部分重金属离子对湖北钉螺的急性毒性作用及保护酶活力的影响

论文摘要

目的:探索铜（Cu2+）、镉（Cd2+）、汞（Hg2+）、铅（Pb2+）四种重金属离子对湖北钉螺（Oncomelania hupensis）的急性毒性作用,以及这四种重金属离子与湖北钉螺保护酶系SOD、CAT、POD三种酶活力的量效关系。方法:1.实验用湖北钉螺采集于铜陵市义安区钟鸣镇长江支流江滩。将铜（Cu2+）、镉（Cd2+）、汞（Hg2+）、铅（Pb2+）四种重金属离子设置五个浓度梯度,每组放10只钉螺,一定时间后,观察其活动状况,将正常开厣、有爬行活动记录为活螺;将未见开厣、未见爬行活动记录为活动受到抑制;螺口有白色团状物,或者厣与体相连掉出壳外不能自行缩回,或软体组织完全突出于壳外,或用针刺激软体组织头足部无反应,则判断为死亡。分别记录每组钉螺在24 h、48h、72 h、96 h时活动受抑制的数量,并计算EC50值;记录96 h时钉螺的死亡数量,计算96 h LC50值和安全浓度（SC）。2.将上述方法染毒处理24 h的钉螺取出,双蒸水清洗3遍,放入-80℃冰箱冷冻保存处理。一定时间后,取出冷冻保存的钉螺,室温解冻,体视显微镜下解剖并剔除螺壳,取出软体组织待用。用吸水纸吸去软体组织表面多余水分,取7只钉螺的软体,准确称重。按比例1:9,加入9倍体积的0.86%Na Cl溶液,在冰水浴条件下研磨匀浆。将组织匀浆放入离心管,0℃下2500 rmp离心10 min,取上清液,分装待测。按照试剂盒说明书分别测定SOD、CAT、POD活力。每组重复测定3次,取算术平均值。结果:1、重金属对钉螺的急性毒性作用:（1）Cu2+、Cd2+、Hg2+、Pb2+对钉螺24h半数有效浓度（24h EC50）与95%置信区间（见括号）分别是:0.74（0.61-0.98）、4.79（4.09-8.40）、1.90（1.48-4.85）、21.4（16.98-33.49）mg?L-1。（2）48h半数有效浓度分别为0.56（0.35-0.96）、3.52（2.40-7.79）、1.49（1.03-3.79）、9.98（6.82-12.80）mg?L-1。（3）72h半数有效浓度分别为:0.46（0.29-0.63）、1.70（1.00-2.28）、0.83（0.02-1.62）、7.90（5.78-9.83）mg?L-1。（4）96h半数有效浓度分别为:0.37（0.25-0.48）、1.26（0.67-1.70）、0.76（0.01-1.39）、5.42（1.28-8.15）mg?L-1;（5）Cu2+、Cd2+、Hg2+、Pb2+对钉螺96h半数致死浓度（96h LC50）与95%置信区间（见括号）分别是:0.43（0.29-0.56）、2.96（1.87-5.51）、1.12（0.69-1.91）、12.22（8.89-15.35）mg?L-1;安全浓度SC分别是:4.31、29.61、11.18、122.2μg?L-1。Cu2+对钉螺的毒性为高毒;Cd2+、Hg2+对钉螺的毒性为中毒、Pb2+对钉螺的毒性为低毒。2、不同浓度重金属胁迫对钉螺保护酶系活力的影响:（1）SOD活力:在Cu2+浓度2 mg·L-1时上升到最高值36.68 U/mgprot,在16 mg·L-1时下降到最低值22.79 U/mgprot（P<0.05）;Cd2+浓度在2 mg·L-1时SOD活力上升到最高值35.25 U/mgprot,在8 mg·L-1时下降到最低值25.37 U/mgprot（P<0.05）;Hg2+浓度在0.025mg·L-1时下降到最低值22.13 U/mgprot,在8 mg·L-1时升高到最高值33.53 U/mgprot,（P<0.05）;Pb2+浓度在5mg·L-1时上升到第一个高值,10mg·L-1时降到最低值25.71 U/mgprot,在80 mg·L-1时升高到最高值38.76U/mgprot（P<0.05）。（2）CAT活力:在Cu2+浓度0.5 mg·L-1时下降到最低值11.78 U/mgprot,在4 mg·L-1时上升到最高值26.14 U/mgprot,16 mg·L-1时下降到12.01 U/mgprot（P<0.05）;Cd2+浓度在0.25 mg·L-1时活力下降到14.48U/mgprot,在1 mg·L-1时上升到最高值18.50 U/mgprot,8 mg·L-1时酶活力值最低,为10.70 U/mgprot（P<0.05）;Hg2+浓度在0.025mg·L-1时CAT活力下降到第一个低值,在0.1 mg·L-1时到达最高值17.76 U/mgprot,0.8 mg·L-1时下降到最低值8.75 U/mgprot（P<0.05）;Pb2+浓度在5mg·L-1时上升到最高值22.27U/mgprot,在80 mg·L-1时降到最低值5.54 U/mgprot（P<0.05）。（3）POD活力:在Cu2+浓度1 mg·L-1时达到最高值6.75 U/mgprot,在16 mg·L-1时达到最低值2.80 U/mgprot,（P<0.05）;Cd2+浓度在0.25 mg·L-1时下降到最低值2.68U/mgprot,在1 mg·L-1时上升到最高值5.40 U/mgprot,在8 mg·L-1时下降到2.74U/mgprot,（P<0.05）;Hg2+浓度在0.05 mg·L-1时POD活力下降到最低值2.34U/mgprot,在0.2 mg·L-1时上升到最高值5.16 U/mgprot,在0.8 mg·L-1时下降到2.75 U/mgprot,（P<0.05）;Pb2+浓度在10 mg·L-1时上升到最高值6.07U/mgprot,在80 mg·L-1时下降到最低值3.03 U/mgprot,（P<0.05）。结论:1、四种重金属Cu2+、Cd2+、Hg2+、Pb2+对钉螺的毒性从大到小依次为Cu2+>Hg2+>Cd2+>Pb2+。Cu2+对钉螺的毒性为高毒;Cd2+、Hg2+对钉螺的毒性为中毒;Pb2+对钉螺的毒性为低毒。2、不同浓度的Cu2+、Cd2+、Hg2+、Pb2+对钉螺SOD、CAT、POD活力均有不同程度的影响。

论文目录

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 高梦阳

导师: 周书林

关键词: 湖北钉螺,急性毒性,保护酶

来源: 皖南医学院

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 皖南医学院

分类号: R384

总页数: 83

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