首页> 正文

圈养大熊猫口腔源葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

2020-12-02阅读(141)

圈养大熊猫口腔源葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

论文摘要

葡萄球菌属（Staphylococcus spp.）是一种在人、动物和环境中广泛存在的机会性致病菌,动物源葡萄球菌还可通过吞咽、舔舐鼻部或伤口,进入消化道、呼吸道甚至是血液中引起全身性疾病,在口腔疾病如龋病、牙周炎、牙髓炎等唾液中也能分离出大量的葡萄球菌。目前国内外已有部分报道在大熊猫的兽舍、致死性肺炎的呼吸道及牙齿异常的口腔中均分离出较多的葡萄球菌,但关于大熊猫源葡萄球菌的耐药性研究却未见报道。因此,本课题旨在研究大熊猫口腔源可培养细菌的种类及口腔源葡萄球菌的耐药性。试验选取幼年及成年大熊猫各15只,采集其口腔唾液样品60份（每只2份）。细菌分离纯化后,基于16s rRNA基因鉴定口腔可培养菌群种类,选取在大熊猫口腔细菌中分离最多的疑似葡萄球菌,进一步通过革兰氏镜检、生化鉴定、凝固酶试验结合鉴定葡萄球菌的种类。采用K-B纸片法及多重PCR研究葡萄球菌对12种抗生素的耐药情况及12种耐药基因的携带情况。结果表明,从大熊猫样本中分离到302株可培养细菌,主要分属于31个菌属的78种,以革兰氏阳性菌为主,葡萄球菌属、链球菌属、假单胞菌属、罗思氏菌属、肠杆菌属、金黄杆菌属、鞘氨醇杆菌属、不动杆菌属、克雷伯氏菌属为口腔优势菌群。其中共鉴定出了80株凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）（幼年39株,成年41株）,未分离到凝固酶阳性葡萄球菌。78.75%的待测菌至少对一种抗生素耐药,超过一半的菌株呈多重耐药,五重耐药率达6.25%。幼年大熊猫葡萄球菌以耐2种抗生素为主（28.21%）,成年大熊猫葡萄球菌以耐3种抗生素为主（31.71%）。其中以万古霉素的耐药率最高（68.75%）,其次是阿奇霉素（51.25%）,氨基糖苷类和四环素的耐药性均低于20%,仅幼年大熊猫葡萄球菌对环丙沙星、氯霉素敏感。同时还分离出48.75%的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）,通过比较发现MRCNS的耐药性远高于No-MRCNS。在80株待测菌的耐药基因检测中,68.75%的菌株至少分离出1种抗性基因,以BlaZ基因分离率最高（41.25%）,其次是mecA（40.00%）,cfr（38.75%）,VanB（25.00%）。80株葡萄球菌对万古霉素类、β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氯霉素类抗性基因的携带情况分别以VanB、BlaZ/mecA、aacA-aphD、erma/ermb、tetK和cfr基因为主。幼年大熊猫葡萄球菌主要以携带1-2种耐药基因为主（82.61%）;成年大熊猫葡萄球菌主要以携带2-4种耐药基因为主（75.00%）,其中最高携带了6种耐药基因。综上所述,80株葡萄球菌具有广泛的耐药性,其中以MRCNS的耐药水平较高,且成年大熊猫葡萄球菌的耐药性及携带耐药基因率均高于幼年大熊猫,证明大熊猫口腔源葡萄球菌已具有一定程度的耐药性,因此需加强对大熊猫及其生活环境的耐药监测,控制和减少耐药菌株的产生及传播。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 缩略词表
  • 第一章 文献综述
  •   1.大熊猫口腔细菌的研究概况
  •     1.1 大熊猫唾液的采集方法
  •     1.2 大熊猫口腔疾病及口腔细菌
  •     1.3 大熊猫口腔细菌的耐药性
  •   2.葡萄球菌的耐药性研究概况
  •     2.1 葡萄球菌属的分类及致病性
  •       2.1.1 凝固酶阳性葡萄球菌
  •       2.1.2 凝固酶阴性葡萄球菌
  •     2.2 不同来源的葡萄球菌流行性
  •       2.2.1 动物源
  •       2.2.2 人类源
  •       2.2.3 环境源
  •     2.3 葡萄球菌对不同抗生素的耐药性研究
  •       2.3.1 对万古霉素类的耐药性
  •       2.3.2 对β-内酰胺类的耐药性
  •       2.3.3 对四环素的耐药性
  •       2.3.4 对氨基糖苷类的耐药性
  •       2.3.5 对氯霉素的耐药性
  •       2.3.6 对大环内酯类的耐药性
  •   3.目的与意义
  • 第二章 大熊猫口腔源葡萄球菌的分离鉴定
  •   1 材料与方法
  •     1.1 试验材料
  •       1.1.1 样品采集
  •       1.1.2 主要试剂
  •       1.1.3 主要仪器设备
  •     1.2 试验方法
  •       1.2.1 口腔细菌培养
  •       1.2.2 葡萄球菌的分离鉴定
  •       1.2.3 葡萄球菌的生化鉴定
  •       1.2.4 细菌DNA的制备
  •       1.2.5 细菌16S r RNA基因PCR扩增
  •       1.2.6 序列测定与分析
  •   2 结果
  •     2.1 口腔细菌的分离鉴定
  •     2.2 葡萄球菌分离培养结果
  •     2.3 生化试验
  •     2.4 葡萄球菌种的鉴定
  •   3 讨论
  •   4 小结
  • 第三章 大熊猫口腔源葡萄球菌的耐药性分析
  •   1 材料与方法
  •     1.1 试验材料
  •       1.1.1 菌种来源
  •       1.1.2 主要试剂
  •       1.1.3 主要仪器设备
  •     1.2 试验方法
  •       1.2.1 体外药物敏感试验
  •       1.2.2 引物设计
  •       1.2.3 耐药基因的检测
  •   2.结果
  •     2.1 药敏试验结果
  •     2.2 大熊猫葡萄球菌菌种之间的耐药性差异
  •     2.3 耐药基因的检测
  •     2.4 抗生素敏感型与耐药基因型的相关性
  •   3 讨论
  •   4.小结
  • 全文结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简历

    • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 冯帆

    导师: 彭广能,李先波

    关键词: 大熊猫,口腔细菌,凝固酶阴性葡萄球菌,耐药率,耐药基因

    来源: 四川农业大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 四川农业大学

    基金: “成都大熊猫繁育研究基金会项目”(CPF2015-04)(CPF2015-05),(CPF2015-07)

    分类号: S852.61

    DOI: 10.27345/d.cnki.gsnyu.2019.000954

    总页数: 58

    文件大小: 2210k

    下载量: 8

    相关论文文献

    • [1].鸭源葡萄球菌的分离鉴定和毒力基因检测及其与致病性相关性研究[J]. 中国兽医科学 2018(02)
    • [2].夏、冬两季猪源葡萄球菌耐药情况比较[J]. 中国畜牧兽医 2017(05)
    • [3].骨髓中分离出沃氏葡萄球菌1列[J]. 中国保健营养 2012(16)
    • [4].一例路邓葡萄球菌所致足部脓肿[J]. 甘肃科技纵横 2019(12)
    • [5].蜂源幼虫缓慢葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验研究[J]. 甘肃畜牧兽医 2020(02)
    • [6].鸡舍空气中葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 湖北农业科学 2020(16)
    • [7].发病罗非鱼苗沃氏葡萄球菌的分离与鉴定[J]. 热带生物学报 2013(01)
    • [8].畜禽葡萄球菌病的分析诊断和治疗要点[J]. 饲料博览 2019(05)
    • [9].路邓葡萄球菌的鉴定、耐药和临床感染分析[J]. 中华实验和临床感染病杂志(电子版) 2018(01)
    • [10].1株猫葡萄球菌的分离与初步鉴定[J]. 中国兽医杂志 2016(06)
    • [11].包头地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌耐药性研究[J]. 现代农业 2016(09)
    • [12].泌尿系感染中葡萄球菌的耐药性分析[J]. 职业与健康 2012(12)
    • [13].傅立叶变换红外光谱技术对2种葡萄球菌的快速分类鉴定[J]. 安徽农业科学 2012(27)
    • [14].仓鼠源缓慢葡萄球菌的分离鉴定及生物学特性研究[J]. 动物医学进展 2010(07)
    • [15].路邓葡萄球菌[J]. 中国感染与化疗杂志 2009(03)
    • [16].路邓葡萄球菌的质谱技术鉴定及耐药谱、临床感染特征分析[J]. 山东医药 2020(15)
    • [17].空气环境中葡萄球菌的鉴定及耐药性分析[J]. 环境与健康杂志 2018(02)
    • [18].猪源葡萄球菌中氟苯尼考耐药基因及其移动元件检测分析[J]. 中国农业科技导报 2018(11)
    • [19].血液分离利奈唑胺耐药头状葡萄球菌耐药性及相关临床特征分析[J]. 中国感染与化疗杂志 2017(04)
    • [20].猪肉和牛奶源葡萄球菌耐药性调查[J]. 中国畜牧兽医 2013(10)
    • [21].肉葡萄球菌对香肠发色的影响[J]. 肉类研究 2012(02)
    • [22].儿科血培养标本分离葡萄球菌耐药性分析[J]. 国际检验医学杂志 2012(08)
    • [23].临床标本中葡萄球菌的检测及耐药性研究[J]. 检验医学与临床 2011(02)
    • [24].雪貂葡萄球菌的分离与鉴定[J]. 中国比较医学杂志 2010(08)
    • [25].金黄色葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征16例分析[J]. 中国误诊学杂志 2009(16)
    • [26].夫西地酸对葡萄球菌体外抗菌作用研究[J]. 中国抗生素杂志 2008(03)
    • [27].牛羊场环境气载葡萄球菌浓度及气溶胶粒谱特征分析[J]. 中国兽医杂志 2019(07)
    • [28].木糖葡萄球菌和肉葡萄球菌混合发酵剂对腊肉品质的影响[J]. 食品科学 2018(22)
    • [29].山西省獭兔源葡萄球菌16s基因序列及进化树分析[J]. 中国养兔 2018(05)
    • [30].临床分离葡萄球菌的耐药性监测[J]. 河北医科大学学报 2015(06)

    标签：;  ;  ;  ;  ;  

    圈养大熊猫口腔源葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕论降 版权所有 鄂ICP备12018319号-6