导读:本文包含了末端酶小亚单位论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:猪链球菌,噬菌体,末端酶,大亚单位
末端酶小亚单位论文文献综述
毛紫微[1]（2013）在《猪链球菌噬菌体SMP末端酶大亚单位的生物学活性研究》一文中研究指出猪链球菌（Streptococcus suis, S. Suis）是常见的人畜共患病病原菌，其中猪链球菌2型是流行范围最广、致病力最强、危害最严重的猪链球菌，能导致猪脑膜炎、败血症、关节炎、心内膜炎、肺炎和人的脑膜炎，甚至会致人死亡，严重威胁着公共卫生安全。预防、治疗猪链球菌病一般采用抗生素，但随着抗生素的滥用，菌株的耐药性不断增强，给该病的防控带来了困难，基于噬菌体的治疗策略再次成为研究热点。末端酶（Terminase）是dsDNA病毒包装过程中的必要功能蛋白，其大亚单位在包装过程中往往行使全酶的作用，一般具有ATP酶活性和限制性内切酶活性。猪链球菌噬菌体SMP是一株猪链球菌2型的烈性噬菌体，但目前对该噬菌体的末端酶的编码基因和功能尚不清楚，本研究将通过大肠杆菌系统重组表达猪链球菌噬菌体末端酶大亚单位（TlsSMP），并研究TlsSMP融合蛋白的生物学活性。本文利用SWISS-MODEL、NCBI CDD和PSIPRED等蛋白结构分析软件预测了噬菌体（SMP）末端酶大亚单位，结果显示，末端酶大亚单位具有一个结构域。基于蛋白叁级结构的预测发现，末端酶大亚单位与G2P（噬菌体SPP1核酸酶功能域）同源性最高，达到30.5%，重迭区域位于240aa-412aa处，预测的末端酶大亚单位具有末端酶的结构特征。为了制备末端酶大亚单位，本文应用大肠杆菌重组表达系统获得了具有生物学活性的TlsSMP。以噬菌体SMP基因组为模板，采用PCR方法扩增SMP末端酶大亚单位基因（TlsSMP），构建pEasy-E1-Tls重组质粒，转化至大肠杆菌中。通过IPTG(终浓度为0.4mmol/L)于16℃诱导表达15h，表达产物经过SDS-PAGE分析，确定其为53.26kD大小的TlsSMP融合蛋白。Western-blotting实验进一步表明，TlsSMP融合蛋白可被特异性血清识别，呈可溶性表达。为了揭示重组TlsSMP的生物学功能，应用His-trap纯化柱纯化了融合蛋白，经浓缩后，浓度可达1-1.5mmol/L。基于磷酸检测试剂盒测定了TlsSMP融合蛋白水解ATP产生无机磷酸的水平，确认其具有ATP酶活性，进一步分析发现，TlsSMP在pH7、23℃和Mg2+存在的条件下，其ATP酶活性最强，其它金属离子如Ca2+、Mn2+和Co2+都对其有不同程度的抑制作用。除了ATP酶活作用外，末端酶大亚单位是否还具有限制性内切酶及DNA连接酶的作用，尚待进一步验证。鉴于噬菌体末端酶在噬菌体等病毒包装中的重要作用，通过深入研究可为研制安全、高效的抗病毒药物、控制dsDNA病毒感染提供可能。(本文来源于《上海交通大学》期刊2013-01-01）
申晓冬,张克斌,李明,胡晓梅,周莹冰[2]（2009）在《推定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位的DNA结合能力检测》一文中研究指出目的检测理论推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位(pap3p01基因)编码蛋白对特异性DNA的结合能力。方法通过PCR从噬菌体PaP3基因组扩增出pap3p01基因,克隆至表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JM109后,IPTG诱导表达目的蛋白,超声裂菌后发现目的蛋白质H6-PaP3P01存在于上清中,进而利用Ni-NTA亲合层析纯化蛋白。利用PCR与酶切方法获取可能含有末端酶小亚单位结合位点的DNA片段,并对其3′端进行生物素标记。最后采用凝胶迁移率改变实验检测H6-PaP3P01的DNA结合能力。结果成功构建了pQE-PaP3P01表达载体,获得的融合蛋白H6-PaP3P01表达量较高且全部存在于菌体超声后的上清中。经亲和层析初步纯化及脱盐处理后,H6-PaP3P01可与263 bp特异性DNA片段结合。结论成功构建并表达了推定的PaP3末端酶小亚单位重组蛋白H6-PaP3P01,并且检测到了该蛋白质对特异DNA的结合能力,初步证实了理论推定的正确性,为完善PaP3噬菌体包装机制的研究奠定了基础。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2009年05期）
