丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740的克隆表达和免疫原性分析

论文摘要

【目的】构建表达丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740的重组表达菌,为Mmc-3740蛋白的进一步研究与应用奠定基础。【方法】采用PCR技术从Mmc-47中扩增出该基因,进行克隆、测序,将克隆质粒与pET-28a分别双酶切,回收正确的片段进行连接构建重组表达质粒,转化至表达菌BL21（DE3）中,IPTG诱导表达,产物用SDS-PAGE检测,用镍柱对其纯化后免疫小鼠获得高免血清,并进行Western-blot验证。【结果】成功构建了克隆和表达载体,重组菌表达目的蛋白大小约21 ku。表达产物通过镍柱纯化后可得到单一的目的蛋白条带,Western-blot检测结果显示所表达的目的蛋白有较好的免疫原性。【结论】成功在BL21（DE3）宿主菌内表达了Mmc-3740重组蛋白。

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类型: 期刊论文

作者: 张靖鹏,江锦秀,林裕胜,游伟,胡奇林

关键词: 丝状支原体山羊亚种,特异基因,原核表达,免疫原性

来源: 福建农业学报 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技

专业: 畜牧与动物医学

单位: 福建省农业科学院畜牧兽医研究所

基金: 国家重点研发计划项目（2016YFD0500906）,福建省农业科学院科技创新团队建设项目（2017-09）,福建省农业科学院青年人才创新基金（YC-20180-3）福建省农业科学院科技创新团队建设项目(PC2018-8),福建省科技计划公益类专项（2019R1026-17）

分类号: S858.27

DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.10.002

页码: 1124-1128

总页数: 5

文件大小: 1546K

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