波尔山羊胚胎移植影响因素的研究

波尔山羊胚胎移植影响因素的研究

权富生[1]2010年在《山羊和绵羊超数排卵及规模化胚胎移植技术研究》文中研究说明提高山、绵羊体内胚胎生产的效率及胚胎移植后母羊妊娠率和胚胎成活率,对促进优良品种扩繁及良种推广具有重要意义。本研究以国内引进的优良肉羊品种波尔山羊、无角道塞特绵羊为对象,进行了有关胚胎移植关键技术及相关配套技术的研究。通过研究得到了以下结果:1.采用宁波FSH、中科院FSH和宁波+中科院FSH进行波尔山羊超排,叁种优化后的超排方案分别回收总胚胎数为17.82±8.41枚、17.33±8.84枚和17.97±9.88枚,回收可用胚胎数分别为14.97±7.56枚、13.78±6.15枚和14.31±6.63枚。表明国产FSH只要超排方案设计合理,同样可以得到好的母羊超排反应和理想的胚胎产量。2.波尔山羊重复超排4次,当连续超排间隔为2个月时,第一次、第二次、第叁次和第四次的有效反应供体比例分别为93.99%、80.00%、63.64%和50.00%,回收可用胚胎数分别为14.80±6.91枚、14.00±7.01枚,9.09±7.18枚和7.83±6.09枚。当超排时间间隔为1年时,供体母羊重复超排4次,有效供体利用率分别为95.00%、85.00%、81.25%和70.83%,回收可用胚胎数各重复超排次数之间差异不显着(P>0.05)。表明连续超排时间间隔为1年比较合理。3.根据波尔山羊母羊第一次超排反应,调整第二次重复超排处理FSH给药方案,可以使第一次超排无效供体70%以上成为有效供体,并且可以获得稳定的超排反应和胚胎产量。4.通过波尔山羊青年母羊体重和回收胚胎(卵)数及可用胚胎数的相关关系研究表明,青年母羊体质量>36kg时,可以回收到较高的总胚胎(卵)数及可用胚胎数。表明,波尔山羊青年母羊体质量和超排效果之间有密切的关系,青年母羊配种前良好的饲养,有利于繁殖潜能的发挥。5.无角道塞特绵羊超排研究结果表明,用加拿大FSH(剂量160-200mg/只)超排效果比较成功,可以回收到12.91±7.80枚胚胎/卵和8.64±7.99枚可用胚胎;经产羊的超排效果优于处女羊(P<0.05);连续超排和手术会降低总胚胎/卵回收数,但是对可用胚胎数无明显影响;用观察自然发情母羊超排,可以回收到较高的总胚胎/卵数(13.83±4.64枚)和可以胚胎数(12.00±5.76枚),显着高于诱导发情母羊和未知发情周期母羊超排后获得的总胚胎/卵数(7.00±4.92枚和5.94±3.38枚)和可用胚胎数(4.22±3.42枚和3.19±2.56枚)(P<0.05);超排处理母羊发情推迟24h获得的总胚胎/卵数和可用胚胎数(0.92±1.51枚和0.42±0.90枚)显着低于正常发情母羊(P<0.01);超排后黄体正常母羊获得的胚胎/卵数和可用胚胎数分别为8.83±5.75枚和6.66±5.41枚,显着高于黄体退化母羊(5.88±5.09枚和3.59±4.30枚)(P<0.01)。研究表明,在胚胎移植中,通过使用加拿大FSH(Fotropin V)再结合选择经产母羊、自然发情母羊进行超排处理,冲胚时选择按时发情母羊及黄体正常母羊,可以收获到理想的总胚胎/卵数和可用胚胎数。6.采用医用几丁糖对波尔山羊供体手术后防止粘连处理,第四次重复超排手术后粘连率为37.5%,极显着低于生理盐水冲洗对照组(100%)和右旋糖酐70+肝素处理组的粘连率(100%)。7.绵羊受体同期发情处理研究表明,在繁殖季节,同一同期处理方案处理不同品种,同期发情率和受体利用率品种间差异不显着(P>0.05)。非繁殖季节同羊和内蒙古细毛羊作受体处理后,同期发情率和受体利用率较低,选用小尾寒羊作受体比较理想。在非繁殖季节使用孕酮栓或配合PMSG诱导母羊受体同期发情效果优于PGF2α组和PGF2α+PMSG组。8.通过不同处理方法在不同季节同期发情处理山羊受体,结果表明,栓+PGF2α方法不论在繁殖季节还是在非繁殖季节,为比较理想的同期发情处理方法。在栓+PG2α用于同期发情处理时,配合使用FSH或PMSG,可以增加受体的有效黄体数量,但是对于胚胎移植后母羊的妊娠率及胚胎成羔率无影响。配合使用FSH或PMSG后,均可以缩短处理母羊撤栓到发情之间的时间,对母羊发情持续时间无影响。表明在春季使用20IU-30IU的FSH配合孕酮栓+PGF2α法,有利于受体利用率的提高。PMSG使用剂量以300IU为宜。9.改进国产麻醉剂速眠新肌肉注射为静脉麻醉绵羊受体或山羊受体,用药量大幅度减少。麻醉羊进入麻醉期时间短,麻醉效果确实,手术后母羊苏醒快,苏醒后0.5h可以恢复采食和反刍,苏醒后的2h可以完全恢复正常。表明采用速眠新麻醉剂进行静脉麻醉,用药量少,安全有效。10.通过供体运输、胚胎运输和受体运输进行异地鲜胚移植,主要研究结果,波尔山羊供体母羊在4h以内运输到采卵地点,对供体母羊的胚胎回收数量、胚胎移植后成活率及受体母羊妊娠率均无影响。胚胎在36.5℃运输2 h,对胚胎移植后成活率及受体母羊妊娠率无影响。但是运输温度为20℃时,胚胎移植后成活率下降到41.7%,受体母羊妊娠率下降到42.0%。受体运输后进行鲜胚移植,受体母羊的妊娠率下降到42.0%,胚胎成活率只有32.1%,明显低于供体运输和胚胎运输进行鲜胚移植。表明供体运输为不同畜牧场异地鲜胚移植的最好方法,新鲜胚胎保存在36.5℃短途运输或较长距离运输也可以得到比较理想的胚胎移植妊娠率和胚胎成羔率。11.通过调查和研究,总结的山、绵羊MOET规模化、商业化生产运行模式适合我国国情。本研究建立的山、绵羊胚胎移植效益评估模型和实例效益评估验证表明,该模型可以用于胚胎移植项目立项、项目实施效果评估等研究中。本论文开展的系列研究,对于完善山、绵羊胚胎移植技术体系建设,促进良种山、绵羊品种的快速扩繁和推广,具有重要的理论和实践指导意义。

