导读:本文包含了腺病毒伴随病毒载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:病毒,腺病毒,载体,基因,疱疹,转染,凝血酶。
腺病毒伴随病毒载体论文文献综述
张欣松[1]（2006）在《一种新型腺病毒伴随病毒载体HIV疫苗的免疫效果观察》一文中研究指出人免疫缺陷病毒(HIV)引起的获得性免疫缺陷综合症(AIDS) 简称艾滋病,严重威胁着人类的健康。腺病毒伴随病毒(Adeno- associated virus,AAV)是最近被研究者重视的一种载体,目前国内外对AAV载体疫苗的研究尚处于起步阶段,对此类疫苗的免疫效果的报道极为少见。本文用日本横滨市立大学微生物学教研室研制的含有HIV-lenv基因的AAV载体疫苗(以下略为AAV- HIV)对BALB／c小鼠进行了口服免疫,检测了该疫苗所产生的细胞免疫、体液免疫状况,本研究采用了标准6小时51cr释放试验、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)等先进方法对口服AAV-HIV 免疫后小鼠体内所产生的CTL和IFN-γ含量进行了测定分析。实验结果表明,免疫后小鼠体内的CTL和γ-干扰素分泌T细胞的数量均显着增加,说明AAV-HIV使小鼠产生了强烈的细胞免疫应答,尤其是CTL反应。(本文来源于《第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编》期刊2006-06-01）
赵健,曹泽毅,廖秦平,杨怡殊,周玲[2]（2003）在《腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头状瘤病毒16型E6/E7基因的构建及应用》一文中研究指出目的 为了了解人乳头状瘤病毒 (Humanpapillomavirus ,HPV) 1 6型的E6 /E7基因在细胞恶性转化中所起的作用 ,利用腺病毒伴随病毒载体 (AAVHelper -FreeSystem)构建和表达人乳头状瘤病毒 1 6型E6 /E7基因。方法 在pLXSN1 6E6E7质粒中经PCR扩增回收HPV 1 6E6E7基因片段 ,连接于T载体上进行测序 ,将正确的HPV 1 6E6E7插入pAAV -IRES -hrGFP质粒 ,协同pAAV -RC质粒和pHelper质粒共转染HEK 2 93细胞 ,包装表达HPV 1 6E6E7基因的重组腺病毒伴随病毒 ,收获病毒 ,并检测病毒的感染效率。结果 在包装细胞系HEK 2 93细胞中能形成较高感染效率的腺病毒伴随病毒 ,激光共聚焦检测可发现HEK 2 93细胞内有绿色荧光蛋白表达 ,HEK 2 93细胞经PCR可扩增出特异性的HPV 1 6E6E7基因片段 ,经流式细胞仪检测重组病毒的感染效率为71 3%。结论 携带人乳头状瘤病毒 1 6型E6E7基因的腺病毒伴随病毒可感染细胞 ,并在细胞内表达 ,可望用于宫颈癌病因学的研究(本文来源于《中国妇产科临床》期刊2003年04期）
岑山,滕智平,张月,沈忠英,许锦阶[3]（2003）在《腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定》一文中研究指出目的 探讨人乳头瘤病毒 (HPV)的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用。方法 将人乳头瘤病毒 (HPV)的E6E7基因克隆至腺病毒伴随病毒表达载体中 ,通过包装的重组病毒感染 ,将E6E7基因导入并整合到永生 2 93细胞的基因组中。结果 本研究成功地构建了HPV18E6E7AAV病毒并感染了永生 2 93细胞 ,PCR Southern杂交分析表明E6E7基因在转化细胞 2 93TL中确有表达 ,转化细胞 2 93TC和 2 93TL具有明显的转化表型 ,和亲本 2 93细胞相比 ,生长速度快 ,接触抑制消失 ,集落形成率提高 2 0倍 ,且集落明显增大 ,形成时间短。结论 成功地构建了HPV18E6E7AAV病毒 ,HPV18E6E7基因可引起永生化人上皮细胞 2 93的恶性转化。此病毒可用于感染正常上皮细胞 ,研究其致癌机制(本文来源于《中华实验和临床病毒学杂志》期刊2003年01期）
