结核菌重组基因rBCG-Rv2029c的克隆表达及免疫原性分析

论文摘要

目的:用结核分枝杆菌特异性抗原Rv2029构建结核重组疫苗（BCG-Rv2029）,在C57BL/6小鼠体内评估其免疫效应,并初步探讨其免疫机制。方法:PCR扩增基因Rv2029,构建重组质粒pMV261-Rv2029,转入卡介苗感受态细胞中,诱导表达并纯化Rv2029蛋白。以重组的rBCG-Rv2029c活疫苗为免疫原,皮下免疫C57BL/6小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血抗原特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体滴度水平,XTT检测脾淋巴细胞抗原特异性增殖反应,流式细胞仪观察CD4+T和CD8+T细胞比例变化,IFN-γ、IL-2检测试剂盒检测细胞培养基中细胞因子表达水平。结果:成功构建重组疫苗BCG-Rv2029C,并诱导表达重组蛋白。经免疫小鼠后,重组卡介苗rBCG-Rv2029c能诱导较BCG更高的IgG、IgG1和IgG2a抗体滴度水平,IgG2a/IgG1的变化提示rBCG-Rv2029c可诱导Th1型免疫反应。与BCG相比,rBCG-Rv2029c可诱导产生更强的特异性细胞增殖反应、刺激产生更多的杀伤性CD8+T细胞和CD4+T细胞、能诱导产生更高水平的IFN-γ、IL-2细胞因子。结论:重组结核病疫苗rBCG-Rv2029c可诱导产生较BCG更强且针对休眠MTB的特异性体液免疫和细胞免疫,是一株值得深入研究的新型结核病疫苗。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 薛士鹏,王涵,薛婷,党颍徐,夏西超

关键词: 结核分枝杆菌,克隆,免疫

来源: 中国免疫学杂志 2019年13期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 南阳医学高等专科学校基础医学部,平顶山学院医学院

基金: 河南省高等学校重点科研项目(18A330004),南阳市自然科学基础与前沿研究项目(2017JCQY010)

分类号: R392

页码: 1604-1608

总页数: 5

文件大小: 571K

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