申晓冬,张克斌,李明,周莹冰,蹇锐[3]（2006）在《铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位DNA结合能力的测定》一文中研究指出目的检测铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位与噬菌体基因组末端cos位点的结合能力。方法通过PCR扩增出末端酶大亚单位编码基因tls,经pMD-T18载体克隆至表达载体pQE31上,IPTG诱导表达,获得包涵体蛋白,用包涵体裂解液溶解包涵体,通过Ni-NTA亲和层析,分离出重组目的蛋白rTLS,透析复性后,与生物素标记的基因组末端cos片段进行结合反应,通过EMSA检测DNA滞后现象。结果成功构建了表达载体pQE-tls,获得了纯化的具有生物学活性的重组末端酶大亚单位rTLS,EMSA结果证实结合rTLS后的cos片段与无蛋白加入的对照组相比明显滞后。结论重组噬菌体PaP3末端酶大亚单位在体外可与基因组末端cos片段发生特异性结合,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2006年22期）
申晓冬,李明,饶贤才,胡晓梅,胡金川[4]（2004）在《噬菌体PaP3末端酶大亚单位的克隆表达》一文中研究指出末端酶 (terminase)是双链DNA病毒包装过程中 ,将病毒基因组多串联体 (concatemer)与病毒前衣壳连接 ,切割并转移单拷贝基因组进行前衣壳 (procapsid)的异源寡聚体 ,由一个大亚单位及 1～ 7个小亚单位组成。大亚单位具有A(本文来源于《微生物学杂志》期刊2004年05期）
末端酶小亚单位论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的检测理论推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位(pap3p01基因)编码蛋白对特异性DNA的结合能力。方法通过PCR从噬菌体PaP3基因组扩增出pap3p01基因,克隆至表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JM109后,IPTG诱导表达目的蛋白,超声裂菌后发现目的蛋白质H6-PaP3P01存在于上清中,进而利用Ni-NTA亲合层析纯化蛋白。利用PCR与酶切方法获取可能含有末端酶小亚单位结合位点的DNA片段,并对其3′端进行生物素标记。最后采用凝胶迁移率改变实验检测H6-PaP3P01的DNA结合能力。结果成功构建了pQE-PaP3P01表达载体,获得的融合蛋白H6-PaP3P01表达量较高且全部存在于菌体超声后的上清中。经亲和层析初步纯化及脱盐处理后,H6-PaP3P01可与263 bp特异性DNA片段结合。结论成功构建并表达了推定的PaP3末端酶小亚单位重组蛋白H6-PaP3P01,并且检测到了该蛋白质对特异DNA的结合能力,初步证实了理论推定的正确性,为完善PaP3噬菌体包装机制的研究奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
末端酶小亚单位论文参考文献
[1].毛紫微.猪链球菌噬菌体SMP末端酶大亚单位的生物学活性研究[D].上海交通大学.2013
[2].申晓冬,张克斌,李明,胡晓梅,周莹冰.推定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位的DNA结合能力检测[J].第叁军医大学学报.2009
[3].申晓冬,张克斌,李明,周莹冰,蹇锐.铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位DNA结合能力的测定[J].第叁军医大学学报.2006
[4].申晓冬,李明,饶贤才,胡晓梅,胡金川.噬菌体PaP3末端酶大亚单位的克隆表达[J].微生物学杂志.2004