孟宪敏,吴小兵,米立国,伍志坚,赵秀文[4]（2002）在《携带反义凝血酶受体和p21双基因共表达腺病毒伴随病毒载体的构建与包装》一文中研究指出为探讨双基因共表达对再狭窄的防治作用 ,分别构建了含反义凝血酶受体 (ATR)或 /和 p2 1单、双基因及报告基因绿色荧光蛋白 (GFP)的腺病毒伴随病毒 (AAV)载体 .上述载体经脂质体介导转染BHK 2 1细胞 ,G4 18筛选获得整合有外源基因的细胞株 .克隆形成过程中显示单、双基因转染后细胞增殖受到了不同程度的抑制 ,克隆形成速度减慢 ,细胞形态改变 ,且双基因的作用明显大于单基因 .以绿色荧光出现说明报告基因得到表达后 ,又以DNA印迹证实ATR和p2 1单、双基因已整合于细胞基因组中 ,并维持了凝血酶受体 (TR)基因的反义位置 .半定量RT PCR证实TR基因表达降低 ,p2 1基因表达升高 ,ATR和p2 1(AP)双基因得到了共表达 .以具有可提供复制和包装功能的重组单纯疱疹病毒rHSV rc/ΔU12分别感染载有不同基因的BHK细胞株 ,包装产生重组AAV (rAAV)病毒 ,并经点杂交法测定其滴度 (每毫升病毒液中所含病毒颗粒数 ) .rAAV/AP中ATR与 p2 1的病毒颗粒数分别为 1 0 2× 10 13 /ml和 1 0 8× 10 13 /ml,单基因rAAV/ATR的滴度为 6 5 4× 10 12 /ml,rAAV/P2 1为 1 0 6× 10 13 /ml,为进一步的体内外实验奠定了物质基础 .(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2002年04期）
吴小兵,董小岩,伍志坚,屈建国,侯云德[5]（2000）在《一种快速高效分离和纯化重组腺病毒伴随病毒载体的方法》一文中研究指出利用2型腺病毒伴随病毒(adeno-associated virus type 2, AAV-2)能够抵抗氯仿的特性, 采用"氯仿处理-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提" 3个步骤分离、浓缩和纯化重组腺病毒伴随病毒(recombinant adeno-associated virus, rAAV), 整个纯化过程可在4 h内完成. 最终从5个转瓶生长的4×109个载体生产细胞中可得到5×1013 病毒颗粒/mL, SDS-聚丙烯酰胺凝胶结果表明, rAAV的纯度大于95%, 电子显微镜下绝大多数病毒颗粒的结构完整. 纯化后的rAAV仍保持较强的感染性, 其感染性滴度达到2×1012 转导单位(transducing unit, TU)/mL, 总的病毒颗粒数与感染性病毒颗粒数的比值为25. 为rAAV 大规模生产后的纯化提供了一种简便、快速、低成本的方法.(本文来源于《科学通报》期刊2000年19期）
伍志坚,吴小兵,侯云德[6]（2000）在《系列腺病毒伴随病毒载体的构建及表达β-半乳糖苷酶的研究》一文中研究指出为了便于开展用重组腺病毒伴随病毒 (recombinantadeno associatedvirus,rAAV)载体进行基因治疗的研究 ,构建了叁种通用型AAV载体 pWAV 1、pWAV 2和 pSNAV ,每种载体均含有AAV 2两端的倒转末端重复序列 (in vertedterminalrepeats,ITR) ,中间依次为巨细胞病毒 (CMV)立早增强子和启动子、多克隆位点和 polyA信号。研究者只需将目的基因正向插入多克隆位点 ,即可获得具有完整表达盒的AAV载体质粒。