MicroRNA-107负向调控结核分枝杆菌牛源人型分离株介导的巨噬细胞炎症反应

MicroRNA-107负向调控结核分枝杆菌牛源人型分离株介导的巨噬细胞炎症反应

论文摘要

MicroRNA(miRNA)是一类长度仅为19~22个核苷酸的单链非编码小分子RNA,在多种疾病中发挥着重要作用。本实验室前期从一结核牛体内成功分离到一株结核分枝杆菌1458株,并基于该菌建立了体外感染模型。将1458株感染巨噬细胞系THP-1后进行RNAseq分析,发现miR-107呈现显著下调表达。为确定miR-107在结核分枝杆菌(M. tb)1458株与巨噬细胞互作中的功能及其相关机制,本研究利用M. tb 1458株体外感染THP-1细胞,检测了miR-107感染M. tb 1458株及其热灭活状态下的动态变化,及感染相关信号通路(NF-Κb、P38、JNK和PI3K)调控途径。进一步确定了miR-107所诱发的IL-1β、IL-10、TNF-α和IL-6表达水平及M. tb 1458株对THP-1细胞侵袭能力的影响。结果显示,M. tb 1458株感染可显著下调THP-1细胞中miR-107的表达(P<0.001);并受到PI3K信号通路的调控;此外miR-107还能够显著抑制M. tb 1458株感染的THP-1细胞炎性因子IL-1β(P<0.05)、IL-10(P<0.05)、TNF-α(P<0.05)和IL-6(P<0.01)m RNA水平的表达,并显著促进M. tb 1458株对THP-1细胞的入侵(P<0.001)。结论:M. tb 1458株感染可显著下调THP-1细胞中miR-107的表达,依赖于PI3K信号通路,miR-107下调表达能够促进M. tb 1458株感染诱导的炎性细胞因子表达,抑制M. tb 1458株的入侵。本研究揭示了巨噬细胞抵抗M. tb感染的新型防御机制。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料
  •     1.1.1 细胞、细菌及培养
  •     1.1.2 主要试剂
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 THP-1细胞转染
  •     1.2.2 M.tb1458株感染
  •     1.2.3 参与调控miR-107表达的信号通路检测
  •     1.2.4 THP-1细胞内M.tb1458菌株计数
  •     1.2.5 THP-1细胞RNA的提取及反转录
  •     1.2.6 实时荧光定量PCR
  •     1.2.7 数据分析
  • 2 结果
  •   2.1 M.tb 1458株显著下调miR-107在巨噬细胞中的表达
  •   2.2 PI3K信号通路参与调控M.tb1458株感染诱导的miR-107下调表达
  •   2.3 miR-107负向调控M.tb 1458株诱导的炎性因子表达
  •   2.4 miR-107抑制剂抑制M.tb 1458株对THP-1细胞的入侵
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 朱一帆,陈颖钰,刘晗,索朗斯珠,牛家强,郭爱珍

    关键词: 结核分枝杆菌,巨噬细胞,炎性因子,侵袭

    来源: 中国奶牛 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 西藏农牧学院动物科学学院,华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,华中农业大学动物医学院

    基金: 国家自然基金面上项目(31472219),国家重点研发计划(2017YFD0500305)

    分类号: S852.61

    DOI: 10.19305/j.cnki.11-3009/s.2019.11.002

    页码: 9-14

    总页数: 6

    文件大小: 1514K

    下载量: 65

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