裂解牛源大肠杆菌、链球菌的噬菌体分离鉴定及初步应用

论文摘要

奶牛子宫内膜炎是引起奶牛不孕的一个重要原因,是奶牛养殖中的常见疾病,同时还会造成奶牛泌乳量的大幅减少,降低养殖效益,严重制约了奶牛业的发展。随着抗生素的不合理使用,出现了很多耐药菌株,使得由细菌感染引起的奶牛子宫内膜炎的治疗遇到了前所未有的困难。作为细菌的原始杀手,噬菌体再一次引起了人们的关注。本研究利用实验室保存的来源于奶牛子宫内膜炎的大肠杆菌和链球菌作为宿主菌,采用双层平板法从污水中分离纯化到大肠杆菌毒性噬菌体EP-CE和链球菌毒性噬菌体SP48,鉴定了两株噬菌体的核酸类型,并进行了生物学特性和初步应用研究。结果表明,本研究中分离到的噬菌体EP-CE和噬菌体SP48具有很强的特异性,对乙醚和氯仿均不敏感。两者都是双股DNA病毒,EP-CE的基因组大于50kb,SP48的基因组大于61 kb。透射电镜观察噬菌体EP-CE属于肌尾病毒科,头部呈二十面体对称结构,头部长约70.9±0.35nm、宽约68.4±0.48 nm,尾部长约90.1±5.39 nm;噬菌体SP48属于长尾病毒科,头部呈二十面体对称结构,头部长约79.0±0.33 nm、宽约73±0.38 nm,尾部长约354±0.25 nm。噬菌体EP-CE在4055℃的或pH 69的环境下具有较好的稳定性,最佳感染复数为0.01,潜伏期约为20 min,爆发期约为100 min,平均爆发量约为26 PFU/cell;噬菌体SP48则在4045℃或pH 510的酸碱环境下具有较好的稳定性,最佳感染复数为10,潜伏期约30 min,爆发期约80 min,平均爆发量约45 PFU/cell。EP-CE和SP48分别对大肠杆菌和链球菌具有很强的体外裂解活性,安全性试验显示两株噬菌体对小鼠无毒副作用。子宫灌注噬菌体混合制剂可使宿主菌引起的家兔子宫内膜炎的子宫组织病变减轻,抗生素治疗组（A组）、噬菌体治疗组（B组）、预防组（E组）菌落数低于感染组（C组）的菌落数,A组、B组、E组与C组相比差异极显著（P<0.01）;A组的效果又高于B组,但差异不显著。可见EP-CE和SP48对宿主菌引起的家兔子宫内膜炎具有一定的预防和治疗作用。

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摘要

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前言

第一篇文献综述

1.1 牛子宫内膜炎的危害及防治现状

1.2 大肠杆菌和链球菌的危害

1.3 噬菌体治疗的研究进展

第二篇研究内容

第一章裂解牛源大肠杆菌、链球菌的噬菌体分离鉴定

1.1 试验材料

1.2 方法

1.3 结果

1.4 讨论

1.5 小结

第二章噬菌体EP-CE、SP48 的生物学特性检测

2.1 材料

2.2 方法

2.3 结果

2.4 讨论

2.5 小结

第三章噬菌体EP-CE、SP48 的初步应用

3.1 材料

3.2 方法

3.3 结果

3.4 讨论

3.5 小结

结论

参考文献

作者简介

致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 孙亮

导师: 徐凤宇

关键词: 奶牛子宫内膜炎,大肠杆菌毒性噬菌体,链球菌毒性噬菌体,生物学特性,初步应用

来源: 吉林农业大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 吉林农业大学

分类号: S852.61

DOI: 10.27163/d.cnki.gjlnu.2019.000637

总页数: 58

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裂解牛源大肠杆菌、链球菌的噬菌体分离鉴定及初步应用

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