导读:本文包含了抗病毒基因工程论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:病毒,基因工程,疫苗,抗体,基因,细小,杆状。
抗病毒基因工程论文文献综述
李希辰,雷欢,李雪,石晶,殷玉和[1]（2019）在《一种犬细小病毒基因工程抗体的制备》一文中研究指出本研究旨在利用HEK-293细胞系制备鼠源犬细小病毒(canine parovirus,CPV)基因工程抗体并检测其生物活性。通过抗体亚型检测试剂盒检测CPV单克隆抗体亚型;采用间接ELISA检测CPV单克隆抗体的亲和力和特异性;经RACE-PCR获得CPV单克隆抗体的可变区序列,将可变区序列与鼠源抗体恒定区序列连接;分别构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-L和pcDNA3.1(+)-H,将载体共转染HEK-293细胞,采用血凝抑制与中和试验的方法检测鼠源CPV基因工程抗体生物活性;采用HEK-293F细胞悬浮表达并用间接ELISA方法检测鼠源CPV基因工程抗体的表达量;用Protein A亲和层析柱纯化鼠源CPV基因工程抗体后进行SDS-PAGE鉴定;间接免疫荧光检测纯化后鼠源CPV基因工程抗体的活性。结果显示,CPV单克隆抗体亚型为IgG_(2b),亲和力常数6个Ka平均值为1.02×10~(11) L/mol,只与CPV VLPs发生反应。琼脂糖凝胶电泳结果显示,试验成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-L和pcDNA3.1(+)-H;HEK-293和HEK-293F细胞培养上清液血抑效价分别为1∶2~4和1∶2~6,中和试验结果显示,HEK-293和HEK-293F细胞培养上清液中和效价分别为1∶152和1∶1 290;鼠源CPV基因工程抗体在HEK-293F细胞中的表达量为5.97 mg/L,SDS-PAGE分析在55和25 ku处出现条带,表明鼠源CPV基因工程抗体成功在HEK-293F细胞中表达并纯化。间接免疫荧光检测结果表明,纯化后鼠源CPV基因工程抗体具有良好的生物活性。本研究在HEK-293F细胞中成功表达具有中和活性、纯度较高的鼠源CPV基因工程抗体,为今后CPV基因工程抗体药物的研发奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年10期）
李远远,王鋆坦,李彩霞,徐钟[2]（2019）在《病毒基因工程药物研究进展》一文中研究指出随着病原微生物耐药性日趋严重,以及疑难病症的个性化治疗需求增多,利用活体微生物药物进行疾病治疗越来越被关注。采用现代生物技术和合成生物学手段,将具有疾病治疗作用的效应物分子的合成基因导入微生物中,创造具有靶向治疗效果的活体微生物药物这是前沿性研究领域。本文阐述以病毒为治疗载体的活体药物的研究进展,包括用于疾病治疗的病毒的种类和所携带效应物的表达调控,为抗生素类小分子药物替代治疗提供借鉴方法。(本文来源于《国外医药(抗生素分册)》期刊2019年04期）
高晓磊,韩明宝,刘思桐,赵丽霞,朱秀同[3]（2019）在《1日龄雏鸡免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗安全性及效力的研究》一文中研究指出将鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同免疫途径免疫1日龄雏鸡,评价其安全性和效力。以10羽份/只剂量接种后,两组鸡均未观察到全身反应。以1羽份/只剂量接种后28d攻毒,两种免疫方式均可以使免疫鸡产生较强免疫力,能够抵抗传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株强毒和鸡痘病毒(FPV)102株的攻击。以上结果显示,鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同途径免疫1日龄雏鸡,具有良好的安全性和有效性。(本文来源于《中国动物保健》期刊2019年04期）