代相鹏[2]2004年在《波尔山羊胚胎移植影响因素的研究》文中进行了进一步梳理本研究以波尔山羊、徐淮白山羊、关中奶山羊和江苏省扬中市本地山羊为研究对象,运用超数排卵技术、同期发情技术和胚胎移植技术,对影响波尔山羊胚胎移植效果的诸多因素进行了研究和讨论,试图建立起一套成功的波尔山羊胚胎移植程序,提高波尔山羊胚胎移植效率,使胚胎移植技术更好的为波尔山羊的快速扩繁及其产业化服务。 1 波尔山羊超数排卵影响因素的研究 本试验以波尔山羊为研究对象,对超排时间、超排程序、激素来源、促排激素、供体体重及年龄、超排季节、激素剂量、重复超排、PG-发情的时间、供体发情情况和配种次数等因素对供体超排效果的影响进行了研究,同时对供体左、右卵巢的反应性和胚胎回收率进行了统计、分析。结果表明,在供体发情周期12~17天中任一天开始超排均能取得较好的超排效果,可用胚平均数为11.50~18.91。超排程序对超排效果的影响极显着(P<0.01),超排供体注射1针PGF_(2α)同期发情时的超排效果最好,可用胚平均数为18.00。国产和进口激素对超排效果影响不显着(P>0.05)。供体发情配种时用LHRH-A_3促排的效果较佳。供体体重、超排季节对供体超排效果没有显着影响(P>0.05),但供体年龄对超排效果的影响显着(P<0.05),经产羊的可用胚数显着高于育成羊。品种对超排供体的可用胚数没有显着影响(P>0.05)。FSH剂量对供体超排效果有显着影响,随FSH剂量的增加,育成羊的黄体数极显着增多,而经产羊的可用胚数显着增加。用240IU FSH对经产波尔山羊进行超排,注射1针PGF_(2α)同期发情时能取得最佳的超排效果。而缩短配种间隔,增加配种次数不能增加供体的可用胚数。重复超排的效果略有下降(P>0.05)。供体发情情况对供体的超排效果有重要的体现,注射PG后37~48h发情的供体的超排效果最好,发情异常的供体的超排效果比重复超排的供体的超排效果还差(P>0.05)。超排供体左、右卵巢的超排反应性及回收率趋向一致,没有显着差异(P>0.05)。 2 供体和受体同期发情影响因素的研究 本试验就FSH和同期发情方法对供、受体发情同期化的影响进行了研究。结果表明,FSH对供体发情有显着的促进作用(P<0.05),经FSH处理后,供体发情高峰期(51.11%~61.11%)的时间比受体早12h。同期发情方法对受体发情情况有显着的影响(P<0.05),经CIDR法同期发情的受体发情高峰期(58.94%)的时间比PG法早24h。波尔山羊胚胎移植影响因素的研究3受体因素对胚胎移植效果的影响 本试验以徐淮白山羊、关中奶山羊和江苏扬中市本地山羊为研究对象,研究了受体与供体发情同步化程度,受体的黄体状况,品种等因素对受体妊娘率的影响。结果表明,受体发情同期化对其妊振率有显着影响(尸灯a好),比供体发情早1一12h发情的受体的移植成功率最高(79 .88%),而妊娘日龄较短(20天)的母羊经人工流产、诱导发情后可以做胚胎移植的受体,其妊振率与正常诱导发情的受体没有显着差异(P)a盯)。受体黄体数及黄体形态对其妊振率没有显着影响(尸夕ao习,但随黄体数的增多,受体妊娘率呈下降趋势。受体品种对其妊娘率有显着的影响(尸灯ao助,徐淮白山羊和关中奶山羊比扬中本地山羊更适合做受体.移胚后第1情期返情的受体数与总发情受体数有极显着的相关性(尸灯叹01)o4其它因素对胚胎移植效果的影响 本试验就胚胎的发育阶段、供体体况、胚胎保存时间及移植胚胎数等因素对胚胎移植效果的影响情况进行了研究.结果表明,胚胎发育日龄对受体妊娘率没有显着影响(尸)a盯),但移植8一16细胞胚胎的妊振率略高于2一4细胞(5 8.49%vs 61.47%)。人员不是影响受体妊振率的主要因素,而供体体况会潜在地影响其胚胎质量,从而影响到受体的妊娘率。胚胎在体外保存0一1 20h对妊振率没有显着影响(尸)a好久而胚胎在体外保存卜30 min内移植的妊娘率最高(“.61%)。黄体与移植胚胎的相对位置对受体的妊振率没有显着影响(尸夕ao助,但移植双胚的受体的妊振率较移植单胚高(61.76%vs 45.17%)。经胚胎移植产生的波尔山羊母羔的初生重极显着地高于自然繁殖的母羔(尸‘a01),但公羔间的初生重以及公、母羔间的体高、体长、胸围、死亡率和性别比例与自然繁殖羔羊差异不显着(尸)0.盯)o

