
牛乳体细胞中包含了多种细胞,对评价牛乳质量和诊断奶牛乳腺炎至关重要。本文以彩色显微图像为对象,研究牛乳体细胞中中性粒细胞、上皮细胞、巨噬细胞和淋巴细胞分类识别方法。为了降低高维的Gabor特征空间对分类效率的影响,提出一种基于改进的非负矩阵分解(NMFSNMB)与GB(2D)~2PCA融合的特征提取算法。第1步,利用Gabor-based(2D)~2PCA算法求得细胞图像的频域整体特征。第2步,利用NMFSNMB算法提取细胞的空域局部特征,将细胞图像分解成基矩阵和系数矩阵2部分,从中获取重要的局部信息。第3步,利用决策层融合策略完成整体与局部特征的融合,计算融合的匹配距离。最后1步,使用最近邻分类器识别细胞图像。该算法同时考虑到细胞图像的频域整体信息和空域局部信息,二者具有一定的互补性,且识别精度和识别稳定性都有所提高。实验结果表明,本文所提算法的总体精度为98. 50%,Kappa系数为0. 985,分类结果具有较高的可信度。本文算法有效地结合了两种算法的优点,提高了识别系统的准确率和稳定性,同时识别速度也没有受到影响。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体细胞融合论文参考文献
[1].刘芳君.甘蔗体细胞融合的分子基础研究[D].广西大学.2019
[2].郜晓晶,薛河儒,潘新,周艳青.基于NMFSNMB与GB(2D)~2PCA融合的牛乳体细胞分类[J].内蒙古农业大学学报(自然科学版).2019
[3].章潇俪,薛河儒,郜晓晶,周艳青.基于多特征融合与RF的牛乳体细胞分类与识别[J].内蒙古农业大学学报(自然科学版).2018
[4].郜晓晶.基于特征融合的多形态牛乳体细胞分类识别的研究[D].内蒙古农业大学.2018
[5].张亚莎.柑橘体细胞融合创制叁倍体无核新种质及融合再生植株的遗传鉴定[D].华中农业大学.2016
[6].孙宇涵,王欢,李云.浅谈林木体细胞融合技术[J].中国农学通报.2016
[7].Kiflemariam,S,Mignardi,M,Ali,M,A,魏建国,许春伟.在前列腺癌中通过原位测序识别TMPRSS2-ERG融合基因转录体、体细胞点突变和基因表达水平[J].临床与实验病理学杂志.2015
[8].涂艺声,吉枝单,何紫嫣,周惠乔.百合原生质体制备与体细胞电融合参数的优化[C].第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会论文汇编.2013
[9].张凌云.苜蓿原生质体分离与体细胞融合条件的研究[D].甘肃农业大学.2013
[10].吴畏.基于微流控芯片的细胞电融合诱导小鼠体细胞重编程的去甲基化机制研究[D].第叁军医大学.2013
论文知识图