薛雨佳[4]（2018）在《抗猫细小病毒基因工程嵌合抗体研究》一文中研究指出猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV),又名猫泛白细胞减少症病毒,属细小病毒科、细小病毒属成员。可引起猫及猫科动物的泛白细胞减少症,表现为高热、顽固性呕吐、腹泻、脱水及白细胞严重减少,常造成幼猫的感染和高死亡率。目前临床对猫细小病毒及犬细小病毒的主要的治疗手段依赖于大量注射抗病毒单克隆抗体。鼠源单抗在用于异种动物治疗上通常不能有效激活补体和Fc受体相关的效应系统,并且能诱发抗鼠抗体,使得疗效降低并加重了动物免疫系统的负担。本研究开发的基因重组嵌合抗体,用抗猫、犬细小病毒的单克隆抗体的可变区替换犬天然抗体的可变区,使重组嵌合抗体在保留单克隆抗体的高亲和力的基础上实现犬源化的改造,达到减少抗体免疫原性的目的,提高抗体在临床上的疗效。本研究通过聚乙二醇法融合FPV免疫小鼠脾脏的细胞与SP2/0细胞,通过免疫荧光(IFA)鉴定、中和实验鉴定,获得一株单克隆抗体3A8,经鉴定该单抗具有与FPV和CPV的中和活性。同时研究并分析了犬天然抗体的可变区、恒定区的位置和次级的结构和分区。克隆单克隆抗体可变区基因及犬抗体的恒定区基因,嵌合两部分基因得到重组抗体基因。将重组抗体基因克隆至真核表达载体pFastBac-Dual杆状病毒穿梭载体质粒,转化DH10Bac感受态,再通过提取重组杆粒DNA,转入昆虫细胞进行真核表达。并对表达的重组嵌合抗体进行SDS-PAGE、Western-blot、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验和免疫荧光实验对表达的嵌合抗体进行鉴定。通过上述实验后验证了经昆虫细胞真核表达的重嵌合抗体,其重链大小为55kDa、轻链大小为25kDa。该重组嵌合抗体保留了来源于单克隆抗体的对FPV、CPV的中和活性,同时其恒定区部分成功犬源化。说明本研究实现了在保留单克隆抗体中和活性的基础上对单抗犬源化的改造,从而达到了减少抗体用于异种动物免疫源性的目的。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2018-06-01）
燕照玲,段俊枝,冯丽丽,陈海燕,齐红志[5]（2017）在《玉米抗病毒基因工程研究进展》一文中研究指出病毒病是导致玉米产量降低和品质下降的主要原因之一。在我国,玉米矮花叶病和粗缩病发生范围最广、危害最严重。基因工程技术可人为将抗性基因或部分片段定向导入植物获得转基因抗病毒植株,具有速度快、效率高等优点,在玉米抗病毒育种中具有重要的应用价值。文章在总结我国主要玉米病毒病及其病原种类的基础上,论述采用不同策略培育抗病毒玉米植株的研究进展,其中,利用植物病毒基因序列的策略有病毒编码蛋白基因介导的抗病性、RNA干扰(RNAi)介导的抗病性、人工小RNA(amiRNA)介导的抗病性3种,还可利用非植物病毒基因,包括寄主的抗性基因及来自其他植物、动物和微生物的抗病毒基因如核糖体失活蛋白、核酸酶、2-5A体系的基因等;最后分析各种策略的优缺点及抗病毒转基因玉米的安全性问题,为科研工作者优化玉米抗病毒育种工程、培育生产上可推广的抗病毒品种提供参考。(本文来源于《南方农业学报》期刊2017年12期）
林雯[6]（2017）在《攻克石斑鱼病害 我省科研有突破》一文中研究指出石斑鱼是闽南地区家喻户晓的名贵鱼类，由于野生石斑鱼的数量十分有限，近年来，人工养殖的石斑鱼已逐渐成为市场主流。随着我国石斑鱼类人工繁育技术水平的提高及养殖模式的不断创新，石斑鱼养殖业发展迅猛，年产值可达百亿元以上。但鲜为人知的是，石斑鱼养殖业空前辉煌的同(本文来源于《厦门日报》期刊2017-12-28）
张楠楠[7]（2017）在《猪流行性腹泻病毒基因工程疫苗的研制》一文中研究指出猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是全球流行的极具威胁性的猪病之一,由具有高致死率的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起。该病在世界各地的爆发给全球养猪业造成了重大经济损失,但迄今为止尚无有效安全的疫苗可用。因此,研制安全高效的PEDV疫苗具有十分重要的意义。S蛋白是PEDV的主要结构蛋白,由S1区和S2区组成,其中S1含有3个中和表位区域,常作为PEDV基因工程疫苗研究中最重要的一个靶蛋白。本研究利用MultiBac多基因表达系统构建含有不同S1基因拷贝数的重组杆状病毒:AcMNPV-IM-p10S1、AcMNPV-IM-2p10S1、AcMNPV-IM-3p10S1、AcMNPV-IM-phS1、AcMNPV-IM-2phS1、AcMNPV-IM-3phS1、AcMNPV-IM-p10S1-phS1和AcMNPV-IM-2p10S1-2phS1,以实现S1蛋白在昆虫细胞中的高效表达,并将纯化后的S1蛋白作为基因工程疫苗使用,初步探索PEDV S1蛋白在BALB/c小鼠上的免疫效果。通过Western Blot和His标签ELISA定量检测试剂盒分析S1蛋白的表达情况,结果显示不同拷贝数的重组杆状病毒感染Sf9细胞后,S1蛋白均能有效表达,而且其蛋白表达量受到基因拷贝数和启动子的影响。1.当S1基因由1拷贝增加到3拷贝时,表达量随拷贝数的增加而增加,在3拷贝时表达量达到最高,4拷贝时有所下降。2.p10启动子驱动的蛋白表达量要显着高于polh启动子驱动的蛋白表达量。将表达的S1蛋白经过镍柱亲和层析纯化后与等量的佐剂混匀并乳化制备PEDV亚单位疫苗,然后将其背部皮下注射免疫小鼠。间接ELISA检测S1蛋白刺激小鼠产生的血清抗体水平。结果表明S1蛋白可以诱导小鼠产生特异性免疫反应。本研究利用杆状病毒多基因表达系统成功表达了PEDV S1蛋白,并利用多拷贝表达和替换启动子摸索了提高蛋白表达量的方法,而且纯化后的S1蛋白具有良好的免疫原性,为以后研发基于S1蛋白的PEDV基因工程疫苗提供有力的支持。(本文来源于《南阳师范学院》期刊2017-12-01）
