论文摘要
为了研究分枝杆菌热休克蛋白（Hsp70）对猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白的免疫佐剂作用,以自聚肽ELK16为纯化标签,分别与Hsp70和PCV2 Cap基因融合后诱导表达,利用离心洗涤法进行融合蛋白纯化,获得了纯化的融合蛋白ELK16-Cap、ELK16-Hsp70和ELK16-Cap-Hsp70,其纯度高达95%、96%和85%,产量分别为92、84和83 mg/L;接着用PBS、ELK16-Cap、ELK16-Cap+弗氏不完全佐剂（IFA）、ELK16-Cap+ELK16-Hsp70和ELK16-Cap-Hsp70分别免疫小鼠,初免后21 d ELK16-Cap-Hsp70免疫组抗体水平达到最高;在二免后2周取免疫小鼠脾脏淋巴细胞,用试剂盒检测细胞因子表达,TNF-α浓度依次为588.55、802.55、995.55、1 382.55和1 719.55 pg/mL,IFN-γ浓度依次为46.30、92.22、155.56、470.37和518.15 pg/mL,IL-12浓度依次为14.72、28.06、20.83、31.39和34.72 pg/mL。这些研究结果表明,Hsp70对刺激PCV2 Cap蛋白ELISA抗体产生的作用优于IFA,但两者融合蛋白的刺激作用较强;与Cap蛋白融合的Hsp70对刺激TNF-α、IFN-γ和IL-12产生的作用较强,而ELK16-Hsp70+ELK16-Cap对3种细胞因子产生的刺激作用次之。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 王亚杰,吴双,吴植,朱善元,孙怀昌
关键词: 分枝杆菌,蛋白,融合表达,小鼠免疫,细胞因子
来源: 畜牧与兽医 2019年09期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室/江苏农牧科技职业学院,扬州大学兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心
基金: 江苏省农业科技自主创新资金项目CX(16)1055
分类号: S852.4
页码: 69-75
总页数: 7
文件大小: 2657K
下载量: 78
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