论文摘要
为了了解luxS基因和pfs基因变异情况,探索信号分子AI-2（Autoinducer-2,AI-2）体外合成的影响因素。本试验应用PCR法扩增了奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌E285的luxS和pfs基因,经酶切后插入原核表达载体pET-30a（+）中,经PCR和酶切鉴定后进行序列测定及分析,构建luxS和pfs基因的重组表达质粒pET-luxS和pET-pfs,经诱导、纯化获得可溶性重组LuxS蛋白和Pfs蛋白,利用纯化的重组蛋白LuxS和Pfs体外合成AI-2分子。结果表明,扩增获得的luxS基因和pfs基因高度保守,与GenBank中已发表的核苷酸序列同源性均达到98%以上;两基因在原核表达系统中均获得了高效表达,利用获得重组蛋白LuxS和Pfs体外催化SAH,获得了AI-2分子,其浓度为200μmol/L,对其活性检测显示为阴性对照DH5α的61倍。提示奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌E285的LuxS和Pfs蛋白在体外能催化SAH产生高活性的AI-2。为深入研究AI-2对E285的毒力基因表达、生物被膜形成的调控奠定基础。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 曹素芳,王金合,皇甫和平,康宇,陈奎荣,陈淑慧,张凡,赵雯娟,杨永磊
关键词: 奶牛隐性乳房炎,致病性大肠杆菌,基因
来源: 中国兽医杂志 2019年09期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 河南牧业经济学院动物医学院
基金: 河南省基础与前沿技术项目(152300410104),河南省高等学校重点科研项目(15A230014),河南牧业经济学院预防兽医学重点学科项目(MXK2016102),郑州市重点实验室建设项目
分类号: S852.61
页码: 3-6+11
总页数: 5
文件大小: 589K
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