猪源牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定

猪源牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定

论文摘要

为了对临床疑似牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染病料进行确诊,并掌握致病原的生物学和遗传变异特征,试验通过临床样品PCR检测、病毒分离培养与细胞病变特征观察、理化特性试验、5′UTR基因序列分析等方法对临床病料进行了BVDV的分离和鉴定。结果表明:临床病料BVDV特异性引物PCR扩增为阳性,可引起单层MDBK细胞产生细胞病变,分离毒株的TCID50高达1×10-5.23/0.1 mL,其对氯仿、乙醚、胰酶、酸、热均敏感,在基于5′UTR基因的遗传进化树中其位于BVDV-1型的分支中,归属于BVDV-1a型,与登录号为JN400273.1的猪源BVDV-1a型毒株的亲缘关系最近,同源性达100%。说明试验获得了1株猪源BVDV分离毒株,属于BVDV-1a型,并掌握了该毒株的生物学特性和遗传特征。

论文目录

  • 1 材料
  •   1.1 细胞
  •   1.2 主要试剂与试剂盒
  • 2 方法
  •   2.1 临床病料的采集与处理
  •   2.2 临床病料的PCR检测
  •     2.2.1 引物的设计
  •     2.2.2 病毒RNA的提取
  •     2.2.3 RT-PCR扩增
  •   2.3 病毒的分离培养与细胞病变观察
  •   2.4 病毒含量的测定
  •   2.5 理化特性试验
  •   2.6 5′UTR基因的序列分析
  • 3 结果与分析
  •   3.1 临床病料样品的PCR检测
  •   3.2 病毒的分离培养与细胞病变观察
  •   3.3 TCID50的测定
  •   3.4 理化特性试验
  •   3.5 5′UTR基因的序列分析
  • 4 讨论与结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 梁洪,王怀禹,粟元文,魏玲

    关键词: 猪源牛病毒性腹泻病毒,分离,鉴定,基因,理化特性

    来源: 黑龙江畜牧兽医 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 南充职业技术学院

    基金: 南充市研发资金项目“南充地区猪细小病毒流行病学调查与病毒分离鉴定”(17YFZJ0067)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.07.0075

    页码: 90-92+178

    总页数: 4

    文件大小: 484K

    下载量: 134

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