樊江峰[3]2004年在《波尔山羊胚胎移植技术的应用研究》文中指出本研究在3家波尔山羊养殖单位先后组织了5批次的胚胎移植生产工作,就波尔山羊胚胎移植生产中影响超数排卵、同期发情以及受体妊娠率的一些因素作了初步的探讨。获得了以下结果。 1.中科院动物所生产的FSH用于超排处理使用10mg剂量注射,采胚平均数、可用胚平均数和可用胚比率分别为16.48±7.28、13.48±7.95和80.50±22.93%,与加拿大进口的Folltropin-Ⅴ超排效果差异不显着(P>0.05)。由此可见,国产FSH用于波尔山羊同样可以取得良好的超排效果。 2.在秋冬季节,使用两种同期发情方案(方案一:撤栓前12小时和撤栓时各注射FSH 25单位,撤栓时配合注射PG 0.1mg;方案二:在撤栓前24小时和12小时分别注射FSH 25单位,撤栓时配合注射PG 0.1mg。)处理受体奶山羊,96h内的发情有效率分别为:77.14%和93.28%,两组之间差异显着,方案二明显高于方案一。但发情持续时间在72h以内的个体所占的比例,两组之间差异不显着(分别为91.36%和90.25%)。因此,使用方案二进行奶山羊同期发情处理,发情时间更加集中,是一种较好的同期化方案。 3.春季在天水地区开展波尔山羊的胚胎移植工作是可行的,并且也取得了与秋冬季节相当的超排效果(胚胎总数、可用胚均数和可用胚比率分别为:16.22±8.42,14.89±8.25和89.66±15.64%)。但春季受体羊同期发情处理后发情起始时间明显推后,多在去除孕激素海绵栓后的84~120小时之间(占82.59%),而春季受体母羊发情持续时间与秋冬季节无显着差异。 4.移植多枚胚胎(2、3枚)的受体其妊娠率略高于移植1枚胚胎的受体。但是从胚胎的角度考虑,胚胎受孕率却明显下降。因此,在生产当中,应根据实际情况,当受体数量充足时,应以移植单胚为主,以达到产生更多后代的目的,同时胚胎的利用率也较高。