邹忠,龚文孝,黄坤,金梅林[8]（2017）在《基于CRISPR/Cas9高效构建鸭肠炎病毒-鸭禽流感-鸭坦布苏病毒基因工程叁价疫苗》一文中研究指出引言养鸭业是我国水禽养殖业的重要组成部分,在我国的农业经济中占据着举足轻重的地位。伴随着养殖业向规模化和集约化方向的发展,鸭传染性疾病严重制约了养鸭业的健康可持续发展。鸭病毒性肠炎(Duck Virus Enteritis,DVE)又名鸭瘟(Duck Plague,DP),是由鸭肠炎病毒(Duck Enteritis(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集》期刊2017-08-20）
章勇[9]（2017）在《郭万柱：开创我国动物病毒基因工程疫苗先河》一文中研究指出又是一个平淡宁静的早晨。79岁的郭万柱和往常一样，六点半起床，泡上一壶茶，又点上一支烟。瘦削的申字脸，头发早已花白，一身灰色夹克，看起来就是一位普普通通的四川老头儿，但他却在我国首次研制出了伪狂犬病叁基因缺失疫苗，开创了我国动物病毒基因工程疫(本文来源于《中国畜牧兽医报》期刊2017-01-15）
邹忠,黄坤,金梅林[10]（2016）在《基于CRISPR/Cas9技术构建鸭肠炎病毒载体-禽流感-鸭坦布苏病毒基因工程叁价疫苗》一文中研究指出鸭瘟、鸭禽流感和鸭坦布苏病毒是当前危害养鸭业的叁种最为重要的病毒性疾病。疫苗是控制病毒性疾病发生和传播最为有效的方法之一。鸭瘟病毒是一个十分理想的病毒载体用来递呈鸭其他病毒性疾病的免疫原型基因,用于构建多价疫苗。然而,当前的编辑鸭肠病毒基因组的方法包括同源重组和细菌人工染色体都不是十分的(本文来源于《中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集》期刊2016-10-19）
抗病毒基因工程论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
随着病原微生物耐药性日趋严重,以及疑难病症的个性化治疗需求增多,利用活体微生物药物进行疾病治疗越来越被关注。采用现代生物技术和合成生物学手段,将具有疾病治疗作用的效应物分子的合成基因导入微生物中,创造具有靶向治疗效果的活体微生物药物这是前沿性研究领域。本文阐述以病毒为治疗载体的活体药物的研究进展,包括用于疾病治疗的病毒的种类和所携带效应物的表达调控,为抗生素类小分子药物替代治疗提供借鉴方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抗病毒基因工程论文参考文献
[1].李希辰,雷欢,李雪,石晶,殷玉和.一种犬细小病毒基因工程抗体的制备[J].中国畜牧兽医.2019
[2].李远远,王鋆坦,李彩霞,徐钟.病毒基因工程药物研究进展[J].国外医药(抗生素分册).2019
[3].高晓磊,韩明宝,刘思桐,赵丽霞,朱秀同.1日龄雏鸡免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗安全性及效力的研究[J].中国动物保健.2019
[4].薛雨佳.抗猫细小病毒基因工程嵌合抗体研究[D].中国农业科学院.2018
[5].燕照玲,段俊枝,冯丽丽,陈海燕,齐红志.玉米抗病毒基因工程研究进展[J].南方农业学报.2017
[6].林雯.攻克石斑鱼病害我省科研有突破[N].厦门日报.2017
[7].张楠楠.猪流行性腹泻病毒基因工程疫苗的研制[D].南阳师范学院.2017
[8].邹忠,龚文孝,黄坤,金梅林.基于CRISPR/Cas9高效构建鸭肠炎病毒-鸭禽流感-鸭坦布苏病毒基因工程叁价疫苗[C].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集.2017
[9].章勇.郭万柱：开创我国动物病毒基因工程疫苗先河[N].中国畜牧兽医报.2017
[10].邹忠,黄坤,金梅林.基于CRISPR/Cas9技术构建鸭肠炎病毒载体-禽流感-鸭坦布苏病毒基因工程叁价疫苗[C].中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集.2016
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