pWAV 1的多克隆位点包括NheⅠ、XhoⅠ、PstⅠ和BamHⅠ ,可插入外源基因的最大容量为 3 3kb ;pWAV 2的多克隆位点为 Kpn Ⅰ、EcoRⅠ、SalⅠ ;pSNAV的多克隆位点为Kpn Ⅰ、EcoRⅠ、SalⅠ和 BglⅡ ,二者所能装载的外源基因容量均为3 6kb。同时 ,还构建了携带 β 半乳糖苷酶基因的AAV载体 pAV lacZ、pSNAV lacZ ,并对制备rAAV的常规方法———共转染法进行了改进。用先前报道的具有rAAV包装功能的一种重组单纯疱疹病毒 (recombinantherpessim plexvirus,rHSV)分别感染经pAV lacZ、pSNAV lacZ转染的BHK 2 1细胞 ,可获得携带 β 半乳糖苷酶基因的rAAV ,滴度达到 5× 10 4 转导单位 (TU) /ml,为实现“一种病毒感染一个载体细胞株”的rAAV生产策略提供了可能(本文来源于《病毒学报》期刊2000年01期）
姚二梅,冯泽华,吴小兵,颜子颖,侯云德[7]（1998）在《腺病毒伴随病毒载体介导的I型单纯疱疹病毒胸苷激酶基因转移及其杀肿瘤效应》一文中研究指出目的研究腺病毒伴随病毒（ＡＡＶ）载体介导杀肿瘤基因的转移及其在肿瘤治疗方面的应用。方法应用作者构建的腺病毒伴随病毒载体，克隆Ｉ型单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶＩ－ＴＫ）基因，构建质粒ｐＡＣＴＫ－１９。用ｐＡＣＴＫ－１９转染５型腺病毒（Ａｄ５）感染的重组ＡＡＶ包装细胞系ＡＥ１２０１，获得重组病毒ｒＡＡＶ／ＡＣＴＫ。再用此重组病毒感染肺癌细胞系Ａ５４９，并联合丙氧鸟苷（ＧＣＶ）作用，研究其体外对肺癌细胞的杀伤作用。结果重组ｒＡＡＣ／ＡＣＴＫ的滴度为３４×１０５ＣＦＵ／ｍｌ，感染肺癌细胞系Ａ５４９，实现了ＴＫ基因的转移及与细胞染色体的整合和表达，对Ａ５４９细胞具有杀伤作用。结论腺病毒伴随病毒载体能成功地实施对肺癌细胞系Ａ５４９的基因转移和介导杀肿瘤效应(本文来源于《中华实验和临床病毒学杂志》期刊1998年03期）
姚二梅,冯泽华,郑毅,侯云德[8]（1998）在《通用型腺病毒伴随病毒载体的构建》一文中研究指出目的构建含腺病毒伴随病毒（ＡＡＶ）基因组两端的反向重复序列（ＩＴＲｓ）和表达必须元件如启动子、多克隆位点和ＰｏｌｙＡ信号的通用型载体质粒ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ，并获得重组ＡＡＶ（ｒＶＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ）。方法通过ＤＮＡ重组技术，将ＳＶ４０ＰｏｌｙＡ、Ｎｅｏ基因、ＣＭＶ－ＩＥ启动子和多克隆位点组成表达盒子，取代含ＡＡＶ全基因组质粒ｐＳＳＶ９中ＡＡＶ结构基因部分，构建成质粒ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ。用ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ转染５型腺病毒（Ａｄ５）感染的重组ＡＡＶ包装细胞系ＡＥ１２０１，能获得重组病毒ｒＡＡＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ。提取ｒＡＡＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ感染细胞的染色体，用Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交分析重组病毒基因组在感染细胞中的存在情况。结果质粒ｐＡＣＲ－Ｎｅｏ转染包装细胞系后所得ｒＡＡＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ滴度为４．２×１０５ＣＦＵ／ｍｌ，并且ｒＡＡＶ／ＡＣＲ－Ｎｅｏ能在转导细胞内实现其基因组与细胞染色体的整合。结论成功地构建了通用型ＡＡＶ载体，为今后的ＡＡＶ载体研究、基因治疗和临床应用打下了基础(本文来源于《中华实验和临床病毒学杂志》期刊1998年02期）
