细胞饼瞬时表达体系的优化

细胞饼瞬时表达体系的优化

论文摘要

细胞饼瞬时转化技术具有重要的应用前景,然而其转化效率的优化研究尚未见报道。通过农杆菌介导法,系统地比较不同农杆菌浓度,抗氧化剂以及表面活性剂的添加对细胞饼瞬时转化效率的影响。研究结果表明:1)侵染用农杆菌的浓度在较高水平(OD=1.0)时更有利于转化效率的提升;2)两种抗氧化剂中,辛硫酸效果较半胱氨酸为好。但两者均表现为低浓度对转化效率具有促进作用,而高浓度则表现为抑制作用;3)测试的两种表面活性剂,Triton X-100以及Silwet L-77对转化效率均具有显著提升作用,而Silwet L-77的作用则更为突出;4)在优化条件下,人白介素10的含量较对照高出3.66倍。本研究的结果可进一步提升细胞饼瞬时转化技术的应用前景,为后续这一技术的应用奠定了一定的理论基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 载体构建
  •   1.3 细胞饼制备
  •   1.4 瞬时转化
  •   1.5 蛋白提取与含量测定
  •   1.6 数据处理与统计分析
  • 2 结果
  •   2.1 农杆菌菌液浓度与培养时间对转化效率的影响
  •   2.2 抗氧化剂对转化效率的影响
  •   2.3 表面活性剂对转化效率的影响
  •   2.4 优化条件下细胞饼中IL-10的产量
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 韩娟,缪国鹏,张科贵,汪承润,王顺昌

    关键词: 细胞饼,瞬时转化,参数优化

    来源: 安阳工学院学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 社会科学Ⅱ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 淮南师范学院

    基金: 国家自然科学基金(31800256),安徽省自然科学基金(1708085QC52)

    分类号: Q2-33

    DOI: 10.19329/j.cnki.1673-2928.2019.02.009

    页码: 32-36

    总页数: 5

    文件大小: 1748K

    下载量: 18

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