王英泽[4]2002年在《山羊胚胎移植效果的影响因素研究》文中研究说明近年来,胚胎移植技术在短期内扩大优良种用山羊的数量方面发挥了重要作用。但在实践中,胚胎移植的成功率仍不稳定。国内外已有不少学者在提高胚胎移植成功率方面进行了大量研究,但是这些研究大多是针对个别影响因素的探讨。对影响胚胎移植技术的各环节的因素进行全面的分析将有助于进一步提高其成功率,增加成功率的稳定性。本试验对30只波尔山羊进行超排;89只鲁北白山羊作为受体,针对影响超数排卵、同期发情和受体妊娠率的多种因素进行综合分析。 采用适合性检验对5个超排指标进行正态性分析,结果表明:黄体数、可用胚数、采胚数均服从正态分布。而变性胚数和未受精卵数不服从正态分布,对其应采用非参数检验的方法;多变量方差分析对影响超排效果的6个因素的分析结果表明:FSH的注射时间和同期处理方法在综合效应模型中是产生超排效果差异的主要原因。各因素间的交互作用差异不显着。 采用单因素方差分析和非参数检验对影响超排效果的6个因素进行分析。结果表明:膘情因素四个水平中,中上、中等体况个体的黄体数为(11.17±3.29)枚、(6.22±2.37)枚,显着高于其它水平(P<0.01),而变性胚率和未受精卵率居较低水平。说明不同膘情对超排效果的影响主要体现在黄体数方面;叁种FSH注射时间以第7d或第9d开始注射的超排效果好,说明波尔山羊的卵泡生长波的启动应该集中在第7~9d;不同的同期处理方法对黄体数量产生极显着差异(P<0.01),一次肌注PG2mL剂量过大,会严重影响供体的受精卵率和可用胚数。放栓组和PG注射组比较无显着差异(P>0.05)。结果表明,PG分两次注射(1mL/次)的总体效果较好;注射LH后其采胚率(29.56%<63.58%)、可用胚率(75.30%<94.34%)低于不注射组,并且未受精卵率显着高于不注射组(20.07%>1.37%)。说明LH的注射增加了不成熟卵泡的排卵数目;同期处理后24h发情的供体在采胚数(6.29±1.57)和可用胚数(5.10±1.56)方面高于36h、42h发情组,同时未受精率也较高(15.90%),叁个组对超排效果的影响差异不显着(P>0.05),说明供体发情出现的时间对超排效果的影响并不明显;人工+本交的交配方式可显着降低未受精卵率(P<0.05),提高超排效果。 PG的应用可使供体的36h同期发情率达到100%,各水平间以两次注射PG的效果为好,24h发情率达到80%;黄体数与采胚数的相关系数为0.415(P<0.05),采胚数和可用胚数的相关系数为0.928(P<0.01),在实际应用中可以通过黄体数判断其采胚数和可用胚数。 采用Logistic回归分析了影响受体妊娠率的4种因素,结果表明,移植方式和发情状况对妊娠结果的产生具有决定性作用(P<0.01),可通过建立的回归模型对受体妊娠情况进行预测。胚胎发育阶段的差异会极显着影响返情状况;自然发情的受体有较高的不返情率(69.44%),显着高于诱导发情组(P<0.05);受体黄体数量的差异对返情率的影响不显着(P>0.05);双侧移植方式可显着提高受体的不返情率(P<0.01),达到了80%;桑椹胚的返情率最低,显着低于其它水平(P<0.01),达到31.58%。 综合以上研究结果,可以得出如下结论 门)FSH的注射时间和同期处理方法在综合效应模型中是产生超排效果差异的主要原因。 ② 采用如下方法可得到较好的超排效果:选择中上、中等体况的个体作为超排个体,在第7 d或第9 d采用递减法注射FSH(16 nL),比例为S:5:3,每大2次,间隔12小时;在超排第3 d上、下午各肌注lmLPG(间隔12 h);选择同期处理后 24 h发情的个体;采用本交十人工授精的交配方式;在发情羊配种后 6~7大,采用于宫角冲胚法可得到较好的超排效果。 (3)采用如下方法可得到最好的妊娠效果:将采集到的桑棋胚移植到同期发情(同步差为上12 h)的受体内。受体最好为自然发情:采用于宫角双侧移植的方法。 。_。,、,。,、_..___,,、、__。、,,_,_、___C (4)用发情状况(XI)和移植方式(x;)建立的回归方程P=_ l+e可对受体妊娠率进行预测,预测准确率为79 3%。