姚二梅,冯泽华,侯云德[9]（1997）在《腺病毒伴随病毒载体的研究进展》一文中研究指出腺病毒伴随病毒载体的研究进展姚二梅冯泽华侯云德随着对人类基因愈加深入的了解，以及对真核基因改造和转移技术的发展，人类基因治疗已成为现实。基因治疗的关键问题就是要寻找有效的基因转移系统。在病毒介导和非病毒介导的两类基因转移系统中，感染性的重组病毒载体是...(本文来源于《中华实验和临床病毒学杂志》期刊1997年01期）
腺病毒伴随病毒载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 为了了解人乳头状瘤病毒 (Humanpapillomavirus ,HPV) 1 6型的E6 /E7基因在细胞恶性转化中所起的作用 ,利用腺病毒伴随病毒载体 (AAVHelper -FreeSystem)构建和表达人乳头状瘤病毒 1 6型E6 /E7基因。方法 在pLXSN1 6E6E7质粒中经PCR扩增回收HPV 1 6E6E7基因片段 ,连接于T载体上进行测序 ,将正确的HPV 1 6E6E7插入pAAV -IRES -hrGFP质粒 ,协同pAAV -RC质粒和pHelper质粒共转染HEK 2 93细胞 ,包装表达HPV 1 6E6E7基因的重组腺病毒伴随病毒 ,收获病毒 ,并检测病毒的感染效率。结果 在包装细胞系HEK 2 93细胞中能形成较高感染效率的腺病毒伴随病毒 ,激光共聚焦检测可发现HEK 2 93细胞内有绿色荧光蛋白表达 ,HEK 2 93细胞经PCR可扩增出特异性的HPV 1 6E6E7基因片段 ,经流式细胞仪检测重组病毒的感染效率为71 3%。结论 携带人乳头状瘤病毒 1 6型E6E7基因的腺病毒伴随病毒可感染细胞 ,并在细胞内表达 ,可望用于宫颈癌病因学的研究
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
腺病毒伴随病毒载体论文参考文献
[1].张欣松.一种新型腺病毒伴随病毒载体HIV疫苗的免疫效果观察[C].第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编.2006
[2].赵健,曹泽毅,廖秦平,杨怡殊,周玲.腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头状瘤病毒16型E6/E7基因的构建及应用[J].中国妇产科临床.2003
[3].岑山,滕智平,张月,沈忠英,许锦阶.腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定[J].中华实验和临床病毒学杂志.2003
[4].孟宪敏,吴小兵,米立国,伍志坚,赵秀文.携带反义凝血酶受体和p21双基因共表达腺病毒伴随病毒载体的构建与包装[J].生物化学与生物物理进展.2002
[5].吴小兵,董小岩,伍志坚,屈建国,侯云德.一种快速高效分离和纯化重组腺病毒伴随病毒载体的方法[J].科学通报.2000
[6].伍志坚,吴小兵,侯云德.系列腺病毒伴随病毒载体的构建及表达β-半乳糖苷酶的研究[J].病毒学报.2000
[7].姚二梅,冯泽华,吴小兵,颜子颖,侯云德.腺病毒伴随病毒载体介导的I型单纯疱疹病毒胸苷激酶基因转移及其杀肿瘤效应[J].中华实验和临床病毒学杂志.1998
[8].姚二梅,冯泽华,郑毅,侯云德.通用型腺病毒伴随病毒载体的构建[J].中华实验和临床病毒学杂志.1998
[9].姚二梅,冯泽华,侯云德.腺病毒伴随病毒载体的研究进展[J].中华实验和临床病毒学杂志.1997
论文知识图