陈军[5]2006年在《波尔山羊超数排卵与胚胎移植影响因素的研究》文中指出影响波尔山羊胚胎移植效果的因素主要有供体超排因素、受体因素和胚胎因素。超排效果又受动物因素(主要包括供体的个体和遗传的差异、生理和营养状态、供体所处的超排日期、季节及其它影响动物的环境因素)和药物因素(包括激素的半衰期、激素制剂中的FSH/LH比例、给药途径、剂量和频率等)的影响。本研究的目的是利用激素控制卵泡和黄体发育以优化同期发情技术、超数排卵技术和胚胎移植技术流程,并评价激素处理的效果,试图建立起一套成功的程序,提高波尔山羊超排效率,使胚胎移植技术更好的为畜牧业生产服务。1影响供体超数排卵效果的因素本试验以波尔山羊为研究对象,对超排方案、激素剂量、超排时间、供体体质、供体年龄和配种方式对供体超排效果的影响情况进行了研究,同时对供体左、右卵巢的反应性及排卵情况进行了统计、比较。结果表明,超排方案对超排效果的影响极显着(P<0.01),供体超排后注射0.1mgPGF_(2α)同期发情时的超排效果最好,可用胚平均数为18.00。FSH剂量对供体超排效果有显着影响,随FSH剂量的增加,经产羊的黄体数显着增多,经产羊的可用胚数显着增加。用240IU FSH对经产波尔山羊进行超排,注射0.1mgPGF_(2α),在供体发情周期12-17天中任一天开始超排均能取得较好的超排效果,可用胚平均数为12.02-19.03。体质对供体超排效果有极显着影响(P<0.01),供体年龄对超排效果的影响显着(P<0.05),经产羊的可用胚数显着高于青年羊。配种方式对供体羊的超排效果影响差异不显着,超排供体左、右卵巢的超排反应性没有显着差异。2受体因素对胚胎移植效果的影响选择合适的受体对提高波尔山羊胚胎移植成功率是至关重要的。本试验以波杂一代羊、徐淮白山羊、长江叁角洲白山羊为研究对象,研究了受体与供体发情同步化程度,受体的黄体状况、品种、营养状况等对受体妊娠率的影响。结果表明,受体发情同期化对其妊娠率有显着影响(P<0.05),与供体同步发情的受体移植成功率最高(76.67%),受体黄体数、及小卵泡的有无对其妊娠率没有显着影响(P>0.05);受体品种对其妊娠率有显着的影响(P<0.05)。波杂一代羊和徐淮白山羊比长江叁角洲白山羊更适合做受体。3胚胎因素对胚胎移植效果的影响供体、受体和季节等因素对胚胎移植效果有重要的影响,胚胎因素也影响到胚胎移植的成功率。本试验就胚胎的发育阶段、胚胎体外保存时间及移植胚胎数等因素对胚胎移植效果的影响情况进行了研究。结果表明,胚胎发育日龄对受体妊振率没有显着影响(P>0.05),但移植8-16细胞的胚胎的妊娠率略高于2-4细胞(68.42%vs 63.64%)。胚胎在体外保存0-60min对妊振率没有显着影响,胚胎在体外保存0-6min内移植的妊娠率最高(64.71%)。移植叁胚的受体妊娠率高于移植双胚和移植单胚受体的妊娠率(71.43%vs 64.52%vs 52.50%)。

高文超[6]2013年在《山羊同期发情与超数排卵及其影响因素的研究》文中认为同期发情(estrus synchronization)与超数排卵(superovulation)是家畜胚胎移植(embryo transfer)技术中的两个重要环节。超数排卵技术是胚胎移植技术中的核心技术环节,是目前获得大量胚胎最有效的方法之一。同期发情技术的应用,有助于实现集约化生产,同时,受体羊同期发情的效果对于胚胎在受体内的发育有着直接的影响。本试验以波尔山羊、关中奶山羊和陕北白绒山羊为研究对象,研究不同药物、不同方案、不同季节等因素对其超数排卵和/或同期发情效果造成的影响,并结合生产实际,我们得出以下结论:1.采用加拿大产FSH、中国科学院产FSH和加拿大+中科院产FSH,对波尔山羊进行超数排卵处理,叁种超排方案分别得到平均回收胚胎11.17±8.18枚、15.57±6.45枚和10.92±7.43枚,平均可用胚胎分别为10.00±8.65枚、12.43±6.75枚和8.92±6.93枚,以上结果均差异不显着(P>0.05)。表明中科院产FSH的超排效果与加拿大产FSH的相当,又因中科院产FSH的价格是同规格加拿大产FSH的一半,所以从经济适用性和综合角度看,中科院产FSH可以替代加拿大产FSH进行超数排卵处理。2.同样采用加拿大产FSH进行超排处理,波尔山羊与陕北白绒山羊供体的平均回收胚胎数分别为11.17±8.18枚和9.43±7.16枚,平均可用胚数分别为10.00±8.65枚和8.57±6.24枚,虽然两组结果均差异不显着(P>0.05),但可见波尔山羊的排卵效果稍高于陕北白绒山羊,前者的平均回收胚胎数与平均可用胚胎数均约是后者的1.3倍。3.分别采用宁波产PMSG和以色列产PMSG对关中奶山羊受体进行同期发情处理,两者诱导的同期发情率(85.80%和82.35%)相当,但前者诱导的受体卵巢排卵率(64.66%)与后者(81.82%)差异显着(P<0.05)。表明,国产PMSG可诱导产生与进口PMSG相当的同期发情率,但诱导卵巢排卵效果较差。4.在11月份分别采用CIDR+PG法和CIDR+FSH+PG法对陕北白绒山羊受体进行同期发情处理,两种方法分别在同期发情率(91.18%和90.77%)、排卵率(74.19%和79.66%)、移植率(90.32%和86.44%)和妊娠率(28.57%和31.37%)方面都差异不显着(P>0.05),但后者在排卵率和妊娠率方面都比前者高。表明在同期发情处理中利用FSH可以提高后期的胚胎移植效率。5.利用CIDR+FSH+PG法分别在秋季(11月)和冬季(12月)对陕北白绒山羊进行同期发情处理,秋季和冬季的同期发情率分别为90.77%和82.83%,排卵率分别为79.66%和85.96%,移植率分别为86.44%和85.96%,以上叁组结果均差异不显着(P>0.05)。表明冬季对陕北白绒山羊进行同期发情处理也可以得到较好的效果。6.利用自制的PRID与新西兰进口的CIDR对受体羊进行同期发情处理,两者诱导的同期化率分别为84.09%和86.87%(P>0.05),说明自制的PRID可与进口CIDR达到同等的同期化效果。7.分别利用新受体和短时间(一个月)内重复移植的受体进行胚胎移植,两者的移植率分别为70.97%和59.32%,结果差异显着(P<0.05)。我们发现短时间重复利用同一受体进行移植,会导致受体子宫角黏连现象以较高的比例(本试验约10%)发生,所以建议利用重复受体时,最好使其妊娠一次来减少子宫角黏连现象的发生。

吴细波[7]2007年在《应用超数排卵与胚胎冷冻技术保护马头山羊品种的研究》文中提出本研究的目的是通过马头山羊的超数排卵、超排胚胎的冷冻、冷冻胚胎的移植等技术的有机结合,实现马头山羊的胚胎冷冻保种。本试验围绕这个目的,对马头山羊的超数排卵、超排胚胎的冷冻、冷冻胚胎的移植分别进行了研究。本试验首先研究了处理方法、配种方法、上胎产羔数、膘情、重复超排、基因多态性等因素对马头山羊超数排卵效果的影响,旨在充分发掘优秀马头山羊母畜的繁殖潜力。试验结果表明:(1)在CIDR+FSH+PG超排方法的基础上,同时运用LHRH-A_3与P_4进行超排可以显着提高只均获胚数(15.63vs12.75)、只均可用胚数(14.75vs11.25)和可用胚率(94.40%vs88.24%)(P<0.05),得到较好的超排效果;(2)超排供体羊配种时,每隔8h本交一次(公母比例1:1)或每隔8h人工授精一次均可得到较好的超排效果,其只均获胚数、只均可用胚胎数、可用胚率均显着高于每隔8h本交一次(公母比例1:2)或每隔12h本交一次(公母比例1:1)(P<0.05);(3)上胎产羔4只的供体羊只均获胚数(16.83vs14.17)和只均可用胚数(15.83vs13.33)显着高于上胎产羔2只以下的供体羊(P<0.05);(4)中等膘情的供体羊超排效果较好,其只均获胚数、只均可用胚数和可用胚率均显着高于上等膘情和下等膘情的供体羊(P<0.05);(5)对供体羊进行重复超排时,其只均获胚数(15.17vs15.67)、只均可用胚胎数(14.17vs14.83)和可用胚率(93.41%vs94.68%)等指标均略低于首次超排,但统计差异不显着(P>0.05);(6)INHA基因不同基因型对供体羊只均获胚数和只均可用胚数的影响一致,均表现为GG>AG>AA,但是统计差异不显着(P>0.05)。本试验随后研究了冷冻方法、解冻时水浴温度以及解冻方法等对马头山羊胚胎冷冻后发育效果的影响,旨在探索出适合马头山羊胚胎的稳定可靠的冷冻保存方法,提高其冷冻保存效率。试验结果表明:(1)采用细管玻璃化冷冻和OPS玻璃化冷冻对胚胎进行冷冻,比较两种方法的效果,发现解冻后胚胎形态正常率(84.09%vs81.08%)、囊胚发育率(63.51%vs60.00%)以细管玻璃化冷冻效果略好,但在方法间统计差异不显着(P>0.05);(2)胚胎经细管玻璃化冷冻后,分别采用25℃和37℃水浴进行解冻,发现37℃水浴解冻后的胚胎发育效果略好于25℃水浴解冻,但解冻后胚胎的形态正常率(83.78%vs81.48%)和囊胚发育率(64.52%vs59.09%)在方法间统计差异均不显着(P>0.05);(3)胚胎经细管玻璃化冷冻后,分别采用二步法和一步法进行解冻,解冻后胚胎的形态正常率(87.50%vs83.78%)和囊胚发育率(66.67%vs64.52%)在方法间统计差异均不显着(P>0.05)。本试验最后对受体的同期发情以及马头山羊冻胚移植进行了研究,旨在进一步检验其胚胎冷冻的效果及建立胚胎冷冻保种库进行马头山羊保种的可行性。试验结果表明:(1)受体羊用CIDR进行处理时同期发情率为85.71%,受体羊用孕酮海绵栓进行处理时同期发情率为78.57%,两者同期发情率在方法间统计差异不显着(P>0.05);(2)马头山羊超排获得的胚胎经细管玻璃化冷冻-解冻后进行不同类型受体羊移植,经产受体羊与育成受体羊的移植妊娠率分别为46.67%和37.50%,经产受体羊移植妊娠率比育成受体羊高,但统计差异不显着(P>0.05)。

李福刚, 高功奇, 徐旭俊, 袁玉国, 聂春应[8]2002年在《B型超声妊娠诊断技术在波尔山羊胚胎移植产业化中的研究应用》文中进行了进一步梳理应用B型超声断层扫描仪对279只波尔山羊胚胎移植受体白山羊和87只自然交配波尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后20~100天试验羊妊娠诊断阴性(B超判断未怀孕)的准确率为100%;正常交配羊妊娠诊断阳性(B超判断怀孕)的准确率为100%;部分胚胎移植后20天左右的受体羊出现假阳性,这可能与胚胎移植后胎儿发育停止或出现流产或手术造成的粘连有关。试验证明,在胚胎移植(2-8细胞胚胎)30天以后进行B超妊娠检查不仅可准确判断妊娠情况,而且能得到胚胎移植羊流产或妊娠中止的数据,试验说明,B超妊娠诊断是目前波尔山羊胚胎移植产业化过程中的一个重要环节。

石瑞刚[9]2007年在《萨福克绵羊胚胎移植影响因素的研究》文中研究表明国内外对绵羊超数排卵及妊娠率的研究已有几十年的历史,但由于受各种因素的影响,效果并不十分稳定。本实验目的是通过对影响萨福克绵羊超排效果以及胚胎移植妊娠效果的因素分析,试图建立一套符合吉林地区绵羊胚胎移植比较完整的技术体系。试验结果表明:日本、新西兰和宁波产FSH相比,在试验结果的各项指标中差异不显着(P<0.05),但在价格上差别很大,进口FSH的价格远远超过国产FSH的价格,因此宁波产FSH是萨福克绵羊超数排卵产业化推广中较好的选择药物;重复超排的效果略有下降,但差异不显着(P<0.05)。手术造成的供体卵巢、输卵管粘连是降低重复超排效果的主要原因,激素处理对重复超排效果没有显着影响(P>0.05);在吉林地区进行萨福克绵羊超数排卵的最佳季节为9月末-10月中旬;在移植一枚胚胎、相同发育阶段的条件下,移植A级胚胎的妊娠率(51.72%)高于B级胚胎的妊娠率(36.11%),且存在显着性差异(P<0.05):在移植一枚胚胎、相同质量胚胎的条件下,桑椹胚移植的妊娠率(53.57%)高于囊胚移植的妊娠率(51.08%),但它们之间差异不显着(P>0.05);在相同质量、相同发育阶段的条件下,移植两枚胚胎的妊娠率(57.62%)高于移植一枚胚胎的妊娠率(50.84%),但它们之间差异不显着(P>0.05);受体卵巢黄体数(1~3)时的妊娠率分别为57.93%、52.30%和51.85%,但其妊娠率没有显着差异,受体卵巢只有一个黄体时所分泌的孕酮就足以维持胚胎的早期发育,而黄体数太多,可能对受体妊娠率产生不利的影响;受体羊黄体体积大小对胚胎移植妊娠率的影响差异不显着(黄体体积大、中、小对应的妊娠率分别为55.67%、50.31%和60.94%)(P>0.05);供、受体羊的发情同步差在0,±12h,±24的妊娠率分别为62.22%、55.28%、57.39%、37.71%和37.50%,供、受体羊的发情同步差在0,±12h妊娠率显着高于±24的妊娠率,因此供、受体羊的发情同步差0,±12h以内将获得较好的受胎率;合理的饲养管理是受体羊妊娠率的关键,补饲条件下受体产羔率(62.12%)极显着高于不补饲条件下的产羔率(42.53%)。

代相鹏, 张秀华, 王锋[10]2007年在《波尔山羊胚胎移植影响因素的研究》文中研究说明试验就胚胎的发育阶段、胚胎保存时间及移植胚胎数等因素对胚胎移植效果的影响情况进行了研究。结果表明,胚胎发育日龄对受体妊娠率没有显着影响(P>0.05),但移植8~16细胞的胚胎的妊娠率略高于2~4细胞(58.49%vs 61.47%)。人员不是影响受体妊娠率的主要因素。胚胎在体外保存0~120min对妊娠率没有显着影响,但以在体外保存0~30 min内移植的妊娠率最高(65.61%)。黄体与移植胚胎的相对位置对受体的妊娠率没有显着影响(P>0.05),但移植双胚的受体的妊娠率较移植单胚高(61.76%vs 45.17%)。同时,试验统计了经胚胎移植产生的羔羊和自然繁殖羔羊之间的差异,发现经胚胎移植产生的波尔山羊母羔的初生重极显着地高于自然繁殖的母羔(P<0.01),但公羔间的初生重以及公、母羔间的体高、体长、胸围、死亡率和性别比例与自然繁殖羔羊差异不显着(P>0.05)。

参考文献:

[1]. 山羊和绵羊超数排卵及规模化胚胎移植技术研究[D]. 权富生. 西北农林科技大学. 2010

[2]. 波尔山羊胚胎移植影响因素的研究[D]. 代相鹏. 南京农业大学. 2004

[3]. 波尔山羊胚胎移植技术的应用研究[D]. 樊江峰. 甘肃农业大学. 2004

[4]. 山羊胚胎移植效果的影响因素研究[D]. 王英泽. 河北农业大学. 2002

[5]. 波尔山羊超数排卵与胚胎移植影响因素的研究[D]. 陈军. 南京农业大学. 2006

[6]. 山羊同期发情与超数排卵及其影响因素的研究[D]. 高文超. 西北农林科技大学. 2013

[7]. 应用超数排卵与胚胎冷冻技术保护马头山羊品种的研究[D]. 吴细波. 华中农业大学. 2007

[8]. B型超声妊娠诊断技术在波尔山羊胚胎移植产业化中的研究应用[J]. 李福刚, 高功奇, 徐旭俊, 袁玉国, 聂春应. 河北畜牧兽医. 2002

[9]. 萨福克绵羊胚胎移植影响因素的研究[D]. 石瑞刚. 延边大学. 2007

[10]. 波尔山羊胚胎移植影响因素的研究[J]. 代相鹏, 张秀华, 王锋. 家畜生态学报. 2007

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波尔山羊胚胎移植影响因素的研究
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